微生物工程第四章發(fā)酵工業(yè)的無(wú)菌技術(shù)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 培養(yǎng)基豐富 ， 易染菌 ，營(yíng)養(yǎng)成分迅速被消耗 ， 嚴(yán)重抑制菌生長(zhǎng)和合成代謝產(chǎn)物 。 ? 消毒 (disinfection):用物理或化學(xué)方法殺死 空氣 、地表以及容器和器具 表面 的微生物 。 C. 酵母菌 ? 易污染細(xì)菌以及野生酵母菌 D. 疫苗 ? 無(wú)論污染的是活菌 、 死菌或內(nèi)外毒素 ， 都應(yīng)全部廢棄 。 污染原因分析方法： （ 1）種子帶菌的防治 ? 培養(yǎng)基及器具徹底滅菌 ? 避免菌種在移接過(guò)程中受污染 ? 避免菌種在培養(yǎng)及保藏過(guò)程中污染 3. 雜菌污染的途徑及其預(yù)防 （ 2）過(guò)濾空氣帶菌及其防治 ?正確選擇采氣口 高處采氣、前置粗過(guò)濾器 ?設(shè)計(jì)合理的空氣預(yù)處理流程 減少含油量和濕度 ?設(shè)計(jì)和安裝合理的空氣過(guò)濾器 介質(zhì)選擇 （ 3）設(shè)備的滲漏或“死角”造成的染菌及其防治 設(shè)備的滲漏染菌： 發(fā)酵設(shè)備、管道、閥門的 破損 等而引起的污染。 Nt/N0=kR/(kRkS) [exp(kst)ks/kR exp(kRt)] NR：耐熱性活芽孢數(shù)； Ns：敏感性活芽孢數(shù) ND：死亡的芽孢數(shù)； N0：初始活芽孢數(shù) 。 ? NaCl含量： ?低濃度（ 1%2%）對(duì)微生物有保護(hù)作用； ?高濃度（ 8%10%以上）減弱微生物的耐熱性。 分批滅菌與連續(xù)滅菌的比較 （適用于大型罐） ? 連續(xù)滅菌的缺點(diǎn)： ?對(duì)小型罐無(wú)優(yōu)勢(shì)，不方便，對(duì)設(shè)備要求高； ?蒸汽波動(dòng)時(shí)滅菌不徹底； ?當(dāng)培養(yǎng)基中含有固體顆粒或有較多泡沫時(shí)，以分批滅菌好，可防止滅菌不徹底。 ? 過(guò)濾除菌： 采用定期滅菌的介質(zhì)來(lái)阻截流過(guò)的空氣所含的微生物而取得無(wú)菌空氣 。 ① 當(dāng) X一定時(shí) ， T1→T2， 導(dǎo)致 Φ1→Φ2 ， 則 X1=(P1Φ1Ps1) X2=(P2Φ2Ps2) ∵ X1=X2 ∴ Φ2=Φ1(PS1/PS2)(P2/P1) （ 式 426） （ 1） Φ與 X的關(guān)系 ② 當(dāng) X發(fā)生變化 ， 即有水析出時(shí) ， X降低 ， 此時(shí) Φ2=100%， 定義：當(dāng) Ф=1時(shí) ， 空氣中水蒸氣已飽和 ， 此時(shí)溫度稱為 露點(diǎn) Td。 ? 針對(duì)不同地區(qū)，設(shè)計(jì)合理的空氣預(yù)處理工藝流程，以達(dá)到除油、水和雜質(zhì)的目的 。 4. 發(fā)酵工業(yè)培養(yǎng)基滅菌的方式主要有 分批滅菌 和 連續(xù)滅菌 2種。 75%乙醇擦拭雙手屬于 （ ） A．濕熱滅菌 2．下列關(guān)于發(fā)酵工程的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（ ） A．發(fā)酵工程的產(chǎn)品是指微生物的代謝產(chǎn)物和菌體本身 B．通過(guò)人工誘變選育新品種 C．培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備和菌種必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌 D．環(huán)境條件的變化，不僅影響菌體的生長(zhǎng)，而且影響代謝產(chǎn)物的形成 思考題： ，滅菌一詞指的是 ( C )。 所以，當(dāng) t35℃ ， 繼續(xù)冷卻時(shí)，有水析出 。 空氣壓縮和壓縮空氣的冷卻 ? 例 41： 20oC的大氣被壓縮至表壓 度是多少？ 解： T1=20+273=293k P2/P1=（ +） /= m= T2=T1(P2/P1)(m1)/m=293 ∴ t2=389273=116oC ? 絕對(duì)濕度： 1m3 濕空氣中含有的水蒸氣絕對(duì)量 (kg) ? 相對(duì)濕度（ Φ）： 空氣的絕對(duì)濕度與同溫度下飽和絕對(duì)濕度之比值或者空氣中水蒸汽分壓與同溫度時(shí)的飽和水蒸汽壓之比值，稱為空氣的相對(duì)濕度。 4. 發(fā)酵培養(yǎng)基及設(shè)備管道滅菌技術(shù) 溫度 維持時(shí)間 程序 ? 空氣除菌的必要性 好氧發(fā)酵需大量空氣 ， 空氣帶菌 是發(fā)酵染菌的主要原因之一 。 2. 滅菌時(shí)間的估算 例 1： 有一發(fā)酵罐內(nèi)裝 40m3培養(yǎng)基，在 121℃ 溫度下實(shí)罐滅菌，原污染程度為每 1ml有 2 105個(gè)耐熱細(xì)菌芽孢，已知 121℃ 時(shí)滅菌速度常數(shù) k=，求滅菌失敗機(jī)率為 。exp(39。 ? 相對(duì)熱阻： 指某一微生物在某一條件下的致死時(shí)間與另一微生物在相同條件下的致死時(shí)間之比。 ： 在 pH很低下能夠生長(zhǎng)。 （一）污染的危害 A． 細(xì)菌 ? 谷氨酸：發(fā)酵周期短 ， 培養(yǎng)基不太豐富 ， 較少染雜菌 ， 但噬菌體威脅大 。 ? 除菌 (degermation): 用 過(guò)濾方法 除去空氣或液體中的微生物及其孢子 。 ? 青霉素：怕染細(xì)短產(chǎn)氣桿菌 ? 鏈霉素：怕染細(xì)短桿菌 、 假單孢桿菌和產(chǎn)氣桿菌 ? 四環(huán)素：怕染雙球菌 、 芽孢桿菌和莢膜桿菌 ? 檸檬酸：怕染青霉菌 ? 肌苷 （ 酸 ） ：怕染芽孢桿菌 ? 谷氨酸：怕染噬菌體 ， 易造成連續(xù)污染 常見發(fā)酵產(chǎn)品容易污染的雜菌： ? 種子擴(kuò)大時(shí)期染菌 滅菌后棄去 ? 發(fā)酵前期染菌 應(yīng)迅速重新滅菌，補(bǔ)充必要的營(yíng)養(yǎng)成分，重新接種 （ 2）不同發(fā)酵時(shí)期染菌對(duì)發(fā)酵的影響 ? 發(fā)酵中期染菌 挽救困難，應(yīng)早發(fā)現(xiàn)，應(yīng)根據(jù)各種發(fā)酵的特點(diǎn)和具體情況盡快處理 。 “死角”： 蒸汽不能到達(dá)預(yù)定的滅菌部位或該部位的冷空氣不能在加熱過(guò)程中排凈。 kR：耐熱性芽孢的比死亡速率； ks：敏感性芽孢的比死亡速率； 在 T相同時(shí)，對(duì)數(shù)與非對(duì)數(shù)定律的滅菌時(shí)間 t不同。 5. 影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素 （ 2） 培養(yǎng)基 pH ? ， 微生物最耐熱 ， pH， 滅菌所需時(shí)間短 （ 表 46） 。 優(yōu)點(diǎn) ? 設(shè)備投資較少 ? 染菌的危險(xiǎn)性較小 ? 人工操作較方便 ? 對(duì)培養(yǎng)
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