白芨組織培養(yǎng)實(shí)施方案-文庫吧在線文庫
【正文】 體積的液體。⑩器械架：在無菌操作期間用來放置滅菌的器械。②烘箱：用來烘干器械。結(jié)合盧氏當(dāng)?shù)貙?shí)際，探索采用白及無菌播種的技術(shù)路線，通過不同濃度和培方的培養(yǎng)基實(shí)現(xiàn)白及組織培養(yǎng)的最佳技術(shù)路線，建立白及快繁體系。又因白及為地生蘭的一種，花開艷麗，被作為庭院、居室及園林景觀綠化苗木大量應(yīng)用。分布在中國、日本以及緬甸北部，主產(chǎn)于貴州、四川、湖南、湖北、安徽、河南、浙江、陜西等地。傳統(tǒng)的白及繁殖方法大多以分株為主，即將塊莖分成小塊種植，但繁殖系數(shù)低，大面積發(fā)展對(duì)種源消耗大，不宜推廣且難以滿足市場需求。另一方面用種子作為外植體操作較容易，并且組培過程中萌發(fā)率高，培養(yǎng)的幼苗生長較為迅速，因此，種子作為外植體應(yīng)用比較廣泛，大部分的組培研究都選用種子。⑤洗耳球：用來輔助吸取、轉(zhuǎn)移少量液體。③鐵絲筐：用來盛放滅菌容器等物品。常用的規(guī)格有50mL、100mL、500mL、1000mL。⑧分析天平：用來稱取少量有化學(xué)試劑，進(jìn)行化學(xué)分析。（5）接種器械①超凈工作臺(tái)：用來過濾通過接種工作臺(tái)面的空氣，以便進(jìn)行無菌操作。②培養(yǎng)皿：用來作為外植體的培養(yǎng)容器。組培實(shí)驗(yàn)室具體設(shè)計(jì)包括：準(zhǔn)備室：(1)進(jìn)行藥品、器具和實(shí)驗(yàn)材料的保存、消毒以及培養(yǎng)基的配制、滅菌、分裝等。MS固體培養(yǎng)基可用來誘導(dǎo)愈傷組織，或用于胚、莖段、莖尖及花藥培養(yǎng)，是目前普遍使用的培養(yǎng)基。鐵鹽：鐵鹽要單獨(dú)配制?？砂从昧康?00倍或1000倍配制母液，配制時(shí)要單個(gè)稱量，分別貯藏。④用1 mol/L的氫氧化鈉或鹽酸，滴入③中的培養(yǎng)基里，每次只滴幾滴，滴后攪拌均勻，并用PH試紙（或酸度計(jì)）測其PH值。選擇合適的部位作為外植體，采回后經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，如清除殘留的莖稈、剪去干枯的花序、分類篩選等，然后進(jìn)行消毒處理。無菌播種培養(yǎng)基中種子萌發(fā)出現(xiàn)圓球狀綠色芽點(diǎn)，及時(shí)轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，萌發(fā)大量叢生芽。一般來說，春季氣溫逐漸回升,有利試管苗適應(yīng)自然環(huán)境,最宜移栽。馴化時(shí)間35個(gè)月后等外界氣溫逐漸回升,有利組培苗適應(yīng)自然環(huán)境，最宜移栽。溫度在10℃以上，30℃以下，都能正常生長，20℃左右最為理想。將壟整平整細(xì)后鋪上提前準(zhǔn)備的馴化基質(zhì)，然后將組培苗用23d逐漸開瓶，并放在棚里適應(yīng)7—10d。例如：林下腐殖土、雜草秸稈腐熟土、黑色沙壤土加少量鋸末等都可以，推薦主要成分使用珍珠巖30%+膨化蛭石30%+泥炭10%。另外,苔蘚（水苔）的保濕性和透氣性良好,可作為移栽基質(zhì)，將其平鋪于白及幼苗根部保濕。栽好后，澆足定根水，置于陰涼處。培養(yǎng)基為：MS+6BA mg/L，其中含蔗糖2%、%、。無菌播種培養(yǎng)基配方為：MS+6BA mg/L +NAA ，其中含蔗糖3%、%、。（3）培養(yǎng)基的滅菌與保存培養(yǎng)基配制完畢后，應(yīng)立即滅菌。至于蔗糖、瓊脂等，可按配方中要求，隨稱隨用。有機(jī)物質(zhì)：主要指氨基酸和維生素類物質(zhì)。MS培養(yǎng)基主要包含5種主要成分：大量元素：大量元素包括硝酸銨等用量較大的幾種化合物。外設(shè)緩沖間放置拖鞋、工作服、工作帽等。⑤橡皮筋：用來束緊培養(yǎng)容器的封口材料。⑤解剖刀：用來切割植物材料。④無菌濾紙：用來汲取器材、植物材料表面的水分。常用的規(guī)格有1mL、5mL、10mL (或可用移液器替換) 。
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