農(nóng)作物組織培養(yǎng)-文庫吧在線文庫
【正文】 B5有機(jī)物配制 （所用試劑均為 sigma產(chǎn)品） 藥品 摩爾濃度 （ M/L） 質(zhì)量濃度 （ g/L） 備注 FeSO47H2O) 19/37 KH2PO4 17 CaCl2 (CaCl2H2O） （ 或 ） ZnSO4 花藥培養(yǎng)： 是將花粉發(fā)育至一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，以形成花粉胚或愈傷組織進(jìn)而分化成植株的技術(shù)。 二 研究過程 ? ? ? ? 花藥和花粉培養(yǎng)基本流程： 預(yù)處理花藥（物理或生理逆境） 收集具胚性小孢子的花藥，或離心收集胚性小孢子 培養(yǎng)（充足的營(yíng)養(yǎng)、合適的溫光、或條件培養(yǎng)）形成胚狀體 胚狀體轉(zhuǎn)移至固化培養(yǎng)基上”萌發(fā)”形成小植株。 機(jī)械游離 （ 1）磁攪拌法 用磁力攪拌器攪拌培養(yǎng)液中的花藥，使花粉游離出來； （ 2）超速旋切法 通過攪拌器中的高速旋轉(zhuǎn)刀具破碎花蕾、穗子、花藥，使小孢子游離出來（此法應(yīng)用最廣）。 （ 1）基因型 植物基因型是影響雄核發(fā)育的最重要的因素之一。 使用傾向：復(fù)合激素 馮雙華等提出秈型材料用 mg/L 2,4D+ mg/LNAA誘導(dǎo)效果較好， mg/L 6BA+ mg/L NAA+ mg/L IAA分化效果較好。 （ 3）植株形態(tài)學(xué)鑒定法 單倍體植株瘦弱，葉片窄小，花小柱頭長(zhǎng)，花粉粒小，不結(jié)實(shí)。 1999，美國(guó)洛克菲勒基金會(huì)的 Toneeson在 Science 撰文指出， 現(xiàn)代生物技術(shù)育種的兩大支柱是基因工程育種和與分子標(biāo)記相結(jié)合的加倍單倍體育種（ DH育種）， 后者效率高，成本低，特別適合于發(fā)展中國(guó)家的國(guó)情。玉米莖尖和根尖離體培養(yǎng)有利于促進(jìn)完整玉米植株的生長(zhǎng) ,并且在取材上不受季節(jié)限制。 玉米莖尖轉(zhuǎn)化 ? 取出 MS固體培養(yǎng)基中的芽放在無菌濾紙上 ? 切根 ? 鑷子夾胚軸，在莖尖處用刀尖切半邊。馬鈴薯原產(chǎn)于拉丁美洲，當(dāng)被發(fā)現(xiàn)可以食用后，很快傳到世界各地，成為栽培很廣的一種作物。地下莖包括主莖的地下部分、匍匐莖和塊莖。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 生物學(xué)習(xí)性 馬鈴薯性喜冷氣候，不耐高溫和霜凍，解除休眠的塊莖 4℃ 下發(fā)芽，發(fā)芽適溫為 12~18℃ 。通過微莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)能從馬鈴薯體內(nèi)脫除 PLRV、 PVY、 PVA、 PAF、 PVG、PVM、 PSW等病毒。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 我國(guó)在 70年代用莖尖組織培養(yǎng)方法得到脫毒馬鈴薯試管苗，并成功地獲得脫毒復(fù)壯的馬鈴薯，開始了脫毒種薯的生產(chǎn)和推廣。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 2．莖尖培養(yǎng)脫毒 （ 1） 取材和培養(yǎng) 一般多采用在室內(nèi)發(fā)芽，芽經(jīng)熱處理（ 38℃ ） 2周。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 (3) 馴化 為增強(qiáng)試管苗對(duì)溫室內(nèi)環(huán)境條件的適應(yīng)能力，移植前對(duì)試管苗要進(jìn)行光、溫鍛煉。覆膜一周（但不要壓緊），濕度 80%以上，期間噴水 2次。在消毒的研缽中研成糊狀，用紗布濾出汁液，再用蒸餾水稀釋１０倍作為接種物，在鑒定寄主植物的葉面，６００目的金剛砂混入接種物中，然后用左手心緊靠在寄主的背面，以右手實(shí)指蘸取接種液，均勻的在葉背面擦過，以不造成葉片產(chǎn)生傷痕為度，最后把葉面上多余的接種物用清水沖洗干凈，放臵在１５～２４的防蟲室中，一般５－１０天可發(fā)病 。 :34:2117:34Mar2327Mar23 1故人江海別，幾度隔山川。 17:34:2117:34:2117:343/27/2023 5:34:21 PM 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 , March 27, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 3月 27日星期一 5時(shí) 34分 21秒 17:34:2127 March 2023 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 2023年 3月 27日星期一 下午 5時(shí) 34分 21秒 17:34: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 2023年 3月 下午 5時(shí) 34分 :34March 27, 2023 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。目前在生產(chǎn)上來用的方法很多，下面介紹主要的幾種。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 四、馬鈴薯無病毒苗的鑒定材料 指示植物鑒定 在馬鈴薯的病毒鑒定中，汁液鑒定是最常用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和紡錘塊狀病毒很容易通過汁液來接種。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 3. 脫毒苗切繁 基礎(chǔ)苗成活進(jìn)入正常后便可切繁，但切繁量的多少和質(zhì)量的高低，除與前邊提到的水與溫濕度條件有關(guān)外，能否掌握正確的切繁方法和適宜的切繁苗齡也是非常重要的。 23周愈傷， 45周綠點(diǎn)， 36月長(zhǎng)成 23厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。到目前為止，我國(guó)仍未建立國(guó)家級(jí)的脫毒種薯質(zhì)量監(jiān)督和病毒檢測(cè)制度。 濱 州 職 業(yè) 學(xué) 院 我國(guó)的馬鈴薯平均單產(chǎn)僅為 /公頃，是世界單產(chǎn)最高國(guó)這瑞士（ /公頃）的1/4。土壤板結(jié)，薯塊表面粗糙和薯形不整。 (5) 果實(shí)、種子 馬鈴薯果實(shí)為球形或橢圓形漿果。馬鈴薯病毒可使塊莖產(chǎn)量減少 50%~80%。后期的管理也于前者相近。 ? 移栽前，可將培養(yǎng)物不開口移到自然 光照下鍛煉 23天，然后再開口練苗 12天，以適應(yīng)將來自然濕度的條件。 玉米組織培養(yǎng)的研究現(xiàn)狀 ? 現(xiàn)在已經(jīng)能從多種外植體中誘導(dǎo)出愈傷組織，并再生出植株。 AB aB Ab ab AB AABB AaBB AABb AaBb aB aABB aaBB aABb aaBb Ab AabB AabB AAbb Aabb ab aAbB aabB aAbb aabb 例子： 二倍體供體植株基因型為 AaBb，若要從后代中選擇基因?yàn)?AAbb的純合單株 單倍體方法 ： AAbb出現(xiàn)的概率為 1/4。 （ 3）田間取樣與預(yù)處理 取樣時(shí)間 ：晴天 8:00~10:00， 或 16:00~18:00 取穗標(biāo)準(zhǔn) ：： 穗苞大而不破，劍葉與下一葉的 葉枕距為 5~10 cm為宜 低溫處理 ：一般認(rèn)為 5~8度條件下， 低溫預(yù)處理8~10d較好 此外，還有其它處理方法： 化學(xué)物質(zhì)、射線、離心 等。同一材料用不同的培養(yǎng)基培養(yǎng)， 表現(xiàn)出不同的花培效果。培養(yǎng)基制作方法：先鋪一層瓊脂固體培養(yǎng)基，凝固后，在表面加入少量液體培養(yǎng)基。先進(jìn)行脫分化培養(yǎng)，至小
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