白芨組織培養(yǎng)實(shí)施方案(已修改)
2025-05-05 05:47 本頁面
【正文】 白及組織培養(yǎng)實(shí)施方案一、白及簡介白及為蘭科白及屬多年生草本植物，又名甘根、連及草、地螺絲、羊角七、皸口藥、利知子、刀口藥、魚眼蘭等。分布在中國、日本以及緬甸北部，主產(chǎn)于貴州、四川、湖南、湖北、安徽、河南、浙江、陜西等地。其味苦、甘、澀,性涼,歸肺、胃、肝經(jīng)。以塊莖供藥用，能收斂止血，消腫生??；治肺結(jié)核咳血，支氣管擴(kuò)張咯血、胃潰瘍吐血、尿血、便血等癥。外用治外傷出血、燒燙傷、手足皸裂等癥。塊莖含黏液質(zhì)和淀粉等，可作糊料，在生物醫(yī)藥、保健食品、紡織印染、特種涂料和日用化工等方面有巨大的商業(yè)利用價(jià)值。又因白及為地生蘭的一種，花開艷麗，被作為庭院、居室及園林景觀綠化苗木大量應(yīng)用。白及一般生于海拔110——3200m的山野、山谷較潮濕處或林下半遮陰地帶，喜溫暖、稍陰濕的環(huán)境，耐陰性強(qiáng)，忌強(qiáng)光直射，需排水良好、富含腐殖質(zhì)的砂質(zhì)土壤，稍耐寒，冬季可在地下越冬。白及能產(chǎn)生大量的種子(每個(gè)蒴果10～30萬粒)，但這些種子沒有胚乳，自然萌發(fā)率極低，繁殖困難，但白及胚的薄壁細(xì)胞貯存大量的蛋白質(zhì)、油脂和碳水化合物，可作為種子萌發(fā)的營養(yǎng)成分，因此白及種子在保濕的情況下可以萌發(fā)，是蘭科植物中種子易萌發(fā)的類型。傳統(tǒng)的白及繁殖方法大多以分株為主，即將塊莖分成小塊種植，但繁殖系數(shù)低，大面積發(fā)展對(duì)種源消耗大，不宜推廣且難以滿足市場(chǎng)需求。采用白及組織培養(yǎng)可在短時(shí)間內(nèi)大量獲取種苗，且成本相對(duì)較低，是提高白及產(chǎn)量的強(qiáng)有力措施。目前，國內(nèi)研究資料報(bào)道的白及組織培養(yǎng)方法各異，所采用的外植體各不相同，且培養(yǎng)基及其中所加的植物生長調(diào)節(jié)劑種類和規(guī)格也千差萬別。二、白及組織培養(yǎng)技術(shù)路線參照植物組織組織培養(yǎng)獲得再生植株的方式，可通過4種途徑獲得白及再生植株：一是由愈傷組織形成不定芽再生植株；二是愈傷組織產(chǎn)生胚狀體而再生植株；三是由側(cè)芽或頂芽再生植株；四是由莖尖產(chǎn)生原球莖而再生植株。4種方式各有利弊，傳統(tǒng)認(rèn)為采用側(cè)芽或頂芽發(fā)育途徑獲得的后代性狀較穩(wěn)定，但因?yàn)榘准霸蚯o帶有大量共生菌，組培過程中容易出現(xiàn)污染。結(jié)合盧氏當(dāng)?shù)貙?shí)際，探索采用白及無菌播種的技術(shù)路線，通過不同濃度和培方的培養(yǎng)基實(shí)現(xiàn)白及組織培養(yǎng)的最佳技術(shù)路線，建立白及快繁體系。白及組織培養(yǎng)完整的技術(shù)路線如下：經(jīng)過試驗(yàn)優(yōu)化后的技術(shù)路線為：白及→種子（采集優(yōu)質(zhì)種源蒴果）→表面消毒→無菌播種（MS培養(yǎng)基等）→原球莖（分化誘導(dǎo)）→白及小苗（分株、擴(kuò)繁）→壯苗生根（煉苗）→完整小植株→煉苗2025天→移栽→白及 三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：種子：白及的蒴果中有大量的種子，并且蒴果的消毒較方便，污染率低。另一方面用種子作為外植體操作較容易，并且組培過程中萌發(fā)率高，培養(yǎng)的幼苗生長較為迅速，因此，種子作為外植體應(yīng)用比較廣泛，大部分的組培研究都選用種子。本實(shí)驗(yàn)選取盧氏本地優(yōu)質(zhì)白及（Bletilla striata(Thunb．)Reichb．f．）蒴果，采收時(shí)間為8月下旬至9月中旬，此時(shí)間段胚齡大約為第8周至第22周。器材：高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、電子分析天平（精度為千分之一）、電磁爐、接種消毒器、高效能培養(yǎng)架、醫(yī)用小推車、日光燈、加濕器、紫外燈、晾瓶架、酸度計(jì)（或PH試紙）、試管、容量瓶、膠頭滴管、試劑瓶、燒杯、試管架、量筒、玻璃漏斗、移液管、三角瓶、廣口培養(yǎng)瓶、稱量紙
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