基礎(chǔ)生物學(xué)作業(yè)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 用的方法有原位雜效，Southern雜交和打點(diǎn)雜交。流式細(xì)胞儀是一種較為客觀準(zhǔn)確的儀器，可定量分析外源基因的表達(dá)狀況。ex vivo途徑該途徑就是指取出患者體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，將治療性基因通過病毒載體或非病毒載體轉(zhuǎn)染后，篩選成功轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞，體外擴(kuò)大培養(yǎng)，再移植到患者的特定部位，通常是重新移植到細(xì)胞來(lái)源的器官和組織中。（一）癌癥的定義癌癥（cancer），醫(yī)學(xué)術(shù)語(yǔ)亦稱惡性腫瘤（malignant neoplasm），中醫(yī)學(xué)中稱巖，由各種致癌物質(zhì)、致癌因素的作用下導(dǎo)致身體正常細(xì)胞發(fā)生癌變的結(jié)果。癌癥基因調(diào)控旨在了解哪些基因發(fā)生變異后，采取各種手段，包括藥物來(lái)“糾正”變異基因，達(dá)到治療目的。（3）應(yīng)用腫瘤細(xì)胞特異蛋白“管家基因”的基因表面調(diào)控元件，在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控目的基因在靶細(xì)胞中特異表達(dá)?；蜣D(zhuǎn)移的效率和特異性是相互矛盾又相互統(tǒng)一的，載體的基因轉(zhuǎn)移效率很高時(shí)，往往特異性就較差。實(shí)現(xiàn)治療基因表達(dá)可調(diào)控性的最理想方式是模擬人體內(nèi)基因本身的調(diào)控形式，這需要克隆目的基因包含內(nèi)含子在內(nèi)的全序列以及上下游的調(diào)控區(qū)，因此難度較大，是基因治療的遠(yuǎn)期目標(biāo)。二、基因治療的發(fā)展前景基因治療研究目前還處于起步階段，因此現(xiàn)在對(duì)它期望過高是不現(xiàn)實(shí)的。 with cytosine deaminase gene: Significant antitumor effects when only a small percentage of tumor cells express cytosine deaminase.為人類帶來(lái)了福音，使癌癥、艾滋病患者看到了生的希望。未來(lái)人類基因組學(xué)和基因定點(diǎn)重組技術(shù)的發(fā)展為合理解決這一危機(jī)提供了可能。治療基因在導(dǎo)入靶細(xì)胞后，如果不能得到有效調(diào)控，將帶來(lái)嚴(yán)重后果。這是迄今唯一可誘導(dǎo)的調(diào)控系統(tǒng)，值得重視。 治療的“靶細(xì)胞”或“靶組織” 帶有目的基因的載體如何到達(dá)“靶細(xì)胞”是腫瘤基因治療的關(guān)鍵。癌基因誘發(fā)細(xì)胞增生，而癌抑制基因恰恰相反，但是當(dāng)癌抑制基因受到某些因素影響發(fā)生突變，它就失去了這一抑制作用，其結(jié)果必然是癌基因失去控制，細(xì)胞增殖加快。最早進(jìn)行基因治療研究的疾病是單基因遺傳病，這同時(shí)也是基因治療應(yīng)用最為成功的疾病之一。通?？梢允褂貌《据d體攜帶和脂質(zhì)體包裹等方式將治療性基因?qū)肴梭w中。PCR方法目前也已用于轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的鑒定，且該法相對(duì)簡(jiǎn)單易行。（2）基因缺陷型受體細(xì)胞的選擇性：以基因缺陷型細(xì)胞作為靶細(xì)胞，將正?；?qū)牖蛉毕菪桶屑?xì)胞后，使用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。在實(shí)際上應(yīng)用中應(yīng)具體根據(jù)目的條件選擇。因此病毒載體是良好的基因轉(zhuǎn)運(yùn)載體。腫瘤病人多有免疫缺陷，可選用免疫因子基因轉(zhuǎn)入人體，腫瘤細(xì)胞內(nèi)往往存在多種基因異常形式，可采用反義技術(shù)封閉細(xì)胞內(nèi)活化的癌基因或向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)入野生型抑癌基因，抑制腫瘤生簪，所針對(duì)的癌基因或抑癌基因應(yīng)下該腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有明確的相關(guān)性?；蛑委煹幕境绦蚧蛑委煹膶?shí)施主要包括以下步驟：一、選擇用于治療疾病的目的基因；二、基因載體的選擇,目前應(yīng)用于基因治療的載體主要有病毒載體和非病毒載體兩種；三、靶細(xì)胞的選擇,，易于在體外人工培養(yǎng)，而且細(xì)胞的壽命足夠長(zhǎng)；四、基因轉(zhuǎn)移,在基因治療中迄今所應(yīng)用的基因轉(zhuǎn)移方法可分為兩大類：病毒方法和非病毒方法，非病毒載體主要有直接注射、磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體法和生物化學(xué)法等；五、外源基因的篩檢,可以利用基因表達(dá)產(chǎn)物的篩檢方法,也可以利用分子生物學(xué)方法篩檢外源基因；六、將目的基因?qū)塍w內(nèi),直接轉(zhuǎn)導(dǎo)入人體的靶器官的靶細(xì)胞中,取出患者體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，將治療性基因通過病毒載體或非病毒載體轉(zhuǎn)染后，再移植到患者的特定部位和導(dǎo)入體內(nèi)。 (七)耐藥基因治療 耐藥基因治療是在腫瘤治療時(shí)，為提高機(jī)體耐受化療藥物的能力，把產(chǎn)生抗藥物毒性的基因?qū)肴梭w細(xì)胞，以使機(jī)體耐受更大劑量的化療。以目前的觀點(diǎn)看，骨髓細(xì)胞是唯一滿足以上標(biāo)準(zhǔn)的靶細(xì)胞，而骨髓的抽取，體外培養(yǎng)、再植入等所涉及的技術(shù)都已成熟；另一方面，骨髓細(xì)胞還構(gòu)成了許多組織細(xì)胞(如單核巨噬細(xì)胞)的前體?；蛑委熍c常規(guī)治療方法不同：一般意義上疾病的治療針對(duì)的是因基因異常而導(dǎo)致的各種癥狀，而基因治療針對(duì)的是疾病的根源異常的基因本身。從廣義說(shuō)，基因治療還可包括從DNA水平采取的治療某些疾病的措施和新技術(shù)。摘要：隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展與成熟，基因遺傳學(xué)領(lǐng)域研究的深入，基因治療這一新的醫(yī)學(xué)手段走進(jìn)了我們的生活。2．遺傳病的基因治療的定義遺傳病的基因治療(gene therapy)是指應(yīng)用基因工程技術(shù)將正?；蛞牖颊呒?xì)
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