elisa檢測技術(shù)ppt課件-文庫吧在線文庫
【正文】 標準曲線建立 樣品 10μl+990μlPBS Bradford法測定樣品中可溶性蛋白濃度 100μl混合液 +1000μlG250 紫外分光光度計、 595nm依標準曲線測定 測定值 *100＝樣品總蛋白濃度 用牛血清白蛋白 （ BSA） 建立 。 保 溫 1）在 ELISA中抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育。 加樣時應(yīng)將所加物加在 ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。 最佳取樣時間為水稻分蘗期，取樣時不同植株應(yīng)取自同一部位的樣品；該樣品依所攜外源基因不同其存放時間不同；如 BT水稻樣品可存放于 20℃ 三個月， 80℃ 半年以上。 ELISA 技術(shù)的三個基本原理 ? 抗原或抗體能物理性地吸附于固相表面，并且保持其免疫活性； ? 抗原或抗體能與酶通過共價鍵形成酶結(jié)合物，同時保持各自的免疫活性和酶活性； ? 酶結(jié)合物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，能通過加入底物的顏色反應(yīng)來確定免疫反應(yīng)的發(fā)生，顏色反應(yīng)的深淺與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比。 ? 抑制性測定 ? 間接法測抗原 此方法操作簡單、迅捷但重復(fù)性一般較差；通常用于抗體效
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