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elisa檢測技術(shù)ppt課件(參考版)

2024-10-19 23:35本頁面
  

【正文】 Thank you! Any questions? 。 ②將所測定樣品的 OD值代入回歸方程計算出相應(yīng)的 Bt的量。 分別配制 1 50、 80、 100、 140( μ g?ml1) 的標準蛋白溶液 ( 用 PBS配制 ) 系列 。 若要終止反應(yīng),以防反應(yīng)過度,常用的堿性磷酸酶反應(yīng)終止液為 1M NaOH,每孔100ul。定性測定的顯色時間一般不需要嚴格控制及時判斷。 顯色和比色 顯色是 ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。 2)溫育常采用的溫度有 43℃ 、 37℃ 、室溫和 4℃ (冰箱溫度)等。 聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的而在洗滌時可清除在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì) 洗滌時可清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì) 洗滌方式(浸泡式 ) a. 甩干孔內(nèi)反應(yīng)液; (將洗滌液注滿板孔后,即甩去); ,即將洗滌液注滿板孔,放置 3分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短; d. 甩去液體后在吸水紙上拍干; c和 d,洗滌 3次。包被好的 ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,在低溫可保存數(shù)月。 2)目的:抗原或抗體包被時所用的濃度
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