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elisa檢測(cè)技術(shù)ppt課件-文庫(kù)吧資料

2024-10-22 23:35本頁(yè)面
  

【正文】 較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。 加標(biāo)本一般定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。 加樣 在 ELISA中一般有 3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。 在實(shí)驗(yàn)前,必須經(jīng)紫外射線照射 1~2小時(shí)后,其對(duì)免疫球蛋白的吸附性能增加 已包被抗原或抗體的固相載體在低溫( 28℃ )干燥的條件下一般可保存 6個(gè)月 。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能。在提取樣品的過(guò)程中,裝入樣品研磨液的 Bf管應(yīng)置于冰浴中;上清應(yīng)置于 4℃ ,最多只能存放 4天 試劑的準(zhǔn)備 ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的; 自配的緩沖液應(yīng)用 pH計(jì)測(cè)量較正; 從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用; 最好現(xiàn)配現(xiàn)用。 2)取約 ,加 5001000μlPBS緩沖液,用研缽磨碎,將研磨液轉(zhuǎn)入 Eppendorf管中,10000rpm, 4℃ 離心 10min,取上清備用。 ? 抑制性測(cè)定 ? 間接法測(cè)抗原 此方法操作簡(jiǎn)單、迅捷但重復(fù)性一般較差;通常用于抗體效價(jià)的測(cè)定和某些疾病的
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