【正文】 酵母菌： ~ 霉 菌： ~ 在微生物的生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中 ， 由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累 ， 培養(yǎng)基的初始 pH值會(huì)發(fā)生改變 ， 為了維持培養(yǎng)基 pH值的相對(duì)恒定 ， 通常采用下列兩種方式： 內(nèi)源調(diào)節(jié)： 在培養(yǎng)基里加一些緩沖劑或不溶性的碳酸鹽；調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的碳氮比 。 表 47 幾類微生物生長(zhǎng)最適 ?w 微生物 ?w 一般細(xì)菌 酵母菌 霉菌 噬鹽細(xì)菌 噬鹽真菌 嗜高滲酵母 ◆為了表示微生物生長(zhǎng)與水的關(guān)系，有時(shí)也常用 相對(duì)濕度（ RH) 的概念（ ?w 100= RH ）；通常也用測(cè)定蒸氣相中相對(duì)濕度的方法得知溶液或物質(zhì)的水活度。 ②發(fā)酵培養(yǎng)基 (fermentation medium)——用于生產(chǎn)預(yù)定發(fā)酵產(chǎn)物，一般以碳為主要元素，碳源含量往往高于種子培養(yǎng)基。 FeSO4 ； 水 1000ml。可據(jù)培養(yǎng)后的濁度判斷微生物的生長(zhǎng)程度 . ★ 4 按制備后培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來(lái)分 ②固體培養(yǎng)基 (solid medium)： 天然固體營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)制成的培養(yǎng)基，或液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑（瓊脂 ～ 2％ )而呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。 encouraging desired microbes. Differential Differentiation of colonies of desired microbes from others. Enrichment Similar to selective media but designed to increase numbers of desired microbes to detectable levels. Table 4a. Minimal medium for the growth of Bacillus megaterium. An example of a chemicallydefined medium for growth of a heterotrophic bacterium. Component Amount Function of ponent sucrose g C and energy source K2HPO4 g pH buffer。 ，如何帶著某種目的設(shè)計(jì)一種選擇培養(yǎng)基，例如：如何從土壤中分離一株纖維素高產(chǎn)菌株或一株高產(chǎn)多糖的酵母菌株，寫(xiě)出你的具體方法步驟。 ，用圖表說(shuō)明這幾種運(yùn)送方式的異同。利用這種培養(yǎng)基可用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái) . ★ 5 按特殊用途劃分 ③鑒別性培養(yǎng)基 (differential medium)： 用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基，在普通培養(yǎng)基中加入能與某種代謝產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)的指示劑或化學(xué)藥品，從而產(chǎn)生某種明顯的特征性變化，以區(qū)別不同的微生物， 例： 伊紅美蘭乳糖培養(yǎng)基（ Eosin Methylene Blue） ④加富培養(yǎng)基 (enriched medium)： 在普通培養(yǎng)基中加入某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物，如血、血清、動(dòng)、植物組織液或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（或生長(zhǎng)因子）的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。 ★ 3 按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解程度來(lái)分 ②合成（組合）培養(yǎng)基 (synthetic medium)：也稱作 chemically defined medium. 由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基，該類培養(yǎng)基的 組成成分精確、清楚 ，重復(fù)性強(qiáng)，但微生物生長(zhǎng)較慢，且價(jià)格昂貴，故一般適于在實(shí)驗(yàn)室范圍內(nèi)他有關(guān)研生物營(yíng)養(yǎng)需要、代謝、分類鑒定、生物測(cè)定以及菌種選育、遺傳分析等方面的研究工作。 KCl 。 調(diào)查所培養(yǎng)菌的生態(tài)條件，查看“嗜好”，對(duì)“癥”下料 ———初級(jí)天然培養(yǎng)基 . 查閱、分析文獻(xiàn)，調(diào)查前人的工作資料，借鑒人家的經(jīng)驗(yàn)，以便從中得到啟發(fā)設(shè)計(jì)有自己特色的培養(yǎng)基配方 . 借助優(yōu)選法或 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 法等方法 . 二、設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的方法 實(shí)驗(yàn)比 較 ： 不同培養(yǎng)基配方的選擇比較 單種成分來(lái)源和數(shù)量的比較 幾種成分濃度比例調(diào)配的比較 小型試驗(yàn)放大到大型生產(chǎn)條件的比較 pH和溫度試驗(yàn) ◆附 1： 配置培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題及解決方法： 沉淀 膠體強(qiáng)度的破壞 褐色物質(zhì)的形成 pH發(fā)生變化 高壓蒸氣滅菌 一般培養(yǎng)基 : Kg/cm2, ℃ , 1530 min 含糖培養(yǎng)基 : Kg/cm2, ℃ , 1530 min 過(guò)濾滅菌，分別滅菌，間歇滅菌的應(yīng)用 附 2：培養(yǎng)基的滅菌 附圖：過(guò)濾滅菌 附 3：器皿的滅菌及無(wú)菌室的消毒 器皿的滅菌： 干熱空氣： 160℃ ， 2 小時(shí) 無(wú)菌室的消毒： 紫外光 化學(xué)藥物熏蒸（苯酚；高錳酸鉀 +甲醛） 三、培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用 ★ 1 根據(jù)所培養(yǎng)微生物的微生物類群來(lái)分 ①細(xì)菌培養(yǎng)基 ②放線菌培養(yǎng)基 ③霉菌培養(yǎng)基 ★ 2 根據(jù)培養(yǎng)目的來(lái)分 ①種子培養(yǎng)基 (seed culture medium)———是為保證發(fā)酵生產(chǎn)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)種子而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，特點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)較豐富，氮源比例較高。 ◆定義：水活度為在一定的溫度條件下，溶液的蒸汽壓（材料上部 蒸氣相中 水濃度）與純水的蒸汽壓（即純水上部蒸氣相中水濃度）之比， 即： ?w=?/ ?o ? 表示溶液的蒸汽壓 ?o表示純水的蒸汽壓 ◆在 ?w為 ~，但對(duì)某種微生物而言，它對(duì)?w的要求是一定的，微生物對(duì)水的需求有相當(dāng)?shù)淖兓潭取? （二）營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng) ● 濃度過(guò)高 —— 微生物的生長(zhǎng)起抑制作用， 濃度過(guò)小 —— 不能滿足微生物生長(zhǎng)的需要。 第五節(jié) 培養(yǎng)基 (medium) 定義： 應(yīng)科研或生產(chǎn)的需要，由人工配制的、適合于不同微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)（混合養(yǎng)料）。 基因轉(zhuǎn)位主要存在于厭氧和兼性厭氧型細(xì)菌中，也主要是用于單（或雙）糖與糖的衍生物，以及核苷與脂肪散的運(yùn)輸 。 (facilitated diffusion/transport) (facilitated diffusion) 特點(diǎn)： 在促進(jìn)擴(kuò)散過(guò)程中 ? 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)本身在 分子結(jié)構(gòu)上也不會(huì)發(fā)生變化 ? 不消耗代謝能量 ，故不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸 ? 運(yùn)輸?shù)乃俾视砂麅?nèi)外該物質(zhì)的 濃度差 決定 ?需要細(xì)胞膜上的 載體蛋白（透過(guò)酶） 參與物質(zhì) 運(yùn)輸 ?被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)與載體蛋白有高度的 特異性 ?養(yǎng)料濃度過(guò)高時(shí) , 與載體蛋白出現(xiàn) 飽和效應(yīng) 促進(jìn)擴(kuò)散的運(yùn)輸方式多見(jiàn)于真核微生物中，例如通常在厭氧生活的酵母菌中，某些物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的分泌是通過(guò)這種方式完成的。 三、化能自養(yǎng)型微生物 通過(guò)氧化無(wú)機(jī)物取得能量，并以 CO2為唯一或主要碳源 1. 硝化細(xì)菌 : 亞硝化細(xì)菌 2NH4+ +3O2→ 2NO2 +2H2O + 4H++132Kcal 硝化細(xì)菌 NO2 +1/2O2 → NO3 + Kcal 2. 硫化細(xì)菌 : 通過(guò)氧化還原態(tài)的無(wú)機(jī) 硫化物 （ H2S、 S、 S2O32 、 SO32） 獲 得能量（硫桿菌屬，硫微螺菌屬） H2S + 1/2 O2 →S +H 2O + Kcal S + 1 1/2 O2+H2O → H 2SO4+ Kcal 3. 鐵細(xì)菌： 氧化 Fe2+為 Fe3+獲取能量并同化 CO2 2Fe2++1/2O2+2H+ → 2Fe3++H2O+ Kcal 4. 氫細(xì)菌： 具有氫化酶，從氫的氧化獲取能 量，同化 CO2 H2+ 1/2 O2 → H2O + Kcal 硝化細(xì)菌 鐵細(xì)菌 多數(shù)微生物屬于化能異養(yǎng)型 ， 其生長(zhǎng)所需要 能量和碳源通常來(lái)自同一種有機(jī)物 。 （ 微生物生長(zhǎng)所需濃度在 106－ 108mol/L） 一般微生物生長(zhǎng)所需要的無(wú)機(jī)鹽有：硫酸鹽 、 磷酸鹽 、氯化物以及含有鈉 、 鉀 、 鎂 、 鐵等金屬元素的化合物 。各種維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶（堿基）的生理功能見(jiàn)教材。 但有些微生物沒(méi)有將無(wú)機(jī)氮合成有機(jī)氮的能力 ， 它們不能把尿素 、 銨鹽等這些無(wú)機(jī)氮源自行合成他們生長(zhǎng)所需的氨基酸 ， 而需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作為氮源才能生長(zhǎng) ， 這類微生物叫做 氨基酸異養(yǎng)型微生物 ， 也叫營(yíng)養(yǎng)缺陷型 。O 硝酸鹽等 KNO3等 N N2 空氣 : .XN ： 不需要以氨基酸作氮源，能把尿素、銨鹽、硝酸鹽甚至氮?dú)獾群?jiǎn)單氮源自行合成所需要的一切氨基酸的微生物。CH 烴類 天然氣、石油及其不同餾份、石蠟油等 無(wú)機(jī)碳 C(?) — — CO 第二節(jié) 微生物的營(yíng)養(yǎng)要素 生物類型 營(yíng)養(yǎng)要素 動(dòng)物 （異養(yǎng)） 微生物 綠色植物 （自養(yǎng)） 異養(yǎng) 自