細胞培養(yǎng)的常見問題及解決方案(存儲版)
【正文】 微絨毛相似，但微絨毛電子密度比支原體小，且中央無顆粒群或中央束。具體方法如下：首先將細胞接種蓋玻片上，在細胞未長滿前取出玻片，用不合酚紅的 Hanks液漂洗一下，用 l： 3醋酸甲酵固定 10Min，然后用生理鹽水漂洗．置于用生理鹽水配濃度為 50pg／ ml的 Hoechst 33258中染色10min。 。 為確定有無支原體污染可做如下檢測： ①相差顯微境檢測：將細胞按種于事先放置于培養(yǎng)瓶內(nèi)的蓋玻片上，24h后取出，用相差油鏡觀察．支原體呈暗色微小顆粒位于細胞表面和細胞之間。電鏡下觀察支原體膜為三層結(jié)構(gòu)．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。此過程一般不需要離心，培養(yǎng)基中的血清會中止消化液的活性。 ? 剛拿到細胞株怎么辦？ 問題四：細胞消化時怎樣掌握火候 ? 細胞生長匯合密度為 80%100%時就要消化傳代 ? 消化液濃度： %T+%EDTA %T+%EDTA ? 消化液的 PH: 問題四：細胞消化時怎樣掌握火候 ? 細胞在消化前先加消化液，洗一下倒掉，再加消化液消化 515分鐘，細胞沒有消化成園形時不要振動，待細胞完全變圓后，加新鮮培養(yǎng)基，按 1:3或按要求分瓶。支原體形態(tài)多變，在光境下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。但個別嚴重者，可致細胞增殖緩慢．甚至從培養(yǎng)器皿
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