chapter-3-外植體選擇和滅菌(存儲版)
【正文】 的羥基產(chǎn)生抗氧化作用，使生色物質(zhì)的含量下降或 PA與 PPO分子中的 Cu2 +結(jié)合，從而降低了其活力。 （ 6）離子水平 植物種類不同，離子形態(tài)比例量要求不同。燈源強度： 40瓦的日光燈三根合在一起，離苗 45厘米高處照射，光強為 3千～ ， 100瓦的高壓汞燈離苗 80厘米處，光強為 ～ 1千勒克斯 ? 升汞處理方法： 升汞＋ Na2S－－－絮狀沉淀（至絮狀沉淀不再產(chǎn)生為止）－－＋ FeSO4（中和過多的 Na2S ） 接種外植體的生長過程： A 細胞分裂的啟動； B 細胞增殖； C 組織和器官的形成。 AgNO3 、 CoCl、 AVG 其他有機化合物： 腺嘌呤衍生物具有促進器官分化作用。 乙烯及其生物合成抑制劑： 具有促進和抑制兩方面的影響，但抑制作用多于促進作用。 （ 7）培養(yǎng)基中加入間苯三酚、根皮苷或多效唑、矮壯素。 ⑷光照時間 一般要求 1012h，大于 15h玻璃苗增加。 在培養(yǎng)基中加入偏二亞硫酸鈉、 L半胱氨酸、抗壞血酸、檸檬酸、二硫蘇糖醇等抗氧化劑都可以 與氧化產(chǎn)物醌 發(fā)生作用，使其重新還原為酚。培養(yǎng)基中添加 1mg/L BA+1mg/L 2,4D 時，愈傷組織淺黃疏松，增殖也快。 ⑴ 基因型 某些植物酚類物質(zhì)含量較多。 氧氣 離體培養(yǎng)的試管苗是需要氧氣的 ， 在固體培養(yǎng)或液體靜置培養(yǎng)時 ， 如果組織完全浸入培養(yǎng)基中 ， 與氧氣隔絕 ， 就會停止生長 。 溫度 離體培養(yǎng)中對溫度的控制比光照更為重要 ，大所數(shù)植物最適溫度在 2332℃ 之間 。 第三節(jié) 外植體的培養(yǎng) 接種只是完成了離體培養(yǎng)的第一步 ， 植物離體培養(yǎng)和栽培植物一樣 ， 生長過程中也受到各種環(huán)境因素的影響 。 ? 表面活性劑，抽氣、攪拌或超聲振動，使消毒劑與材料充分接觸。 ? （ 3）嚴格按照操作程序。 病原菌：細菌及真菌兩大類。 進入接種室前雙手用洗滌劑清洗干凈， 操作前再用 70%酒精或消毒劑擦洗雙手 。 外植體取材方法 確定大小 取大小適中的莖段、芽體進行清洗、滅菌，大了容易污染，小了不易成活。 ⑶控制濕度 給供體植株澆水時應(yīng)從根部給水，避免從上部澆水，以免上部形成易于病原侵染的濕度環(huán)境；盡可能降低溫室濕度；取材前盡可能保持植株干爽。 取自這些植物的外植體 ， 在培養(yǎng)過程中會有微生物滋生 ， 從而影響培養(yǎng)效果 。 F、環(huán)境條件控制促進外植體的生長。 外植體的選擇和滅菌 一 外植體的選擇 (一 ) 外植體的基因型 ? 不同種類的植物 ? 同一植物的不同器官 對誘導(dǎo)條件反應(yīng)是不一致的， 有的部位誘導(dǎo)分化的成功率高，有的部位卻很難脫分化，或者再分化頻率很低 a. 單子葉植物不易誘導(dǎo)器官發(fā)生。 外植體種類及基因型 (二 )外植體的部位 常用的外植體種類： ① 莖尖 （園藝植物組織培養(yǎng)中應(yīng)用最多，繁殖率高，不易發(fā)生遺傳變異，但取材有限） ② 莖段 （采用嫩莖的切段促進腋芽萌發(fā)，取材容易） ③ 葉 （幼嫩葉片組織通過愈傷組織或不定芽分化產(chǎn)生植株，取材容易，操作方便，但易發(fā)生變異）； ④ 花球和花蕾 ⑤ 種子、根、塊根、塊莖、花瓣、胚等。 ? 在生長末期或已進入休眠期時取樣，則外植體可能對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)，較難成活。 某些多年生植物或特殊材料，必須取自自然生長的植物，就需要盡可能避免使用那些生長過于 潮濕和不潔凈 環(huán)境中的植物。 (五 )外植體大小 外植體大?。? 外植體越小成苗能力越弱，較大的外植體增殖較快。 ? 常用滅菌方法 : 干熱滅菌 : 150度， 40’ 1２ 0度， 120 ’ 濕熱滅菌 :高壓滅菌鍋，壓力達 ， 壓力達 kg /cm2,121度 ,1630’ 射線滅菌 :紫外燈 過濾滅菌 :細
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