基因重組-生物合成概念(存儲(chǔ)版)
【正文】 程之后，我們來(lái)看pBR322在基因工程中的應(yīng)用。 利用pBR322作為載體重組人體的抑生長(zhǎng)激素也是一個(gè)經(jīng)常提到的應(yīng)用例子。用Ampr轉(zhuǎn)化子菌落與32P放射性標(biāo)記的玉米psbA DNA 探針作菌落雜交，可以分離出其中的陽(yáng)性克隆體?！ 〈撕笪覀儽謨陕罚阂宦钒裵BR313的PstI位點(diǎn)除去，使之成為ampstetr表型的pBR318質(zhì)粒； 5；另一路把pBR313的EcoRII的位點(diǎn)切除，使之成為amprtets表形的pBR320質(zhì)粒。標(biāo)記基因往往可以賦予宿主細(xì)胞一種新的表型，這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。這種質(zhì)粒常含有抗生素抗性基因，例如，卡那霉素抗性基因。如果將DNA片段插入EcoRI切點(diǎn)，不會(huì)影響兩個(gè)抗生素基因的表達(dá)。如較早的質(zhì)粒pBR322即屬于松弛型質(zhì)粒，要經(jīng)過(guò)氯霉素處理才能達(dá)到更高拷貝數(shù)。質(zhì)粒上常有抗生素的抗性基因，例如，四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。生物合成可分為由主要原料進(jìn)行的全合成（從頭合成，例如光合作用）和由部分分解產(chǎn)物進(jìn)行可逆性的廢物利用途徑（例如：嘌呤核苷酸的轉(zhuǎn)換。生物合成 生物合成 biosynthesis 生物體內(nèi)進(jìn)行的同化反應(yīng)的總稱。例如,在轉(zhuǎn)座過(guò)程中,轉(zhuǎn)座因子從染色體的一個(gè)區(qū)段轉(zhuǎn)移到另一個(gè)區(qū)段,或從一條染色體轉(zhuǎn)移到另一條染色體。同源重組的發(fā)生依賴于大范圍的DNA同源序列的聯(lián)會(huì),在重組過(guò)程中,兩條染色體或DNA分子相互交換對(duì)等的部分?；蛑亟M是雜交育種的生物學(xué)基礎(chǔ)，對(duì)生物圈的繁榮昌盛起重要作用，也是基因工程中的關(guān)鍵性內(nèi)容。即基因重組 由于基因的獨(dú)立分配或連鎖基因之間的交換而在后代中出現(xiàn)親代所沒(méi)有的基因組合。包括同源重組、位點(diǎn)特異重組、轉(zhuǎn)座作用和異常重組四大類。在進(jìn)化、繁殖、病毒感染、基因表達(dá)以致癌基因激活等過(guò)程中,基因重組都起重要作用。通過(guò)噬菌體媒介，將供體細(xì)胞DNA片段帶進(jìn)受體細(xì)胞中，使后者獲得前者的部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。此后，運(yùn)用基因重組技術(shù)生產(chǎn)醫(yī)藥上重要的藥物以及在農(nóng)牧業(yè)育種等領(lǐng)域中取得了很多成果，預(yù)計(jì)下世紀(jì)在生產(chǎn)治療心血管病、鎮(zhèn)痛和清除血栓等藥物方面基因重組技術(shù)將發(fā)揮更大的作用。位點(diǎn)特異性重組發(fā)生在兩個(gè)DNA分子的特異位點(diǎn)上?；蛑亟M是遺傳的基本現(xiàn)象，病毒、原核生物和真核生物都存在基因重組現(xiàn)象。（2）在穩(wěn)定狀態(tài)時(shí)，合成用于補(bǔ)充消耗掉的成分的物質(zhì)。質(zhì)粒具有可自主復(fù)制、傳給子代、也可丟失及在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移等特性，與細(xì)菌的遺傳變異有關(guān)。細(xì)菌質(zhì)粒的相對(duì)分子質(zhì)量一般較小，%～3%。質(zhì)粒的復(fù)制有時(shí)和它們的宿主細(xì)胞有關(guān)，某些質(zhì)粒在大腸桿菌內(nèi)的復(fù)制屬嚴(yán)緊型，而在變形桿菌內(nèi)則屬松弛型。沒(méi)有DNA插入片段的pBR322會(huì)使宿主細(xì)菌既抗氨芐青霉素又抗四環(huán)素，而沒(méi)有pBR322質(zhì)粒的細(xì)菌將對(duì)氨芐青霉素和四環(huán)素都敏感。其中7種限制酶
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1