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基因重組-生物合成概念(存儲版)

2024-09-02 15:14上一頁面

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【正文】 程之后,我們來看pBR322在基因工程中的應用?! ±胮BR322作為載體重組人體的抑生長激素也是一個經常提到的應用例子。用Ampr轉化子菌落與32P放射性標記的玉米psbA DNA 探針作菌落雜交,可以分離出其中的陽性克隆體?! 〈撕笪覀儽謨陕罚阂宦钒裵BR313的PstI位點除去,使之成為ampstetr表型的pBR318質粒;  5;另一路把pBR313的EcoRII的位點切除,使之成為amprtets表形的pBR320質粒。標記基因往往可以賦予宿主細胞一種新的表型,這種轉化細胞可明顯地區(qū)別于非轉化細胞。這種質粒常含有抗生素抗性基因,例如,卡那霉素抗性基因。如果將DNA片段插入EcoRI切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。如較早的質粒pBR322即屬于松弛型質粒,要經過氯霉素處理才能達到更高拷貝數(shù)。質粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。生物合成可分為由主要原料進行的全合成(從頭合成,例如光合作用)和由部分分解產物進行可逆性的廢物利用途徑(例如:嘌呤核苷酸的轉換。生物合成  生物合成 biosynthesis 生物體內進行的同化反應的總稱。例如,在轉座過程中,轉座因子從染色體的一個區(qū)段轉移到另一個區(qū)段,或從一條染色體轉移到另一條染色體。同源重組的發(fā)生依賴于大范圍的DNA同源序列的聯(lián)會,在重組過程中,兩條染色體或DNA分子相互交換對等的部分?;蛑亟M是雜交育種的生物學基礎,對生物圈的繁榮昌盛起重要作用,也是基因工程中的關鍵性內容。即基因重組  由于基因的獨立分配或連鎖基因之間的交換而在后代中出現(xiàn)親代所沒有的基因組合。包括同源重組、位點特異重組、轉座作用和異常重組四大類。在進化、繁殖、病毒感染、基因表達以致癌基因激活等過程中,基因重組都起重要作用。通過噬菌體媒介,將供體細胞DNA片段帶進受體細胞中,使后者獲得前者的部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉導。此后,運用基因重組技術生產醫(yī)藥上重要的藥物以及在農牧業(yè)育種等領域中取得了很多成果,預計下世紀在生產治療心血管病、鎮(zhèn)痛和清除血栓等藥物方面基因重組技術將發(fā)揮更大的作用。位點特異性重組發(fā)生在兩個DNA分子的特異位點上。基因重組是遺傳的基本現(xiàn)象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重組現(xiàn)象。(2)在穩(wěn)定狀態(tài)時,合成用于補充消耗掉的成分的物質。質粒具有可自主復制、傳給子代、也可丟失及在細菌之間轉移等特性,與細菌的遺傳變異有關。細菌質粒的相對分子質量一般較小,%~3%。質粒的復制有時和它們的宿主細胞有關,某些質粒在大腸桿菌內的復制屬嚴緊型,而在變形桿菌內則屬松弛型。沒有DNA插入片段的pBR322會使宿主細菌既抗氨芐青霉素又抗四環(huán)素,而沒有pBR322質粒的細菌將對氨芐青霉素和四環(huán)素都敏感。其中7種限制酶
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