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正文內(nèi)容

chapter-3-微生物的生長(zhǎng)(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 并推斷 CaM在即將出現(xiàn)芽體的部位的聚集是出現(xiàn)在微絲的聚集之后 , 且各自的存在有利于對(duì)方極性分布的建立與保持 。 G2 期 。一旦有絲分裂完成,一個(gè)核和其它的細(xì)胞器移到芽中,細(xì)胞質(zhì)也開(kāi)始分裂,并在母細(xì)胞和芽之間形成橫隔。最近的證據(jù)表明,隔膜蛋白還參與了許多其它的細(xì)胞過(guò)程,包括細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生、出芽位置的選擇、幾丁質(zhì)的沉積、細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)、細(xì)胞分隔等。 SPB復(fù)制完成后,并排連接的 SPB就分離, 新合成的 SPB移動(dòng)到核膜的對(duì)面。schmoo39。 單倍體 營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng) 營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng) 單倍體 二倍體 營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng) 一旦饑餓 , 就開(kāi)始減數(shù)分裂, 形成孢子 S. cerevisiae 的生活周期 細(xì)胞的交配型和交配 相反交配型的細(xì)胞 (a and α ) 在感受到交配信號(hào)后在細(xì)胞周期的 START時(shí) 就處于同步,而一旦細(xì)胞通過(guò)了START,它們就不能交配,而要到下一細(xì)胞周期才能交配。在單倍體細(xì)胞中,SPB的直徑在 G1期為 80 nm,而在有絲分裂期為 110 nm。隔膜蛋白組裝成微絲,位于細(xì)胞膜下。 紡錘體 線粒體 液泡 細(xì)胞核 芽痕 酵母細(xì)胞表面芽痕的數(shù)量可用來(lái)確定細(xì)胞的年齡。 酵母菌在環(huán)境不適的情況下 , 也能進(jìn)行有性繁殖 。 CaM對(duì)鈣離子的親和力與細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的濃度密切相關(guān)。 Ca2+可能直接作用于微絲,也可能通過(guò)作用于依賴 Ca2+的肌球蛋白 (myosin),調(diào)節(jié)肌球蛋白的活性從而達(dá)到對(duì)微絲功能的調(diào)節(jié)。 菌絲內(nèi)部胞質(zhì)的濃度與外界相比較高 , 在滲透作用下 , 外界水分具有進(jìn)入胞內(nèi)的趨勢(shì) ,水分內(nèi)流導(dǎo)致的細(xì)胞壁膨脹被相對(duì)堅(jiān)硬的細(xì)胞壁阻擋后 , 菌絲內(nèi)部便產(chǎn)生 正向的膨壓 。在微絲的功能研究方面 Torralba等用 Cytochalasin A證實(shí)了在構(gòu)巢曲霉中,微絲骨架對(duì)于菌絲的正常極性生長(zhǎng),菌絲頂端形狀的維持以及酶的極性分泌都是至關(guān)重要的。由于分泌囊泡聚集于頂體部位,并在這里被輸送到細(xì)胞表面,因而頂體被認(rèn)為是菌絲頂端生長(zhǎng)過(guò)程中的 囊泡供應(yīng)中心 (VSC)。當(dāng)菌絲進(jìn)行頂端生長(zhǎng)時(shí),菌絲頂端細(xì)胞壁必須維持一定的 可塑性 ,以便新的細(xì)胞壁物質(zhì)加入,使壁不斷向前延伸,但同時(shí)又必須具有一定的 剛性 ,以抵抗胞內(nèi)膨壓,防止原生質(zhì)從菌絲頂端噴出。 一般是在一短期內(nèi)失重很快 , 以后不再變化 。 三、真菌菌落徑向擴(kuò)展曲線 分為四個(gè)時(shí)期 : ( 1) 延滯期:即從接種到菌絲開(kāi)始出現(xiàn)生長(zhǎng)這段時(shí)間 ( 2) 指數(shù)期:菌落以指數(shù)速率作徑向生長(zhǎng); ( 3) 減速期:是指數(shù)期末和線性期初之間的一段時(shí)間 ( 4) 線性期:此期菌落以恒定的速率作徑向生長(zhǎng) 。 盡管隨著菌絲的生長(zhǎng)菌落直徑不斷擴(kuò)大 , 但成熟菌落的邊沿生長(zhǎng)區(qū)的寬度幾乎保持恒定 。 也可測(cè)定在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌絲 。 在菌絲體的生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生繁茂的分枝 , 而構(gòu)成真菌的菌落 。 將 N=N0/10代入 式 , 可得到 D=1/k 殘留的細(xì)胞在適宜的條件下恢復(fù)活性 , 稱為復(fù)活 。 穩(wěn)定期出現(xiàn)的原因 營(yíng)養(yǎng): 穩(wěn)定期的出現(xiàn)常常是比較突然的,因?yàn)樵趯?duì)數(shù)期,原生質(zhì)的增加是按對(duì)數(shù)增加的。 因此,在正常的分批培養(yǎng)中,從開(kāi)始到對(duì)數(shù)期末,各種底物的濃度 S遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于 Ks,所以,這段時(shí)間很少會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)限制的情況,而一直保持其最高生長(zhǎng)速率。 ( 2)當(dāng)生長(zhǎng)限制性營(yíng)養(yǎng)物濃度很低時(shí)( S171。 上述指數(shù)形式的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)公式主要適用于細(xì)菌 、酵母菌等單細(xì)胞且以二分裂方式繁殖的微生物群體的生長(zhǎng) 。 延遲期細(xì)胞的特性: 微生物在延遲期內(nèi)雖 不分裂 , 但 代謝機(jī)能非常活躍 , 誘導(dǎo)酶的產(chǎn)生最快 , 為細(xì)胞分裂進(jìn)行著極為復(fù)雜的代謝上和生理上的準(zhǔn)備 , 單個(gè)菌體的體積和質(zhì)量顯著增加 , 其中尤以桿菌的長(zhǎng)軸增加最為明顯 。 生長(zhǎng)曲線可分為以下幾個(gè)時(shí)期: 1. 延遲期:細(xì)菌數(shù)目保持不變或略有下降,倍增速率為 0; :細(xì)菌開(kāi)始增殖,倍增速率隨時(shí)間不斷增大; 3. 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期: 倍增速率達(dá)到最大值 ,細(xì)菌數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng); 4. 減速生長(zhǎng)期:倍增速率隨時(shí)間而減少,平均世代時(shí)間延長(zhǎng); 5. 穩(wěn)定期:生長(zhǎng)速率與死亡速率相等,倍增速率為 0,活菌數(shù)目保 持恒定; :死亡速率超過(guò)生長(zhǎng)速率,并越來(lái)越大,活菌數(shù)目迅 速減少; 7. 對(duì)數(shù)死亡期:死亡速率達(dá)到最大值并保持恒定 :死亡速率降低,從理論上講,只要培養(yǎng)基不干枯,少數(shù) 細(xì)菌仍能存活很長(zhǎng)時(shí)間。 ( 2)稀釋培養(yǎng)法。 快速生長(zhǎng)的細(xì)胞含有多個(gè)復(fù)制原點(diǎn) , 因此生長(zhǎng)速率的改變會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)量 ( 大小 ) 的改變 , 快速生長(zhǎng)的細(xì)胞比慢速生長(zhǎng)的細(xì)胞大幾乎 10倍 。 在 營(yíng)養(yǎng)豐富 的培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)速度快,代時(shí)短, DNA的合成是連續(xù)的, S期似乎占據(jù)了整個(gè)細(xì)胞周期, 細(xì)胞周期各個(gè)時(shí)期的界限不明顯,是相互重疊的。 第一節(jié) 單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng) 細(xì)胞周期的定義: 細(xì)胞周期通常由幾個(gè)可以觀察到的 、 能相互區(qū)分的時(shí)期組成 , 每一個(gè)時(shí)期的開(kāi)始都依賴于前一個(gè)時(shí)期的結(jié)束 。 生長(zhǎng)是一個(gè)逐漸發(fā)生的量變的過(guò)程 , 它是繁殖的基礎(chǔ);繁殖是一個(gè)質(zhì)變的過(guò)程 , 是生長(zhǎng)的結(jié)果 。 間期 前期 中期 后期 M期 DNA復(fù)制 S G1 細(xì)胞分裂 末期 真核細(xì)胞的生活周期 G2 C G1 D 原核生物的細(xì)胞周期 細(xì)菌 在低生長(zhǎng)速率的條件下 (即代時(shí)大于 1h),細(xì)胞周期似乎和真核生物的相似。 當(dāng)世代時(shí)間小于 C+D時(shí),按照 DNA原來(lái)的復(fù)制方式就來(lái)不及在細(xì)胞分裂前完成復(fù)制,就不能保證子細(xì)胞獲得一個(gè)完整的染色體。 細(xì)胞生長(zhǎng)的 中心問(wèn)題是:組成細(xì)胞的各種大分子是如何合成和組裝的? 熒光抗體標(biāo)記實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞壁和橫隔的形成 壁的生長(zhǎng)與 原細(xì)胞壁上肽聚糖的限制性降解有關(guān) , 不能自溶的糞鏈球菌 、 大腸桿菌等菌株的突變體 , 如果不加入溶菌酶就不能生長(zhǎng)和分裂 。 ( 2)測(cè)定細(xì)胞的某種成分如氮的含量, DNA或 RNA的含量等。 延遲期 菌種接種于新鮮培養(yǎng)基后 , 微生物往往不立即進(jìn)行分裂 , 因此細(xì)胞數(shù)目不增加或增加很少 , 這一段時(shí)間稱為延遲期 。 因此在測(cè)定物理化學(xué)因子對(duì)微生物的影響時(shí) , 應(yīng)考慮微生物的生理狀態(tài) 。 米氏公式: 表示的是酶反應(yīng)速率和底物濃度之間的關(guān)系 。 SKSuusm ??對(duì)同一種限制性營(yíng)養(yǎng)物,不同的微生物有不同的 um和 ks值 而同一種微生物在不同的限制性營(yíng)養(yǎng)物條件下,也有不同的 um和 ks值。 微生物雖然是一個(gè)極為復(fù)雜的生命體系 , 但是實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) , 它的生長(zhǎng)速率與溫度之間的關(guān)系在一定范圍內(nèi)也符合 Arrhenius公式: lnK=E/RT+B 或 K=AeE/RT K:反應(yīng)速率常數(shù) ( 比生長(zhǎng)速率常數(shù) ) T:反應(yīng)的絕對(duì)溫度; R:氣體常數(shù); E:反應(yīng)活化能; A: 通常稱為頻率因子 。 ≥ 時(shí)間 細(xì)胞產(chǎn)量 營(yíng)養(yǎng)物濃度 、 生長(zhǎng)速率和細(xì)胞產(chǎn)量之間的關(guān)系 影響生長(zhǎng)速度和最大收獲量 只影響最大收獲量 營(yíng)養(yǎng)物濃度超過(guò)一定后,對(duì)生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)量都沒(méi)有影響,表明穩(wěn)定期的出現(xiàn)還有其他原因。 死亡速率常數(shù) k可以衡
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