【正文】 為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； T3為供試品高濃度所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； I為高、低濃度劑量之比的對(duì)數(shù)值，1:08時(shí)，I=。除藥典各論另有規(guī)定外，管碟法的可信限率不得超過(guò)5%。g/mg）表示。效價(jià)測(cè)定時(shí)，量取平均裝量項(xiàng)下的內(nèi)容物或5～10支的內(nèi)容物，混勻，用干燥的刻度吸管吸取一定量的供試品，將吸管外壁用濾紙拭凈，再棄去多余的溶液，使供試品至吸管刻度，沿量瓶頸部?jī)?nèi)壁緩緩流放入已盛有一定量溶劑（以免抗生素結(jié)晶析出）的量瓶?jī)?nèi)，混勻，繼續(xù)加溶劑至刻度，搖勻，再量取適量稀釋至規(guī)定的濃度。 膠囊劑 取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，研細(xì)，根據(jù)平均裝量，精密稱(chēng)取約相當(dāng)于1粒膠囊的量或按標(biāo)示量、量瓶體積及抗生素儲(chǔ)備液濃度等計(jì)算的取樣量，置于量瓶中，加規(guī)定的溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，如供試品含有較多的輔料，則照片劑項(xiàng)下的方法進(jìn)行。使用過(guò)的試管經(jīng)滅菌后，將培養(yǎng)基傾出，用水清洗，瀝干，再用硫酸－重鉻酸鉀洗液浸泡，清水沖洗干凈后，晾干，在160℃干烤2～3小時(shí)滅菌，保持潔凈，備用。如仍不能除去附著污物，可用1%～2%硝酸鈉的濃硫酸溶液浸泡后，再經(jīng)水洗滌。13 試驗(yàn)用菌液（Staphylococus aureus）懸液 取金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在35～37℃培養(yǎng)20～22小時(shí)。在該品種項(xiàng)下規(guī)定的劑量反應(yīng)線性范圍內(nèi)，以線性濃度范圍的中間值作為中間濃度，標(biāo)準(zhǔn)品溶液選擇5個(gè)劑量，劑量間的比例應(yīng)適宜（通常為1:）。 供試品溶液 根據(jù)估計(jì)效價(jià)或標(biāo)示量，取供試品按標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備方法，選擇2個(gè)或3個(gè)劑量。斜率（b）=∑（x－ⅹ）∑（y－y）∑（x－ⅹ）2 截距（a）=y－bx 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程 Y=bX＋a式中 x為抗生素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度或濃度的數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換值；X為抗生素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度或濃度的數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換值的平均值；y為各標(biāo)準(zhǔn)品溶液的吸光度；y為標(biāo)準(zhǔn)品溶液吸光度的平均值。 三劑量（）法效價(jià)計(jì)算公式P=log1[（T3+T2+T1－S3－S2－S1）]100% S3+T3－S1－T1式中 S3為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度所致吸光度的總和； S2為標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度所致吸光度的總和； S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致吸光度的總和； T3為供試品高濃度所致吸光度的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度所致吸光度的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致吸光度的總和； I為高、低濃度劑量之比的對(duì)數(shù)值，1:08時(shí)，I=。對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果不符合規(guī)定的樣品，應(yīng)有可靠性測(cè)驗(yàn)及可信限率均符合規(guī)定，且測(cè)定結(jié)果在估計(jì)效價(jià)（原料藥）或標(biāo)示量（制劑）177。 實(shí)驗(yàn)計(jì)算所得效價(jià)低于估計(jì)效價(jià)的90%或高于估計(jì)銷(xiāo)假的110%，則檢驗(yàn)結(jié)果僅作為初試，應(yīng)調(diào)整供試品估計(jì)效價(jià)，予以重試。 平行線測(cè)定法 效價(jià)計(jì)算 二劑量（）法效價(jià)計(jì)算公式P=log1[T2＋T1－S2－S1）I]100% T2＋S2－T1－S1式中 P為供試品效價(jià)（相當(dāng)于標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)的百分?jǐn)?shù)）； S2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致吸光度的總和； S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致吸光度的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致吸光度的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致吸廣度的總和； I為高、低劑量之比的對(duì)數(shù)值，2:1時(shí)，I=。15 記錄與計(jì)算 試驗(yàn)記錄要求與管碟法相同。 平行線測(cè)定法（二劑量（）和三劑量（）法） 標(biāo)準(zhǔn)品溶液 按中國(guó)藥典該品種含量測(cè)定項(xiàng)下的要求，制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。 稀釋 標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液的稀釋?xiě)?yīng)使用經(jīng)標(biāo)定的量瓶，每步稀釋的量取量以不少于2ml為宜，稀釋步驟一般不超過(guò)3步。根據(jù)這一原則，通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基原材料的預(yù)試，挑選合適品牌廠家的產(chǎn)品使用。本身帶有攪拌或循環(huán)水系統(tǒng)的恒溫水浴箱，可不再配備電動(dòng)攪拌器?？股匚⑸锉葷岱?0 儀器與用具 操作室 要求同管低法 分光光度計(jì) 應(yīng)有數(shù)字顯示功能和自動(dòng)記錄裝置，數(shù)顯精度應(yīng)在小數(shù)點(diǎn)后三位。糖衣片、腸溶片 取標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的片數(shù)，置于乳缽中，研細(xì)，分次加入規(guī)定的溶劑，研磨使其溶解，將研磨液轉(zhuǎn)移至瓶口放有小漏斗的量瓶中，量瓶體積根據(jù)供試品標(biāo)示量、所取片數(shù)及抗生素儲(chǔ)備液濃度（一般為1000單位/ml）選定，用規(guī)定溶劑稀釋至刻度，搖勻，靜置，使輔料下沉而抗生素已溶解在溶液內(nèi)，精密吸取量瓶中的上層液適量，作進(jìn)一步稀釋。取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，稱(chēng)取適量（50mg以上，根據(jù)標(biāo)示量及平均裝量折算估計(jì)效價(jià)，并按估計(jì)效價(jià)及量瓶體積計(jì)算取樣量），置量瓶中，加標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的溶劑溶解，稀釋?zhuān)瑴y(cè)定，計(jì)算出1mg的效價(jià)單位數(shù)，再根據(jù)平均裝量及標(biāo)示量計(jì)算平均每瓶的百分含量。 效價(jià)測(cè)定結(jié)果的有效數(shù)字按藥典規(guī)定及數(shù)字的原則取舍。（）法要求直線回歸和劑間要非常顯著（P），偏離平行不應(yīng)顯著（P）；（）法除（）法的上述規(guī)定外，尚需考察二次曲線和反向二次曲線，且二者均應(yīng)不顯著（P），符合以上各項(xiàng)規(guī)定后，才能認(rèn)為試驗(yàn)結(jié)果可靠，方可進(jìn)行效價(jià)和可信限率計(jì)算。 計(jì)算 二劑量法（）效價(jià)計(jì)算公式P=log1[T2+T1－S2－S1 =I]100% T2+S2－T1－S1式中 P為供試品效價(jià)（相當(dāng)于標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)的百分?jǐn)?shù)）； S2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（或面積）的總和； I為高、低劑量之比的對(duì)數(shù)值，2:1時(shí)，I=。每種溶液各用1支毛細(xì)滴管。如無(wú)鋼管放置器，可用小眼科鑷子夾持鋼管，輕輕地放置在培養(yǎng)基上，相應(yīng)劑量的鋼管對(duì)角均勻放置。但所選用的濃度必須在劑量反應(yīng)直線范圍內(nèi)。 稀釋 稀釋操作應(yīng)遵照容量分析的操作規(guī)程進(jìn)行。6 操作法 稱(chēng)量 稱(chēng)量前先將標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱中取出，使其溫度與室溫平衡。置4℃冷藏箱保存，可使用3天。 將已接種的細(xì)菌管置35～37℃培養(yǎng)22～24小時(shí)，霉菌管一般置24～25℃霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7天。菌落不典型時(shí)，可進(jìn)行平板分離單菌落。臨用時(shí)按照使用說(shuō)明進(jìn)行配制，但應(yīng)注意核對(duì)培養(yǎng)基的pH，必要時(shí)需調(diào)節(jié)pH，使其符合規(guī)定。 磷酸鹽緩沖液（） 取磷酸氫二鈉（Na2HPO4 天平 分析天平，經(jīng)計(jì)量檢定。使用后應(yīng)立即置5%石炭酸或1:1000新潔爾溶