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正文內(nèi)容

臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊(cè)(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 存柜(安裝排風(fēng)設(shè)備)10.隔離服裝(消毒后使用)11.其他相關(guān)設(shè)備。 ]5.適宜的照明裝置6.冷水和熱水供給系統(tǒng)置放標(biāo)本的容器大小視標(biāo)本和固定液的體積而定,應(yīng)適當(dāng)大一些。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中,容器底面襯以脫脂棉。8.凡進(jìn)入固定程序的標(biāo)本必須連帶其正確無(wú)誤的病理檢驗(yàn)號(hào)(病理號(hào))。㈦常用固定液 無(wú)水磷酸氫二鈉 4.Zenker固定液 100ml[說(shuō)明]配制本液時(shí),先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40~50℃溶解后,再加入重鉻酸鉀,最后加入硫酸鈉,貯存待用。 甲醛(40%) 無(wú)水醋酸鈉 8.丙酮固定液 ④脫水試劑應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換(500ml乙醇可用于500個(gè)組織塊脫水;加入硫酸銅的無(wú)水乙醇變藍(lán)時(shí),提示需要更換)。 4.浸蠟 ⑤熔蠟應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。(7)使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠(chǎng)商的說(shuō)明書(shū)操作。④包埋用的熔蠟應(yīng)純凈,熔點(diǎn)適宜。使用切片刀時(shí),必須精心磨備(在低倍顯微鏡下確認(rèn)刀刃無(wú)缺口);使用一次性切片刀片時(shí),應(yīng)及時(shí)更新。修塊粗切片的厚度為15~20μm。(10)必須立即在置放了蠟片的載玻片一端(待貼標(biāo)簽的一端),用優(yōu)質(zhì)記號(hào)筆或刻號(hào)筆準(zhǔn)確、清楚標(biāo)記其相應(yīng)的病理號(hào)(包括亞號(hào))。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例,可預(yù)制蠟片備用。 30min7.二甲苯Ⅱ 30min8.石蠟Ⅰ 30min9.石蠟Ⅱ 60min10.石蠟Ⅲ 90min11.包埋(1)手工常規(guī)包埋:參見(jiàn)上述的“㈠手工操作”項(xiàng)。(3)使用自動(dòng)組織處理機(jī)時(shí):①合理設(shè)定的運(yùn)行時(shí)間(充分利用夜間)。3.浸蠟:將已經(jīng)丙酮脫水的組織塊由試管中取出,用吸水紙去除其表面液體,隨即置入75~80℃熔化的石蠟中,待組織塊下沉、不再出現(xiàn)氣泡時(shí)(約需30s),即可包埋。5.注意事項(xiàng)(1)為了盡量縮短制片時(shí)間,必須預(yù)先作好有關(guān)準(zhǔn)備工作,備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴(或其他引火器)、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等,放在固定部位待用。四、冷凍組織切片的制備㈠應(yīng)用恒冷箱切片機(jī)制備切片:是目前最適用方法。(4)用毛筆將切片展開(kāi),貼附于載玻片上,稍干后,置于冷凍切片固定液中固定1min,隨即進(jìn)行HE染色。(5)調(diào)整冷凍溫度調(diào)節(jié)器,至切片刀和冷凍臺(tái)呈現(xiàn)霜凍。(2)連續(xù)噴射氯乙烷于組織塊上,待組織塊凍結(jié)后,改為間歇噴射,使凍結(jié)適度,立即切片。 2. 流水沖洗2~3h。 4.脫鈣時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)。 2.脫鈣組織與脫鈣液的體積比1:30。 流水沖洗1~2h。 冷凍不足無(wú)法切片,冷凍過(guò)度切片易碎。3.甲醇致冷切片(按有關(guān)廠(chǎng)商的儀器說(shuō)明書(shū)操作)。(3)將冷凍臺(tái)和切片刀致冷器上的導(dǎo)線(xiàn)連接在控制臺(tái)直流電源上(注意:正負(fù)電極不可接反)。(2)間斷開(kāi)放液態(tài)二氧化碳桶的開(kāi)關(guān),噴凍組織塊和切片刀,使組織塊凍結(jié)和切片刀制冷。加溫脫水和浸蠟過(guò)程必須應(yīng)用隔水溫箱,不得使用干烤箱操作。(5)將載玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。(2)再向該試管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。(2)要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。 60min5.無(wú)水乙醇Ⅱ 要使用質(zhì)量好的切片機(jī),規(guī)范地切片,精心維護(hù)切片機(jī)。蠟片應(yīng)置放在載玻片右(或左)2/3處的中央,留出載玻片左(或右)1/3的位置用于貼附標(biāo)簽。(5)細(xì)心移動(dòng)刀座或蠟塊支持器,使蠟塊與刀刃接觸,旋緊刀座和蠟塊支持器。 ②必須嚴(yán)防各種異物污染,勿將無(wú)關(guān)組織(包括縫線(xiàn)、紙屑或其他異物(尤其是硬質(zhì)異物)埋入蠟塊內(nèi)。(5)將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)(編號(hào)應(yīng)清晰可見(jiàn))。③組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過(guò)程,應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。 60min(3)石蠟Ⅲ(56~58℃) (1)石蠟Ⅰ(45~50℃)③二甲苯應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。 ②用于脫水的試劑容積應(yīng)為組織塊總體積的5~10倍以上。 ㈢常規(guī)切片的手工操作(步驟次序和各步驟的持續(xù)時(shí)間)1.水洗:用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。染色前應(yīng)進(jìn)行脫汞沉淀處理。 蒸餾水 經(jīng)Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色,可用水洗滌12小時(shí)后進(jìn)入乙醇脫水(兼脫色)。 冰醋酸 5.Bouin固定液 蒸餾水(加至) 硫酸鈉 900ml[說(shuō)明]一般組織塊經(jīng)乙醇-甲醛固定1~2小時(shí)后,即可移入95%乙醇內(nèi)脫水。 95%乙醇 甲醛(40%) ⑤固定組織塊的容器要大一些。6.骨組織:先鋸成小片(若是長(zhǎng)骨應(yīng)作橫向鋸片),在4%中性甲醛中固定24小時(shí)后,再進(jìn)行脫鈣。㈣器官、組織固定的基本方法[另參見(jiàn)本章第四節(jié)(病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù))]1.食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官:依規(guī)范方法剪開(kāi)后,按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上(重點(diǎn)暴露黏膜面或內(nèi)表面的病變處),并用大頭針將標(biāo)本邊緣處固定于紙板上,然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面,并覆蓋薄層脫脂棉)。病理組織學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)一、組織的固定㈠凡需要進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的標(biāo)本(器官或組織),于離體(活體或尸體)后,應(yīng)盡快置放(浸泡)于裝有足夠量固定液的容器中固定。 (三)傳染病用尸檢室:嚴(yán)格按照關(guān)于傳染病管理法規(guī)的要求建設(shè)。 第七節(jié)五、接受外院的病理會(huì)診時(shí),由會(huì)診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學(xué)會(huì)診咨詢(xún)意見(jiàn)書(shū)》,并在該《意見(jiàn)書(shū)》上寫(xiě)明:“病理醫(yī)師個(gè)人會(huì)診咨詢(xún)意見(jiàn),僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。 2.一個(gè)病例僅有一張為查見(jiàn)惡性腫瘤細(xì)胞的“陽(yáng)性片”或“可疑陽(yáng)性片”時(shí),該陽(yáng)性片或可疑陽(yáng)性片原則上不予外借。 患方借出的切片應(yīng)妥善保存,必須在規(guī)定的期限內(nèi)歸還。 三、活檢、尸檢大體標(biāo)本的保存期限(一)應(yīng)積極實(shí)行病理學(xué)檢查資料的計(jì)算機(jī)管理。 (三)尸檢病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)必須由主檢人員簽名后發(fā)出。包括照片及其底片、幻燈片、圖表、臨床病理討論記錄、參考文獻(xiàn)和電子信息資料等。8. 小結(jié)。(3)體腔(胸腔、心包腔、腹腔)檢查所見(jiàn)。 2.認(rèn)真清洗尸檢工作服和器械等,并進(jìn)行消毒。(五)主持尸檢人員確認(rèn)尸檢手續(xù)完備(死亡證明、尸檢申請(qǐng)書(shū)或委托書(shū)、死者的臨床資料要點(diǎn)等),并請(qǐng)死者親屬或委托代理人確認(rèn)尸體。5.同意對(duì)尸檢過(guò)程進(jìn)行必要的攝影、錄像,并確認(rèn)是否同意教學(xué)示教。 (五)申請(qǐng)或委托尸檢方:①有關(guān)醫(yī)院,②衛(wèi)生行政部門(mén),③司法機(jī)關(guān),④死者的親屬或代理人,或⑤被受理尸檢方認(rèn)可的其他申請(qǐng)或委托方。 (代表)性,放大倍數(shù)適當(dāng)。 [參考本章第一節(jié)的八(一)項(xiàng):“病理學(xué)診斷表述的基本類(lèi)型”]:用于查找惡性腫瘤細(xì)胞的診斷。 (2)胸腔腫物:肺、胸膜和縱隔等。 第三節(jié)(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見(jiàn),宜以文字形式報(bào)告(具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定)。2.快速石蠟切片的制備方法參見(jiàn)第3章第一節(jié)。六、標(biāo)本的巨檢、取材和記錄(一)病理科驗(yàn)收快速活檢申請(qǐng)單和標(biāo)本后,應(yīng)參照本章第一節(jié)中“四”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定,立即進(jìn)行標(biāo)本的巨檢、取材和記錄。 三、慎用范圍涉及截肢和其他會(huì)嚴(yán)重致殘的根治性手術(shù)切除的標(biāo)本。 需要確定病變性質(zhì)(如腫瘤或非腫瘤/良性腫瘤或惡性腫瘤等),以決定手術(shù)方案的標(biāo)本。盡可能不在手術(shù)進(jìn)行過(guò)程中臨時(shí)申請(qǐng)快速活檢。 手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查(快速活檢)是臨床醫(yī)師在實(shí)施手術(shù)過(guò)程中,就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問(wèn)題請(qǐng)求病理醫(yī)師快速進(jìn)行的急會(huì)診,尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。第二節(jié) 手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)4.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的經(jīng)收人員(包括患方人員)必須履行簽收手續(xù)。6.患者的基本情況項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫(xiě)的文字抄寫(xiě)或用計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)中,并認(rèn)真核查無(wú)誤,簽發(fā)報(bào)告書(shū)的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動(dòng)。(三)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的書(shū)寫(xiě)要求 (二)病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)的基本內(nèi)容1.患者的基本情況,包括病理號(hào),姓名,性別,年齡,送檢醫(yī)院/科室(住院/門(mén)診),住院號(hào)/門(mén)診號(hào),送檢/收驗(yàn)日期等。(五)對(duì)打印的病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū),主檢病理醫(yī)師應(yīng)與活檢記錄單上的病理診斷文字進(jìn)行核對(duì),并親筆簽名。4.應(yīng)在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”,告知技術(shù)人員進(jìn)行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)技術(shù)檢測(cè)。(四)制片過(guò)程發(fā)生意外情況時(shí),有關(guān)技術(shù)人員和技術(shù)室負(fù)責(zé)人應(yīng)及時(shí)向科主任報(bào)告,并積極設(shè)法予以補(bǔ)救。(十五)巨檢/取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術(shù)人員認(rèn)真辦理交接手續(xù)。(九)每例標(biāo)本取材前、后,應(yīng)用流水徹底清洗取材臺(tái)面和所有相關(guān)器物,嚴(yán)防檢材被無(wú)關(guān)組織或其他異物污染,嚴(yán)防細(xì)小檢材被流水沖失。(五)病理醫(yī)師進(jìn)行巨檢和取材時(shí),記錄人員應(yīng)根據(jù)病理申請(qǐng)單內(nèi)容,向巨檢醫(yī)師報(bào)告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見(jiàn)、標(biāo)本情況(采取部位、數(shù)量等)和送檢醫(yī)師的特殊要求等,并如實(shí)、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。 巨檢和取材時(shí)的注意事項(xiàng):(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進(jìn)行,應(yīng)配備人員負(fù)責(zé)記錄。(四)病理科應(yīng)建立驗(yàn)收人員與組織取材人員之間申請(qǐng)單和標(biāo)本的交接制度。對(duì)于需作特殊項(xiàng)目檢查(如微生物、電鏡、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等)的標(biāo)本,應(yīng)按相關(guān)的技術(shù)要求進(jìn)行固定或預(yù)處理。發(fā)現(xiàn)疑問(wèn)時(shí),應(yīng)立即向送檢方提出并在申請(qǐng)單上注明情況。 八、患者或患者的授權(quán)人應(yīng)向醫(yī)師提供有關(guān)患者的真實(shí)信息(包括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息)。各醫(yī)院可酌情準(zhǔn)予條件適宜的高年資病理科住院醫(yī)師試行簽署病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。 總二、醫(yī)院病理科和承擔(dān)醫(yī)院病理科任務(wù)的醫(yī)學(xué)院校病理教研室的主要臨床任務(wù)是通過(guò)活體組織病理學(xué)檢查(簡(jiǎn)稱(chēng)活檢)、細(xì)胞病理學(xué)檢查(簡(jiǎn)稱(chēng)細(xì)胞學(xué)檢查)和尸體剖檢(簡(jiǎn)稱(chēng)尸檢)等作出疾病的病理學(xué)診斷(或稱(chēng)病理診斷)。臨床醫(yī)師和病理醫(yī)師雙方皆應(yīng)認(rèn)真履行各自的義務(wù)和承擔(dān)相應(yīng)的責(zé)任。九、病理科應(yīng)努力為臨床、為患者提供優(yōu)質(zhì)服務(wù),遵照本規(guī)范的要求加強(qiáng)科室建設(shè),制訂完善的科室管理制度,并實(shí)施有效的質(zhì)量監(jiān)控。普通活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)一、申請(qǐng)單和標(biāo)本的驗(yàn)收2.5.在申請(qǐng)單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵編及電話(huà)號(hào)碼,以便必要時(shí)進(jìn)行聯(lián)絡(luò),并有助于隨訪(fǎng)患者。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。三、標(biāo)本的預(yù)處理標(biāo)本驗(yàn)收人員對(duì)已驗(yàn)收的標(biāo)本酌情更換適宜的容器,補(bǔ)充足量的固定液;對(duì)于體積大的標(biāo)本,值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的情況下,及時(shí)、規(guī)范地予以剖開(kāi),以便充分固定。已知具有傳染性(例如結(jié)核病、病毒性肝炎等)的標(biāo)本,應(yīng)在不污染環(huán)境和/或不擴(kuò)散傳染的原則下,經(jīng)必要的初步巨檢或切開(kāi)后,立即置于盛有足量固定液的專(zhuān)用容器內(nèi),充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。(六)具有醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)價(jià)值的標(biāo)本可攝影存檔,并酌情妥為保存。(十一)巨檢/取材者和記錄人員應(yīng)相互配合、核查,確保所取組織塊及其編號(hào)標(biāo)簽準(zhǔn)確地置于用于脫水的容器(脫水盒等)內(nèi)。(二)制片工作一般應(yīng)在取材后2個(gè)工作日內(nèi)完成(不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標(biāo)本)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。 5.應(yīng)全面、細(xì)致地閱片,注意各種有意義的病變。Ⅱ類(lèi):不能完全肯定疾病名稱(chēng)/病變性質(zhì),或是對(duì)于擬診的疾病名稱(chēng)/病變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向,可在擬診疾?。∽兠Q(chēng)之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤?、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除(除外)”之?lèi)的詞語(yǔ)。4.病理診斷的表述(參見(jiàn)上文“病理診斷表述的基本類(lèi)型”)。2.病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)應(yīng)為一式二份,一份交予送檢方,另一份隨同患者的病理學(xué)檢查申請(qǐng)單/病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。 有的病例難以快速診斷,需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確診斷。(六)負(fù)責(zé)快速活檢的主檢病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的①臨床情況,②手術(shù)所見(jiàn),③既往有關(guān)的病理學(xué)檢查情況。 七、組織切片的制備(一)冷凍切片1.完成冷凍HE染色切片制備的時(shí)間通常應(yīng)為20~25分鐘。對(duì)于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會(huì)嚴(yán)重致殘的手術(shù)中快速活檢,應(yīng)由兩位高級(jí)稱(chēng)職的病理醫(yī)師共同簽署會(huì)診意見(jiàn)。(二)“凍對(duì)”/“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號(hào),并作出綜合性診斷。 二、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的基本要求(一)細(xì)胞涂片、組織印片和壓片(參見(jiàn)第3章第二節(jié))。3.禁忌癥:患者有難以控制的咳嗽、肺動(dòng)脈高壓癥、進(jìn)行性肺氣腫、出血性體質(zhì)及“暈針史”等。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。因此,細(xì)胞病理學(xué)檢查的陰性結(jié)果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。,可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)問(wèn)題附加:①某些建議(例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理科外病理學(xué)會(huì)診、密切隨查/隨訪(fǎng)等);②注釋?zhuān)懻摗?.病理科應(yīng)有專(zhuān)人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報(bào)告書(shū)。 (三)受理尸檢部門(mén):具備獨(dú)立尸檢能力的①醫(yī)院病理科,②醫(yī)學(xué)院校的病理學(xué)教研室,③經(jīng)醫(yī)政部門(mén)注冊(cè)的病理診斷中心。2.授權(quán)主
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