【正文】 久，顏色偏酸，薛氏點不明顯或消失。 如果血片偏藍，說明染液偏鹼性。 注意： 吸取母液時，不要晃動瓶子 ,以免沉淀物泛起影響染色效果 . 成批血片染色 ： 將已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入 3%吉氏染液稀釋液（ 3毫升吉氏原液加緩沖液或凈水 97毫升，混勻）浸沒血片，同時對厚薄血膜染色 30min（根據(jù)當?shù)貙嶋H情況，酌情增減染色時間和濃度），然后用清水輕輕將染液漂洗干凈，將血片標本（血膜面朝下）插于晾干板上晾干，包裝，鏡檢。 染液偏酸 時，所帶的正電荷增加，易于伊紅結(jié)合，使紅細胞和瘧原蟲的核染成鮮紅色 ，而 淋巴細胞和原蟲的胞漿著色較差 ；反之，當 染液偏堿 時， 紅細胞和嗜伊紅白細胞的顆粒等被染成紫藍色 ，不易觀察。 染液的染色原理 染色原理是染料于被染物的陰陽離子互相吸附而結(jié)合的一種化學反應 。 切忌在毒太陽下曬或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。包括：厚、薄血片的制作和染色；瘧原蟲的顯微鏡鏡檢，確定陰陽性和蟲種，定量計數(shù)以及顯微鏡的使用與維護。 方法是將載片分為 6等分 ， 第 2格備貼標簽及編號用；厚血膜涂在第 3格中央 ， 薄血膜涂在第 4格前緣至第 6格中部 。 發(fā)熱病人血片 標本片 薄血膜的制作 薄血膜 用推片一端邊緣的中點從取血部分 ①取約1～ （相當于 1/4火柴頭大?。?， 使血滴與平置的載玻片接觸， 并形成 25～ 350夾角 ，待血液向兩側(cè)擴展約 ② 2cm～ ，均勻而迅速地從右向左推成舌狀薄血膜（約 ）。 間日瘧在寒熱發(fā)作期 ， 外周血中主要可見環(huán)狀體期；發(fā)作后數(shù)小時 （ h） ， 見大滋養(yǎng)體期 ， 形態(tài)較易辯認 ， 為診斷的有利時機；發(fā)作 3648h， 可檢出裂殖體；發(fā)作 12次后 ，配子體出現(xiàn)較多 。 血 檢 瘧 原 蟲 是確診瘧疾最可靠的方法 20世紀以來 ， 隨著顯微鏡的不斷改進和染色方法的的不斷完善 ， 使顯微鏡檢查瘧原蟲的方法成為瘧疾病原學診斷的重要手段 。 （二）非洲、南亞次大陸、東南亞的一些國家和地區(qū)是瘧疾高度流行區(qū)，到上述國家及地區(qū)工作、生活、學習要謹防瘧疾感染。 世界瘧疾日由 世界衛(wèi)生大會 在 2022年 5月第六十屆會議上設立 ， 旨在推動全球進行瘧疾防治 。 我國傳染病網(wǎng)絡報告系統(tǒng)數(shù)據(jù)顯示 ， 瘧疾年報告病例數(shù)由 2022年的 增加到 2022年的 ， 近年來仍有上升趨勢 ，尤其我省上升趨勢更為明顯 ， 截止目前 2022年瘧疾發(fā)病人數(shù)明顯超過去年同期 ， 經(jīng)濟相對落后的魯南 、 魯西南地區(qū)發(fā)病較高；因此 ， 敬請在座的各位同仁更要關注瘧疾防治工作 。 （五）早期診斷和全程、足量的規(guī)范用藥是治療瘧疾的關鍵。 瘧原蟲的鏡檢技術(shù) 1. 血膜制作與染色。 取血部位和血量 采血部位和方法： 采血部位一般人為耳垂，指頭；一人一針，常規(guī)消毒、采血。 ③薄血膜外觀：舌狀厚薄均勻，無劃痕，④位于玻片 1/2～ 1/3處。 標準的瘧疾厚薄血膜位置 全國瘧疾鏡檢知識與技能競賽 血片制作和染色質(zhì)量評價標準 好血片制作質(zhì)量 : 厚血膜： 血量 ～ ,位置 玻片右 1／ 3稍偏右 ,直徑 ～ ， 外觀 圓形厚膜均勻。 血膜的制作 血膜編號 血膜制成后，立即在玻片面上寫上受檢者的號碼，以防差錯；待薄血膜干后再用鉛筆于薄血膜中寫上血片種類的代號和受檢者的個人編號，依次順序插入標本盒內(nèi)。若不能及時染色，薄血膜宜先用甲醇固定（ 13分鐘）然后用過濾清水對厚血膜溶血，晾干固定后裝入盒內(nèi)蓋嚴，待以后染色。 紅 、 白細胞和瘧原蟲的蛋白質(zhì)均由氨基酸組成 ， 每個氨基酸電離出一個帶正電荷的 NH3+和一個帶負電荷的 COO。 姬氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑 ， 即使在炎熱天氣中 ， 亦可經(jīng)久不變 。 操作 1 （快染） 配制 5%染液，（每張血片約需染液 2ml） ：量筒內(nèi)量 2ml緩沖液或新鮮涼開水，直接滴加吉氏原液 7滴，混勻，滴入待染標本的厚薄血膜上，染色 10min，清水細緩沖洗，晾干鏡檢。 新配制的染液因色素尚未充分溶解 ， 染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性 。室溫高則著色快，染色時間可略縮短，氣溫低可適當延長。 ● 最少檢查 100個厚血膜油鏡視野未查見 瘧原蟲。在我國流行最廣的是間日瘧，其次是惡性瘧；惡性瘧主要分布在我國的云南、海南兩省；三日瘧患者極少見，卵形瘧僅發(fā)現(xiàn)幾例。 ● 引起癥狀與間日瘧相似， 但很少復發(fā)。注意粗環(huán)與間日瘧環(huán)狀體的區(qū)別。 2）同一血膜中發(fā)現(xiàn)大量纖細的惡性瘧環(huán)狀體，并混有少量間日 瘧原蟲。 200（白細胞數(shù)） =1400 / μl 答：該患者原蟲密度為 1400 / μl。 ● 白細胞瘧原蟲計算公式： 瘧原蟲數(shù) 患者每微升血的白細胞數(shù) 247。 蟲種鑒別時應注意 當血膜中發(fā)現(xiàn)環(huán)狀體時，且數(shù)量較多，環(huán)纖細，此時應注意觀察全血膜有無間日瘧的其他期原蟲，如無可判定為惡性瘧。 惡性瘧原蟲雄配子體 臘腸形，兩端鈍圓；核大，疏松，淡紅色，位于中央；胞漿淺藍色或淺紅色；瘧色素圍于核周。 ● 引起間日瘧，病程呈良性， 但有復發(fā)。 一部分裂殖子在紅細胞內(nèi)不再進行裂體增殖，而發(fā)育成雌，雄配 子體。 ● 厚血膜干燥時不要加熱，加熱會使原蟲變形，影響鏡檢結(jié)果。 姬氏和瑞氏染液的主要成份是美藍 、 伊紅和由美藍氧化產(chǎn)生的天青 ， 三者能在酒精溶液中溶解 ， 但在水溶液中伊紅遇到美藍和天青即產(chǎn)生沉淀 。 如果血片偏紅，說明染液偏酸性。 姬氏染液的染色方法 ▲ 先用甲醇或無水酒精固定薄血膜 ,再用清水對厚血膜溶脫血紅蛋白，然后再進行染色。 染液的種類及染色原理 注意 ： 蛋白質(zhì)和氨基酸都是兩性電解質(zhì)，要求 染液的 pH值 。瑞氏染色，染色時間短，但染色效果不如吉氏穩(wěn)定，主要在門診量大的門診實驗室使用。 。 ：制片染色和鏡檢讀片。 熟練工作者的推片姿勢 血膜的制作 （涂片操作） 涂制厚 、 薄血膜的位置 通常將厚 、 薄血膜涂在一張載玻片上 。 血膜的制作 用于檢查瘧原蟲的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜狀，稱 薄血膜 ；一種是血液涂成圓