薄層色譜法概述ppt課件(存儲(chǔ)版)
【正文】 k2， k為 k1和 k2的平均值 ? 由上式可見， R取決于三個(gè)因子： ?理論塔片 n主要是吸附劑性質(zhì)的函數(shù) ??k 反映了兩種溶質(zhì)的平均遷移速度，其由流動(dòng)相溶劑強(qiáng)度 ?? 決定 ? ?取決于吸附劑和流動(dòng)相的組成 n2022/5/31 29 ? 溶劑優(yōu)化規(guī)則： ? 增加溶劑強(qiáng)度 ，使 Rf值增大，但也可能降低分離能力。這種影響一般使分配系數(shù)變小。尤其是使用混合溶劑時(shí)，極性較弱和沸點(diǎn)較低的溶劑，在薄層邊緣容易揮發(fā)，使邊緣部分的展開劑中極性溶劑的比例增大， Rf相對(duì)增大。 近表面 遠(yuǎn)表面 光（ I） 鏡反射或表面反射 Is(表面平滑 ) 漫反射 (表面粗糙 ) 入射強(qiáng)度 I0 出射強(qiáng)度 (IT ) IT / I0為薄層透射率 AT 返回光強(qiáng) (IR ) IR / I0為介 質(zhì)的漫反射率AR I0 （ IR + IT ） =差為被介質(zhì)吸收并轉(zhuǎn)換為熱的光強(qiáng) 2022/5/31 37 ? 光學(xué)系統(tǒng) ? 薄層色譜掃描儀光學(xué)系統(tǒng)有三種 ? 單光束單波長 ——受光源穩(wěn)定性和薄層質(zhì)量影響嚴(yán)重。光束固定，掃描板臺(tái)運(yùn)動(dòng)。為消除激發(fā)光的影響，在板層和檢測器之間必須加一塊濾光片，以截去反射激發(fā)光，只讓發(fā)射的熒光抵達(dá)檢測器。在理論曲線上選擇吸光度 0 – 1之間的 7個(gè)點(diǎn)，將各吸光度值轉(zhuǎn)換為直線上的值，得到一條通過原點(diǎn)的直線。 ?可用于定性的板上反應(yīng)有：乙?；饬蛩崦撍?、偶氮化、酯化、鹵化、酸堿水解、硝化、氧化還原、熱解和光化學(xué)反應(yīng)等。 ? 線性與范圍 ——相應(yīng)于待測組分檢出量的20% 120%范圍。 ? 含量測定 ——主要用于中藥有效成分的分析 2022/5/31 56 ?雜質(zhì)檢查方法 ?雜質(zhì)對(duì)照品法（ A） ?供試品自身對(duì)照法（高低濃度法）（ B） ?對(duì)照物質(zhì)法（ C） 樣 對(duì) 樣 對(duì) 樣 對(duì) A B C 2022/5/31 57 完 。 ?目測法 ——比較系列標(biāo)準(zhǔn)與樣品的斑點(diǎn)面積大小、顏色深淺，得到樣品的含量范圍。 2022/5/31 49 定性、定量方法 ? 定性方法 ?利用保留值 ?測定 Rf值 ?測定相對(duì) Rf值，即 Rx值。即物質(zhì)濃度越大，薄層試樣板上測定的反射吸光度比直線關(guān)系所示值越低。適合于本身有顏色或有紫外吸收的物質(zhì)。反射吸收度與物質(zhì)含量有確定關(guān)系，可進(jìn)行定量。 ? 薄層色譜定量測定的光學(xué)方法是基于測量斑點(diǎn)和薄層空白處光學(xué)響應(yīng)信號(hào)的差值。 ? 預(yù)吸附還可能影響 Rf在 離。當(dāng)然，對(duì)于這一問題實(shí)際上只是在定量斑點(diǎn)濃度時(shí)才需要考慮。要求操作格外小心，同時(shí)混合流動(dòng)相不應(yīng)重復(fù)使用。溶質(zhì)的 Rf值就越大。同時(shí)對(duì)相鄰的兩個(gè)斑點(diǎn)，假定 W1=W2=W ?則 R= L。 2022/5/31 17 薄層色譜參數(shù) ? 保留參數(shù)（ Rf值） ?用來表征斑點(diǎn)位置的基本參數(shù)是保留因子，通常稱作 比移值 ，用 Rf表示。 ? 鍥尖技術(shù) ——圓形離心展開具有分辨率高的優(yōu)點(diǎn)，但需要有一定的儀器裝置。 ?多次展開 ——一次展開未達(dá)滿意分離時(shí)，可將薄層板干燥后再次用同一種溶劑展開，可重復(fù)多次，直到混合物分離為止。 ?點(diǎn)樣量應(yīng)適中，過載會(huì)引起斑點(diǎn)拖尾，分離度變差，以最小檢測量的幾倍 ～ 幾十倍為宜。例 硅膠 HF254 2022/5/31 9 ? 薄層板涂鋪要求：均勻、平整、無氣泡引起的凹坑和龜裂。沒有黏結(jié)劑的吸附劑以字母“ H”表示。 2022/5/31 5 薄層色譜系統(tǒng) ? 薄層板 ?未改性固定相 ?硅膠 —為使用最廣泛的薄層材料 ?氧化鋁 —有堿性、中性、酸性 ?硅藻土 —為化學(xué)中性吸附劑 ?纖維素 —天然多糖類 ?聚酰胺 —為特殊類型有機(jī)薄層材料，對(duì)能形成氫鍵的物質(zhì)有特別的選擇性。 80年代以后發(fā)展了薄層色譜光密度掃描儀，和各步操作的儀器化，并實(shí)現(xiàn)了計(jì)算機(jī)化。 ? 70年代中后期發(fā)展了高效薄層色譜。 ?HPLC—— 顆粒物質(zhì)、腐蝕性物質(zhì)、不可逆吸附物質(zhì)均有大的影響。 ?黏結(jié)劑 ?無機(jī)黏結(jié)劑 ——石膏 （硫酸鈣），添加石膏的吸附劑以字母“ G”表示。 ?含有熒光指示劑的商品吸附劑以“ F”表示，并以下標(biāo)注明其激發(fā)光波長。 ?采用多次點(diǎn)加法，第二次點(diǎn)加時(shí)應(yīng)待前一次點(diǎn)加的溶劑揮發(fā)后再進(jìn)行。展開距離一般為 1015cm。該技術(shù)主要用于制備色譜。用針頭將斑點(diǎn)標(biāo)記下來，放在通風(fēng)處使碘揮發(fā)。 ?塔片高度 h真實(shí) = Ls/ n真
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1