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分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目三(存儲(chǔ)版)

2025-05-07 03:16上一頁面

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【正文】 蠅”。長角果線形,長1~。5)DNA中含有多糖或鹽類 將DNA用100%的乙醇或異丙醇沉淀出來,離心,沉淀用70%的乙醇清洗兩次獲更多次,吹干后重溶于TE中(注意乙醇一定要吹干,否則電泳點(diǎn)樣時(shí),樣品上漂)。1OD260=50μg/mL雙鏈DNA或40μg/mL單鏈DNA。將吸附柱CB3置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。3) 加入700μL氯仿,充分混勻,12000rpm(13,400хg)離心5分鐘。6 加等體積的酚/氯仿混勻,12000 r/min離心5min,取上清。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液經(jīng)乙醇沉淀。EDTA抑制DNA酶的活性。5 降上清液轉(zhuǎn)移到另一50mL的離心管中。2) 將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有700μL65℃預(yù)熱緩沖液GP1的離心管中(實(shí)驗(yàn)前在預(yù)熱的GP1加入巰基乙醇,%),迅速顛倒混勻后,將離心管放在65℃水浴中20分鐘,水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數(shù)次。9) 將吸附柱CB3放回廢液收集管中,12000rpm(13,400хg)離心2分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。其中260 nm的讀數(shù)用來估計(jì)樣品中DNA的濃度,OD260/ OD280與OD260/ OD230 的值用于估計(jì)DNA的純度,310 nm為背景吸收值。為防止此情況出現(xiàn),可在加入2CTAB的同時(shí)加入25%的β巰基乙醇,或者加入亞精胺()。總狀花序頂生,花瓣4片,白色,匙形。例如用含殺草劑的培養(yǎng)基來篩選,一般獲得抗殺草劑的突變
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