微生物工程第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)(存儲版)
【正文】 活力強(qiáng)，菌體濃度相對較大，但是最終由實(shí)驗(yàn)結(jié)果定。 ? 縮短發(fā)酵時間 ? 有利于獲得好的發(fā)酵結(jié)果 菌絲體比孢子要有利： 培養(yǎng)基選擇的原則 目的：獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的菌體，因此培養(yǎng)基的選擇應(yīng)首先考慮的是有利于孢子的發(fā)育和菌體的生長，所以營養(yǎng)要比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。 起始接種物的傳代問題 ? 細(xì)菌 保藏斜面 → 活化斜面 ? 產(chǎn)孢子 保藏 → 母斜面 → 子斜面 目的 ：使菌種的傳代次數(shù)盡可能的少。 這些純種培養(yǎng)物稱為種子 。 回復(fù)突變 ： 高產(chǎn)菌株在傳代的過程中 ， 由于自然突變導(dǎo)致高產(chǎn)性狀的丟失 ， 生產(chǎn)性能下降 ， 這種情況我們稱為回復(fù)突變 問題： 高產(chǎn)菌株是正突變高，還是負(fù)突變高？ 自然選育操作步驟： 一般習(xí)慣上將自然選育稱為菌種的分離純化 。 如多糖產(chǎn)生菌在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上生長 ， 從具有粘液性的菌落外觀上就可以初步識別 。第一章：菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ? 微生物工業(yè)用菌種 ? 種子擴(kuò)大培養(yǎng) ? 影響種子質(zhì)量的主要因素 第一節(jié) 微生物工業(yè)用菌種 一、微生物的特性 ? 有些微生物能在厭氧的條件下生長 ? 有些微生物能夠利用簡單的有機(jī)物和無機(jī)物滿足自身 的生長 ? 有些微生物能進(jìn)行復(fù)雜的代謝 ? 有些微生物能利用較復(fù)雜的化合物 ? 有些微生物能在極端的環(huán)境下生長 二、 工業(yè)化菌種的要求 ? 能夠利用廉價的原料，簡單的培養(yǎng)基，大量高效地合成 產(chǎn)物 ? 有關(guān)合成產(chǎn)物的途徑盡可能地簡單，或者說菌種改造的 可操作性要強(qiáng) ? 遺傳性能要相對穩(wěn)定 ? 不易感染它種微生物或噬菌體 ? 產(chǎn)生菌及其產(chǎn)物的毒性必須考慮（在分類學(xué)上最好與致病 菌無關(guān)） ? 生產(chǎn)特性要符合工藝要求 放線菌（鏈霉素四環(huán)素；紅霉素等） 真菌（青霉素、頭孢等） 一些產(chǎn)芽孢的細(xì)菌 植物或動物來源 抗生素生產(chǎn)有關(guān)的微生物 抗生素是次級代謝產(chǎn)物，需要生物體進(jìn)行復(fù)雜的代謝，目前發(fā)現(xiàn)的生物來源如下： 三、已工業(yè)化產(chǎn)品生產(chǎn)菌的介紹 氨基酸生產(chǎn)有關(guān)的微生物 代謝控制發(fā)酵 ： 用 人工誘變的方法 ，有意識地改變微生物的代謝途徑，最大限度地積累產(chǎn)物，這種發(fā)酵形象地稱為代謝控制發(fā)酵，最早在氨基酸發(fā)酵中得到成功應(yīng)用。 菌落的選出 ? 從產(chǎn)物角度出發(fā) 在培養(yǎng)時以產(chǎn)物的形成有目的的設(shè)計培養(yǎng)基 利用簡單 、 快速的鑒定方法 ， 如抗生素 （ P35） ? 從形態(tài)的角度 菌落的外觀形態(tài) ， 是微生物的一個重要表征 。 自然選育 自然選育在工業(yè)生產(chǎn)上的意義 自然選育雖然突變率很低 ， 但卻是工廠保證穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要措施 。 ?斜面低溫保藏法 （ 如 酵母菌 ） ?石蠟油封保藏法 （ 如 酵母菌 ） ?砂土保藏法 （ 如放線菌 ） ?硅膠保藏法 ?冷凍干燥保藏法 （ 如一般細(xì)菌 ） ?液氮超低溫凍結(jié)法（如真菌） （ 二 ） 、 防止菌種衰退的措施 （ 1） 、 菌種的衰退 ?發(fā)酵力的下降 ?繁殖力的下降 ?發(fā)酵產(chǎn)品的得率降低 （ 2） 、 衰退的原因 ?菌種保藏不妥 ?菌種生長的要求沒有得到滿足 遇到不利的條件 失去某些必要的條件 ?發(fā)生回復(fù)突變 （ 3） 、 防止衰退的方法 ?做好菌種的保藏工作 ?盡可能滿足生長條件 ?盡量減少傳代次數(shù) （ 4） 、 菌種的分離復(fù)壯 ?普通方法：稀釋平板法或平板劃線法分離單細(xì)胞菌落 ?芽孢桿菌：先將菌液沸水處理數(shù)分鐘 ， 再用平板進(jìn)行分離 ?改變培養(yǎng)條件：如單細(xì)胞分離仍效果不佳，可考慮改變培養(yǎng)溫度條件，以利高產(chǎn)菌株生長而不利低產(chǎn)菌株生長 返回 第二節(jié) 種子的擴(kuò)大培養(yǎng) 種子擴(kuò)大培養(yǎng)的目的與要求 工業(yè)微生物的培養(yǎng)類型 種子制備的技術(shù)概要及種子制備實(shí)例 影響種子質(zhì)量的因素 種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管 、 冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后 ， 再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級擴(kuò)大培養(yǎng) ,最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程 。 在原料方面，實(shí)驗(yàn)室種子培養(yǎng)階段，規(guī)模一般
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