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微生物工程第一章菌種與種子擴大培養(yǎng)(存儲版)

2025-02-12 23:42上一頁面

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【正文】 活力強,菌體濃度相對較大,但是最終由實驗結果定。 ? 縮短發(fā)酵時間 ? 有利于獲得好的發(fā)酵結果 菌絲體比孢子要有利: 培養(yǎng)基選擇的原則 目的:獲得一定數(shù)量和質量的菌體,因此培養(yǎng)基的選擇應首先考慮的是有利于孢子的發(fā)育和菌體的生長,所以營養(yǎng)要比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。 起始接種物的傳代問題 ? 細菌 保藏斜面 → 活化斜面 ? 產孢子 保藏 → 母斜面 → 子斜面 目的 :使菌種的傳代次數(shù)盡可能的少。 這些純種培養(yǎng)物稱為種子 。 回復突變 : 高產菌株在傳代的過程中 , 由于自然突變導致高產性狀的丟失 , 生產性能下降 , 這種情況我們稱為回復突變 問題: 高產菌株是正突變高,還是負突變高? 自然選育操作步驟: 一般習慣上將自然選育稱為菌種的分離純化 。 如多糖產生菌在適當?shù)呐囵B(yǎng)基上生長 , 從具有粘液性的菌落外觀上就可以初步識別 。第一章:菌種與種子擴大培養(yǎng) ? 微生物工業(yè)用菌種 ? 種子擴大培養(yǎng) ? 影響種子質量的主要因素 第一節(jié) 微生物工業(yè)用菌種 一、微生物的特性 ? 有些微生物能在厭氧的條件下生長 ? 有些微生物能夠利用簡單的有機物和無機物滿足自身 的生長 ? 有些微生物能進行復雜的代謝 ? 有些微生物能利用較復雜的化合物 ? 有些微生物能在極端的環(huán)境下生長 二、 工業(yè)化菌種的要求 ? 能夠利用廉價的原料,簡單的培養(yǎng)基,大量高效地合成 產物 ? 有關合成產物的途徑盡可能地簡單,或者說菌種改造的 可操作性要強 ? 遺傳性能要相對穩(wěn)定 ? 不易感染它種微生物或噬菌體 ? 產生菌及其產物的毒性必須考慮(在分類學上最好與致病 菌無關) ? 生產特性要符合工藝要求 放線菌(鏈霉素四環(huán)素;紅霉素等) 真菌(青霉素、頭孢等) 一些產芽孢的細菌 植物或動物來源 抗生素生產有關的微生物 抗生素是次級代謝產物,需要生物體進行復雜的代謝,目前發(fā)現(xiàn)的生物來源如下: 三、已工業(yè)化產品生產菌的介紹 氨基酸生產有關的微生物 代謝控制發(fā)酵 : 用 人工誘變的方法 ,有意識地改變微生物的代謝途徑,最大限度地積累產物,這種發(fā)酵形象地稱為代謝控制發(fā)酵,最早在氨基酸發(fā)酵中得到成功應用。 菌落的選出 ? 從產物角度出發(fā) 在培養(yǎng)時以產物的形成有目的的設計培養(yǎng)基 利用簡單 、 快速的鑒定方法 , 如抗生素 ( P35) ? 從形態(tài)的角度 菌落的外觀形態(tài) , 是微生物的一個重要表征 。 自然選育 自然選育在工業(yè)生產上的意義 自然選育雖然突變率很低 , 但卻是工廠保證穩(wěn)產高產的重要措施 。 ?斜面低溫保藏法 ( 如 酵母菌 ) ?石蠟油封保藏法 ( 如 酵母菌 ) ?砂土保藏法 ( 如放線菌 ) ?硅膠保藏法 ?冷凍干燥保藏法 ( 如一般細菌 ) ?液氮超低溫凍結法(如真菌) ( 二 ) 、 防止菌種衰退的措施 ( 1) 、 菌種的衰退 ?發(fā)酵力的下降 ?繁殖力的下降 ?發(fā)酵產品的得率降低 ( 2) 、 衰退的原因 ?菌種保藏不妥 ?菌種生長的要求沒有得到滿足 遇到不利的條件 失去某些必要的條件 ?發(fā)生回復突變 ( 3) 、 防止衰退的方法 ?做好菌種的保藏工作 ?盡可能滿足生長條件 ?盡量減少傳代次數(shù) ( 4) 、 菌種的分離復壯 ?普通方法:稀釋平板法或平板劃線法分離單細胞菌落 ?芽孢桿菌:先將菌液沸水處理數(shù)分鐘 , 再用平板進行分離 ?改變培養(yǎng)條件:如單細胞分離仍效果不佳,可考慮改變培養(yǎng)溫度條件,以利高產菌株生長而不利低產菌株生長 返回 第二節(jié) 種子的擴大培養(yǎng) 種子擴大培養(yǎng)的目的與要求 工業(yè)微生物的培養(yǎng)類型 種子制備的技術概要及種子制備實例 影響種子質量的因素 種子擴大培養(yǎng)是指將保存在砂土管 、 冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產菌種接入試管斜面活化后 , 再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級擴大培養(yǎng) ,最終獲得一定數(shù)量和質量的純種過程 。 在原料方面,實驗室種子培養(yǎng)階段,規(guī)模一般
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