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正文內(nèi)容

常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 凍真空干燥法 ( 1)凍干管的準(zhǔn)備:中性硬制玻璃,烘干,滅菌。根據(jù)細(xì)菌個(gè)體形態(tài)觀察的不同要求,可將染色分為 3種類型:簡(jiǎn)單染色、鑒別染色、特殊染色。由于孢子的存在使菌落表面呈干粉狀。菌落形態(tài)較大,質(zhì)地疏松,顏色各異,有絲狀、絨毛狀或蜘蛛網(wǎng)狀的菌絲體。因莢膜薄,且易變形,所以不能用加熱法固定。菌絲呈管狀,有的有橫隔將菌絲分割為多細(xì)胞(如青霉、曲霉),有的菌絲沒有橫隔(如毛霉、根霉)。菌絲呈各種顏色,有的能分泌水溶性色素到培養(yǎng)基內(nèi)。菌落特征與組成菌落的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)狀況、排列方式、好氣性和運(yùn)動(dòng)性直接相關(guān)。 此法多用于產(chǎn)芽孢的細(xì)菌 、 產(chǎn)生孢子的霉菌和放線菌 。 烘干后碾碎 , 用 100目篩子過篩 , 粗顆粒部分丟掉 。 液體石蠟保藏法 將無菌石蠟加在已長(zhǎng)好菌的斜面上,其用量以高出斜面頂端 1CM為準(zhǔn),使菌種與空氣隔絕。注意控制降溫速率及保護(hù)劑的使用。 可用膠塞代替棉塞或在斜面上覆蓋一層無菌液體石蠟來進(jìn)一步延長(zhǎng)保存期。 制備污水稀釋液: 10g土樣 , 加入 90ml無菌水中 ,在三角瓶中振搖 20min。 注意事項(xiàng):對(duì)眼睛和皮膚有刺激作用。需 大量無菌空氣以及凈化工作臺(tái)。 徹底滅菌則采用間歇滅菌方法 。 ; 3) 物品不能太擠; 4) 溫度降至 70176。 方法: 一、物理的方法:加熱、過濾、輻射 二、化學(xué)的方法:用化學(xué)試劑抑制或殺滅微生物。實(shí)驗(yàn)一 、 常用培養(yǎng)基的制備 、 滅菌與消毒 營(yíng)養(yǎng):從外部環(huán)境攝取其生命活動(dòng)所必需的能量和物質(zhì) , 滿足生長(zhǎng)和繁殖需要的一種生理過程 。 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則 、 方法 及制備過程: 原則:目的明確 、 營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào) 、 經(jīng)濟(jì)節(jié)約 物理化學(xué)條件適宜 方法:生態(tài)模擬 、 查閱文獻(xiàn) 精心設(shè)計(jì) 、 試驗(yàn)比較 步驟:稱量 、 熔化 、 調(diào) PH、 過濾 、 分裝 、 加塞 、 包扎 、 滅菌 、 冷卻 、 無菌檢查 培養(yǎng)基種類: 一 、 按成分的不同分 天然培養(yǎng)基 、 合成培養(yǎng)基 、 半合成培養(yǎng)基 二 、 按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分 固體培養(yǎng)基 、 液體培養(yǎng)基 、 半固體培養(yǎng)基 三 、 按培養(yǎng)基用途 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 、 選擇培養(yǎng)基 加富培養(yǎng)基 、 鑒別培養(yǎng)基 消毒與滅菌 消毒:消滅病原菌和有害微生物的營(yíng)養(yǎng)體 滅菌:殺滅一切微生物的營(yíng)養(yǎng)體 , 芽胞和孢子 。 注意事項(xiàng): 1) 培養(yǎng)基、橡膠制品、塑料制品不能用此法; 2) 溫度控制在 180176。 常壓蒸汽滅菌 : 對(duì)于不宜用高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基如明膠培養(yǎng)基 、 牛乳培養(yǎng)基 , 含糖培養(yǎng)基
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