【正文】 Magics 公司的開(kāi)發(fā)的 AMI227（ Ferumoxtran）和 Nyed 公司開(kāi)發(fā)的 FeOBPA 就屬于這類制劑，前者平均直徑只有 4nm~6nm，后者顆粒更小。靜注后 2h，肝臟含量達(dá)最高值，約為 89%[26]。 SHU555A 的常規(guī)臨床劑量非常小， 8μ mol Fe/kg 就可滿足診斷需要，臨床試驗(yàn)表明，在 SHU555A 的用藥過(guò)程及用藥后，沒(méi)有明顯的疼痛或其它不適癥狀，也未見(jiàn)明顯的心血管毒性。常見(jiàn)的順磁性 MR 對(duì)比劑如 GdDTPA，由于含有不成對(duì)電子（在釓原子的外層軌道上），通過(guò)質(zhì)子 /偶極子 電子 /偶極子的相互作用，可使局部磁場(chǎng)波動(dòng)增強(qiáng)，使質(zhì)子弛豫增強(qiáng)，結(jié)果造成組織的弛豫時(shí)間縮短。 良性肝臟腫瘤（如局灶性結(jié)節(jié)增生和肝細(xì)胞腺瘤）由于含有吞噬細(xì)胞或血池（血管瘤），也可引起 T2WI腫瘤信號(hào)減弱，從而可與惡性腫瘤的高信號(hào)相區(qū)別 [29]。 SHU 555A 濃度越高，肝實(shí)質(zhì)信號(hào)的強(qiáng)度下降就越顯著，門脈系統(tǒng)的對(duì)比度就越大，其中以門 脈左主支表現(xiàn)最為明顯。要實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)，可減小氧化鐵核心的粒度，而氧化鐵核心的變小，又將導(dǎo)致更可觀的 T1 縮短作用，使之更加適用于MRA。 另外，用磁性納米粒制備的免疫磁性微球 在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用也非常廣泛，而且發(fā)展較快，國(guó)外已有產(chǎn)品上市。間接法是指先將細(xì)胞與特異抗體混合培養(yǎng)，使特異抗體結(jié)合在細(xì)胞表面，然后加入預(yù)先用抗鼠IgG（二抗）處理的磁性微球。 FACS 價(jià)格昂貴，技術(shù)復(fù)雜，經(jīng)常會(huì)被所分選細(xì)胞的容量、活性、無(wú)菌度等問(wèn)題所困擾；紅細(xì)胞花 環(huán)技術(shù)無(wú)法處理大量的細(xì)胞，另外，至今尚無(wú)一成熟、簡(jiǎn)便的方法能夠?qū)⒖贵w偶聯(lián)至紅細(xì)胞膜上； Panning 技術(shù)也有很多局限性，它難于放大操作，步驟煩瑣，不能定量，靶細(xì)胞經(jīng)常混雜著非特異吸附在培養(yǎng)板底部的其它細(xì)胞。 (1) 純化 DNA 結(jié)合蛋白 連接有特異核苷酸序列的親和磁珠與樣品反應(yīng)，提取出結(jié)合蛋白，再加入高鹽溶液就可以將純化蛋白洗脫下來(lái)，磁珠可以反復(fù)使用。用此方法從人染色體克隆人類阿樸脂蛋白 E 基因片斷，可以獲得 90％以上的正確重組體。免疫磁 珠技術(shù)有很多優(yōu)點(diǎn)：將靶細(xì)菌從環(huán)境中分離出來(lái)，從很大的體積濃集至適于培養(yǎng)的體積；將樣品中的生長(zhǎng)抑制因子從細(xì)菌中清除去，有利于細(xì)菌的生長(zhǎng)；當(dāng)樣品中既有病原菌，又有大量非致病性變種時(shí)，選擇性培養(yǎng)基在分離靶生物時(shí)經(jīng)常無(wú)能為力，而免疫磁珠在選擇性分離擁有與致病力有關(guān)的特異抗原決定族的菌種方面具有很大的潛力。影響 PCR 直接應(yīng)用于臨床診斷的一個(gè)因素是樣品，如糞便和血液中的某些成分會(huì)影響 Taq 酶的靈敏度。運(yùn)用這種技術(shù)可以省略去通常為排除背景干擾所要 進(jìn)行的電泳、內(nèi)切酶譜、雜交等步驟。因此，在體外清除骨髓中的癌細(xì)胞是保證 ABMT 成功的必要條件。 1984 年， Treleaven 等人建立了運(yùn)用 IMMS 從骨髓中清除癌細(xì)胞的模型系統(tǒng)。 (2) 用于清除淋巴瘤細(xì)胞 De Rosa 等人將 IMMS 應(yīng)用于 2 例淋巴瘤病人的自身骨髓移植。能夠可重現(xiàn)地清除 3~4 個(gè)對(duì)數(shù)級(jí)的惡性細(xì)胞，此結(jié)果與應(yīng)用 Burkitt 淋巴瘤的補(bǔ)體溶 解方法所得類似。自身骨髓移植后，在 3 例病人中都能觀測(cè)到血相重建。 246 Gruhn、 Trickettti 等人也對(duì) IMMS 在急性淋巴細(xì)胞 性白血病中的應(yīng)用進(jìn)行了探討。 Vartdal 等對(duì)直接 T 細(xì)胞清除法作了改進(jìn)，磁珠 首先與羊抗鼠 IgG 相聯(lián)，然后再與抗 CD2 和 CD3 的單克隆抗體結(jié)合。如 Smeland 等采用直接聯(lián)有抗 CD34+細(xì)胞的單克隆抗體的免疫磁珠來(lái)分離干細(xì)胞，分離后用抗 Fab 段血清將磁珠從細(xì)胞上洗脫下來(lái)，用此方法可以獲得 40%~70％的 CD34+細(xì)胞，純度可達(dá) 95％以上。 Brinchmann 等設(shè)計(jì)了一種快速、 247 直接從血中定量各個(gè)淋巴細(xì)胞亞類絕對(duì)數(shù)目的方法。 Ossendorp 等用聯(lián)有 Thyroglobulin 的免疫磁珠來(lái)與 B 細(xì)胞雜交瘤系形成花環(huán)， Throglobulin 特異細(xì)胞濃集了 300 倍。調(diào)節(jié)磁場(chǎng)至一個(gè)合適的強(qiáng)度，使洗滌液自由流下的同時(shí)磁珠及其吸附物維持于瓶中。 Hardingham 等發(fā)展了用 IMBPCR 來(lái)檢測(cè)血液中癌細(xì)胞的技術(shù)。 248 磁性脂質(zhì)體作為基因輸送的載體 隨著人類基因組計(jì)劃的初步完成，基因治療漸漸走進(jìn)了臨床應(yīng)用，使得基因的輸送變成了無(wú)法回避的問(wèn)題。徐慧顯等 [36]用葡聚糖磁性納米粒作為天冬酰胺酶的載體，使固定化天冬酰胺酶在制備過(guò)程中可用磁場(chǎng)分離；并能像自由酶那樣腹膜注射；有可能延長(zhǎng)其載體循環(huán)中的半衰期。 參考文獻(xiàn) 1 Gregoriadis G, Senior J, Trouet A. Targeting of Drugs. New York : Plenum Press, 1982 2 張津輝，蔣中華，王仁芝，陳惠鵬．磁性微球的制備、理化性質(zhì)及初步應(yīng)用．化學(xué)通報(bào)， 1997，9： 55~57 249 3 張陽(yáng)德，彭 ?。d阿霉素磁性白蛋白納米粒 —— 種高效靶向抗腫瘤系統(tǒng)．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2022， 11（ 3）： 39~42 4 石可瑜，李朝興，何炳林．磁導(dǎo)向阿霉素 —— 羧甲基葡聚糖磁性納米粒的研究．生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志， 2022， 17（ 1）： 21~24 5 常 津．具有復(fù)合靶向抗癌功能的納米高分子材料 —— 阿霉素免疫磁性納米粒的制備及體外試驗(yàn)．中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào)， 1996， 15（ 2）： 97~101 6 奚念珠主編．藥劑學(xué)（第三版）．北京：人民衛(wèi)生出版社， P372 7 Kiwada H, Sato J, Yamada S, et al. Feasibility of magic lipsomes as a targeting device for drugs. Chem. Pharm. Bull., 1986, 34(10): 4253~4258 8 Viroonchatapan E, Ueno M, Sato H, et al. Preparation and characterization of dextran magiteincorporated thermosensitive liposomes: an online flow system of quantifying magic responsiveness. Pharm. Res., 1995, 12(8): 1176~1183 9 Viroonchatapan E, Sato H, Ueno M, et al. Magic targeting of thermosensitive magoliposomes to mouse tumors in an in situ online perfusion system. Life Sciences, 1996, 158(24): 2251~2261 10 Margel S, Kreuter J. Polyacrolein microspheres as a new tool in 。 磁性納米粒的其它應(yīng)用 磁性納米粒也可以用來(lái)固定化酶，例如已知大腸桿菌天冬酰胺酶對(duì)急性淋巴白血病有明顯療效，注射入體內(nèi)后，可迅速清除血清中的天冬酰胺 — 敏感性腫瘤細(xì)胞的必需營(yíng)養(yǎng)成分。 KaplanMeier 分析表明血液中 Kras 突變細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果與無(wú)病存活期顯著相關(guān)（ p）。 Ohashi 等則用免疫磁珠進(jìn)行了分離頂體反應(yīng)精于的嘗試。應(yīng)用免疫磁珠技術(shù)則可避免這類缺陷。這項(xiàng)技術(shù)可以用來(lái)生產(chǎn)人單克隆抗體。在磁珠上連接抗人多態(tài)型 HLA 決定族，通過(guò)評(píng)價(jià)細(xì)胞和磁珠之間形成花環(huán)的程度來(lái)直接進(jìn)行分型?？梢垣@得不到 2％的細(xì)胞，但其中保留了所有原先存在的造血干細(xì)胞。 免疫磁性微球用于骨髓中癌細(xì)胞的清除也有一些缺點(diǎn)，主要是在方法學(xué)、靶細(xì)胞種類、檢測(cè)方法的靈敏度等方面變異性較大，但仍不失為一種安全、簡(jiǎn)便、有效的方法。單核細(xì)胞與 CFUGH 在免疫磁性凈化后的恢復(fù)率分別為 40％和 45％，在 Maphosphamide 凈化后恢復(fù)率分別為 84％和 5％。免疫磁性處理過(guò)程為自身骨髓與連接在磁性微球上的一組單抗一起培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)證明，應(yīng)用免疫磁性微球在自身骨髓移植前清除癌細(xì)胞是一種安全、簡(jiǎn)單、可重復(fù)的技術(shù)。而對(duì)正常細(xì)胞的損害極小，通過(guò)分離裝置后，細(xì)胞的活性超過(guò)了 98％。如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤、小細(xì)胞肺癌、乳腺癌等 [33]。最近，朋 MT 用于小細(xì)胞肺癌、睪丸癌和乳腺癌也取得了令人鼓舞的結(jié)果。 Grindede 等則將免疫磁珠和反轉(zhuǎn)錄 PCR(RTPCR)結(jié)合起來(lái)用以檢測(cè)環(huán)境樣品中的 A 型反轉(zhuǎn)錄病毒。 Ben 等則對(duì)用 IMBELISA 分離檢測(cè)食品中的大腸桿菌 O157 進(jìn)行了評(píng)價(jià)。過(guò)程一般是將免疫磁珠與樣品混合，培養(yǎng) l0min~30min，外加磁場(chǎng)提取結(jié)合 244 有活微生物的磁珠。已經(jīng)應(yīng)用于巨細(xì)胞病毒、沙眼衣原體、惡性瘧原蟲(chóng)、 HIVl 型病毒，人類基因等。為將生物素插入 DNA 鏈中，可以來(lái)用生物素化的引物或用 Klenow 聚合酶和生物素化的核苷酸進(jìn)行末端標(biāo)記。一般有三類不同的方法， 243 即流式細(xì)胞儀技術(shù)（ FACS）、表面聯(lián)上二抗的異體紅細(xì)胞花環(huán)技術(shù)、將抗體被動(dòng)吸附在聚苯乙烯組織培養(yǎng)板上的 Panning 技術(shù)。 IMM 與細(xì)胞的結(jié)合可以采取兩種方法，直接法和間接法。用脂質(zhì)體包裹的超順磁性氧化鐵納米粒，可應(yīng)用于鑒別淋巴結(jié)反應(yīng)性增生和腫瘤轉(zhuǎn)移， 同時(shí)脂質(zhì)膜上結(jié)合特定的功能團(tuán)可使脂質(zhì)體包裹的造影劑成為靶向造影劑，如含乳糖基?；拾贝嫉闹|(zhì)體可用于肝細(xì)胞靶向給藥，含聚乙烯二醇醚的脂質(zhì)體可靶向于梗塞心肌等。在動(dòng)物模型上把 FeOBPA應(yīng)用于腹部血管的 MRA，結(jié)果證明在普通場(chǎng)強(qiáng)下 FeOBPA 就可進(jìn)行 MRA。有人用 SHU 555A 在 48 位病人身上進(jìn)行了臨床試驗(yàn)，結(jié)果表明，靜注 SHU 555A 明顯改善了門脈系統(tǒng)的顯示，三級(jí)分支的顯示率從增強(qiáng)前的 %上升到增強(qiáng)后的 %。 有人 [27]在 場(chǎng)強(qiáng)下，對(duì) 15 例肝轉(zhuǎn)移瘤用 AMI25 進(jìn)行增強(qiáng)掃描，結(jié)果與增強(qiáng)前的 MR 圖像相比，檢出病灶的數(shù)量增加了 16 倍，檢出病灶的最小直徑也從增強(qiáng)前的 下降到 ，效果非常明顯。 總體上講， SPIOs 和 USPIOs 是兩類安全性較高的 MR 對(duì) 比劑。 從目前臨床應(yīng)用來(lái)看，超順磁性氧化鐵的臨床應(yīng)用劑量都遠(yuǎn)小于其最低中毒劑量。 超順磁性氧化鐵的粒徑大小對(duì)其進(jìn)入網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的部位有較大影響，一般直徑較大的 SPIOs 主要為肝、脾的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)所攝入。 AMI25 在美國(guó)、歐洲及日本等國(guó)已完成臨床試 驗(yàn)，已有商品出售，國(guó)內(nèi)現(xiàn)也有部分地區(qū)在臨床上使用。 SPIO 的基本結(jié)構(gòu)是以氧化鐵顆粒為核芯，外包裹葡聚糖等，以使其更好地分散，直徑一般在 nm 數(shù)量級(jí)。 磁性納米粒在臨床磁共振成像中的應(yīng)用 氧化鐵納米粒本身可以沒(méi)有磁性，當(dāng)在外加磁場(chǎng)存在時(shí)，氧化鐵納米粒就可很快產(chǎn)生磁性，而且一旦外加磁場(chǎng)撤消，其磁性又可消失，氧化鐵納米粒的這種性能被稱為超順磁性。通過(guò)磁共振技術(shù)、藥物動(dòng)力學(xué)與組織檢查，表明一半的病人身上磁性納米粒成功地靶向輸送到了腫瘤部位，而且在治療中器官毒性沒(méi)有增加，只有當(dāng)藥物劑量超過(guò) 50mg/m2 時(shí)，有表阿霉素相關(guān)的毒性出現(xiàn)。作者認(rèn)為，這種磁性介導(dǎo)的靶向藥物輸送系統(tǒng)為惡性腫瘤的治療提供了獨(dú)特的方法和手 段，這種治療方式通常不會(huì)產(chǎn)生全身系統(tǒng)的毒性，這種技術(shù)很有可能被用于載帶放射性核素、抗腫瘤抗生素、細(xì)胞因子，甚至用于載帶基因。有人 [18]用 10nm~50nm 的氧化鐵磁性納米粒制備了含 3H 放線菌素 D 的聚氰基丙烯酸烷基酯 NP，其粒徑為 220nm。 磁性納米粒廣泛用作藥物的載體，尤其作為抗癌藥物載體的研究較多。這種構(gòu)想的實(shí)現(xiàn)將降低藥物使用劑量（ Dose of administration）和毒副作用（ Side effects）、提高藥物的治療效率、拓展某些藥物的使用范圍、減輕病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，可以說(shuō)這是治療物質(zhì)使用的又一次革命。 1．化學(xué)穩(wěn)定性 這種穩(wěn)定性一方面包括脂質(zhì)體中孢粉藥物的穩(wěn)定性；另一方面包括脂質(zhì)體的膜材成分磷脂等容易發(fā)生水解和氧化，由于膜材的水解會(huì)使脂質(zhì)體制劑中的酸度升高；磷脂結(jié)構(gòu)中包含不飽和基團(tuán)可以自發(fā)地發(fā)生氧化反應(yīng)，這種氧化反應(yīng)機(jī)制是游離基連鎖反應(yīng)，產(chǎn)生的氧化反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)人體有一定毒性，因此脂質(zhì)體的化學(xué)穩(wěn) 定性著重研究防止和控制脂質(zhì)體氧化的問(wèn)題，以及檢查和評(píng)價(jià)有氧化反應(yīng)產(chǎn)生的有毒的過(guò)氧化物的方法。如以 Cu 為靶源，在 40kV和 35mA 下測(cè)定磁性納米粒的 X 射線衍射圖，然后與 ?三氧化二鐵和四氧化三鐵的標(biāo)準(zhǔn)圖 譜進(jìn)行比對(duì)，判斷磁性納米粒的特征峰是否與 ?三氧化二鐵和四氧化三鐵的特征峰一致，從而確定其結(jié)構(gòu)類型。將每個(gè)吸附的制劑量除以吸附制劑量和未吸附制劑的量的綜合，計(jì)算導(dǎo)向制劑的定位百分率。 磁化強(qiáng)度是評(píng)價(jià)磁性納米粒磁響應(yīng)性的重要指針。 鐵含量的測(cè)定 測(cè)定鐵含量的一般方法包括磺基水楊酸法、鄰二氮菲（菲啶）法和原子吸收分光光度法等。吸附結(jié)合只有在微球具有非常大的表面積時(shí)才有可能比較牢固。 ④ 將磁鐵礦本身作為（亞鐵一過(guò)硫酸）氧化一還原系統(tǒng)的一部分，聚合物可以完全包裹在磁鐵礦周圍。這些骨架材料應(yīng)該性質(zhì)穩(wěn)定、強(qiáng)度較 高、無(wú)毒副作用。但是上述方法對(duì)于 Fe3O4 的包載量?jī)H為 133μ g/mL。此法適合于制備脂溶性蛋白類藥物的脂質(zhì)體。 5．凍融法：先制備未包封藥物