【正文】 Z— DNA。 ②堿基配對(duì)的氫鍵 。 較短的回文序列，可作為一種特別信號(hào)，如限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)。 ADNA也是右手雙螺旋，外形粗短。 如果在繩子一端向松纏方向旋轉(zhuǎn)，再將繩子兩端連接起來(lái)，會(huì)產(chǎn)生一個(gè)右旋的超螺旋，以解除外加的旋轉(zhuǎn)所造成的脅變，這樣的超螺旋稱(chēng)負(fù)超螺旋。 ①拓?fù)洚悩?gòu)酶酶 I（擰緊） 能使雙鏈負(fù)超螺旋 DNA轉(zhuǎn)變成松馳形環(huán)狀 DNA，每一次作用可使 L 值增加 1，同時(shí)，使松馳環(huán)狀 DNA轉(zhuǎn)變成正超螺旋。 146bp 長(zhǎng)度的 DNA雙螺旋盤(pán)繞在八聚體上形成核小體。 如 23S rRNA ，單位離心場(chǎng)中沉降 23 1013 秒 5S rRNA ，單位離心場(chǎng)中沉降 5 1013 秒 三、 tRNA 的結(jié)構(gòu) tRNA約占全部 RNA的 15% 主要功能：在蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸。 PolyA是轉(zhuǎn)錄后，經(jīng) polyA聚合酶添加上， polyA聚合酶對(duì) mRNA專(zhuān)一。 原核 mRNA（多順?lè)醋樱? 原核 mRNA由先導(dǎo)區(qū)、插入序列、翻 譯區(qū)和末端序列組成。 大腸桿菌中有三類(lèi) rRNA（原核） 5S rRNA 16S rRNA 23S rRNA 真核細(xì)胞有四類(lèi) rRNA 5S rRNA rRNA 18S rRNA 28S rRNA 圖 原核核糖體（ rRNA 部分） 圖 真核核糖體（ rRNA部分） P346 圖 514 大腸桿菌 5S rRNA 結(jié)構(gòu) 第四節(jié) 核酸的性質(zhì) 一、 解離性質(zhì) 多聚核苷酸有兩類(lèi)可解離的基團(tuán)：磷酸和堿基能發(fā)生兩性解離。 RNA是 DNA的信使，完成任務(wù)后降解。 變性 （ 1）、 變性： 核酸雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成單鏈，不涉及共價(jià)鍵斷裂。 濃度 50ug/mL時(shí)，雙鏈 DNA A260=，完全變性（單鏈） A260= 當(dāng) A260 增加到最大增大值一半時(shí)，即 時(shí)，對(duì)應(yīng)的溫度即為 Tm。 t 衡量。若這些異源 DNA 之間，在某些區(qū)域有相同的序列，則復(fù)性時(shí)會(huì)形成雜交分子。 去蛋白：鹽酸胍、苯酚等 必須防止 RNA酶對(duì) RNA的 破壞。 BamHI： GGATCC 同裂酶： BstI GGATCC 同尾酶： BclI TGATCA BglII AGATCT MboI GATC Sau3A GATC 星號(hào)活力：在一定條件下（低離子強(qiáng)度，堿性 pH，或 50%甘油），限制酶的特異性降低。 六、 DNA 序列分析 （一） 化學(xué)裂解法（ MaxamGilbert 法） DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定原理： 利用特異性的化學(xué)裂解法，制備出具有同一標(biāo)記末端，而另一端是長(zhǎng)度只差一個(gè)核苷酸的片段群，然后將此片段群在能夠分辨長(zhǎng)度只差一個(gè)核苷酸 DNA片段的 PAGE 上分離。 生物合成：方向 5’ 3’，需模板，引物，用酶。 mRNA易形成局部二級(jí)結(jié)構(gòu)，因此，總 RNA或 mRNA需在變性條件下電泳，乙二醛、甲醛可防止 RNA形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。 BamH： GGATCC 同裂酶 BstI 識(shí)別位點(diǎn)相同，切割位點(diǎn)相同，產(chǎn)生同樣的粘性末端。還可用氯仿異戊醇去除蛋白質(zhì)。 對(duì)于 ， 106bp，濃度達(dá)到 umol/L 級(jí)時(shí)，濃度已很高。 DNA片段越大，復(fù)性越慢； DNA濃度越大，復(fù)性越快。 （ 2）、 熔解溫度（ Tm）或稱(chēng)熔點(diǎn)： DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半時(shí)對(duì)應(yīng)的溫度。 P348 圖 5— 16 CsCl密度梯度離心純化質(zhì)粒 DNA 相對(duì)沉降常數(shù) 線型雙螺旋分子 松馳雙鏈閉環(huán) 切刻雙鏈環(huán) 單鏈環(huán) 線型單鏈 正超或負(fù)超螺旋雙鏈環(huán)狀 坍縮 五、 變性、復(fù)性及雜交 變性、復(fù)性是核酸的重要的物化性質(zhì)，相對(duì)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)，核酸可以耐受反反復(fù)復(fù)的變性、復(fù)性。 DNA、 RNA水解難易程度的不同具有極為重要的生理意義。 五、 rRNA 的結(jié)構(gòu) rRNA占總 RNA的 80%左右。 P346 帽子結(jié)構(gòu) 帽子的功能： 可抵抗 5’核酸外切酶降解 mRNA。 順?lè)醋樱菏怯身樂(lè)丛囼?yàn)所規(guī)定的遺傳單位，相當(dāng)于一種蛋白質(zhì)的基因。 二、 RNA 的類(lèi)型 細(xì)胞中的 RNA，按其在蛋白質(zhì)合成中所起的作用，主要可分為三種類(lèi)型。 組蛋白是富含堿性 (Lys、 Arg)的堿性蛋白質(zhì)，根據(jù) Lys/Arg 比值不同，可分為 HH2A、 H2B、 H H4 五種，均為單鏈蛋白質(zhì)，分子量 1100021000。 負(fù)超螺旋 DNA 是由于兩條鏈的纏繞不足引起，很易解鏈，易于參加 DNA 的復(fù)制、重組和轉(zhuǎn)錄等需要將兩條鏈分開(kāi)才能進(jìn)行的反應(yīng)。 四、 環(huán)狀 DNA 生物體內(nèi)有些 DNA是以雙鏈環(huán)狀 DNA的形式存在，包括： 某些病毒 DNA 某些噬菌體 DNA 某些細(xì)菌染色體 DNA 細(xì)菌質(zhì)粒 DNA 真核細(xì)胞中的線粒體 DNA、葉綠體 DNA 環(huán)形 DNA 的不同構(gòu)象 P340 圖 58 松馳環(huán)、解鏈環(huán)、負(fù)超螺旋 （ 1）、 松弛環(huán)形 DNA 線形 DNA直接環(huán)化 （ 2）、 解鏈環(huán)形 DNA 線形 DNA擰松后再環(huán)化 （ 3）、 正超螺旋與負(fù)超螺旋 DNA 線形 DNA擰緊或擰松后再環(huán)化，成為超螺旋結(jié)構(gòu)。 螺距： 堿基傾角： 1176。 較長(zhǎng)的回文結(jié)構(gòu)，在某些因素作用下，可形成莖環(huán)式的十字結(jié)構(gòu)和發(fā)夾結(jié)構(gòu)。A=T、 G=C P336 圖 5— 4 堿基互補(bǔ)原則具有極重要的生物學(xué)意義， DNA 的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、反轉(zhuǎn)錄等的分子基礎(chǔ)都是堿基互補(bǔ)。 相對(duì)濕度 92%， DNA鈉鹽結(jié)晶， B— DNA。 遺傳信息貯存在 DNA 的堿基排列順序中，生物界生物的多樣性即寓于 DNA 分子 4 種核苷酸千變?nèi)f化的精確的排列順序中。 ③核苷 5’多磷酸 3’多磷酸化合物 ppGpp pppGpp ppApp ④核苷酸衍生物 HSCoA、 NAD+、 NADP+、 FAD 等輔助因子。 ， 5羥甲基胞嘧啶代替 C。 四、 維生素 B5 與煙酰胺輔酶 P369 維生素 B5 包括煙酸（尼克酸）、煙酰胺 （尼克酰胺） 煙酰胺是合成 NAD、 NADP 的前體 P369 結(jié)構(gòu)式：煙酸、煙酰胺、 NAD、 NADP NAD、 NADP 是各種脫氫酶的輔酶。 凝血過(guò)程中，許多凝血因子的生成與維生 K 有關(guān)。 缺乏癥：佝僂癥等。 β 胡蘿卜素 轉(zhuǎn) 化成二個(gè)維生素 A（一切有色蔬菜） α 胡蘿卜素 γ 胡蘿卜素 轉(zhuǎn)化成一個(gè)維生素 A 黃玉米色素 功能 與視覺(jué)有關(guān)。 第一節(jié) 脂溶性維生素 一、 維生素 A 和胡蘿卜素 P360 結(jié)構(gòu) 化學(xué)名稱(chēng)：視黃醇，包括兩種： A A2 維生素 A的來(lái)源 β 胡蘿卜素、α 胡蘿卜素、γ 胡蘿卜素、黃玉米色素在肝臟、腸粘膜內(nèi)轉(zhuǎn)化成 A。 酵母、真菌、植物中：麥角固醇（ D2 原） 動(dòng)物體內(nèi)： 7 一脫氫膽固醇（ D3 原） 結(jié)構(gòu) P362 反應(yīng)式： 麥角固醇 ?維生素 D2 （麥角鈣化固醇） 7脫氫膽固醇（皮膚） ? 維生素 D3 （膽鈣化固醇） 功能 調(diào)節(jié)鈣磷代謝， 維持血中鈣磷正常水平，促進(jìn)骨骼正常生長(zhǎng)。 缺乏癥：肌肉出血、凝血時(shí)間延長(zhǎng)。 二、 維生素 B2 與黃素輔酶（ FAD、 FMN） P368 化學(xué)名稱(chēng)：核黃素 結(jié)構(gòu) P368 結(jié)構(gòu)式： VB FMN、 FAD 活性形式： FMN（還原型 FMNH2） ，