【正文】 空白或替代對照：以緩沖液（如PBS）或與第一抗體同源的正常動物血清取代第一抗體，結(jié)果應(yīng)為陰性?？乖捍碳C(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答產(chǎn)生相應(yīng)抗體或致敏淋巴細(xì)胞并能與之特異性結(jié)合的物質(zhì)。用其他浸透劑（火棉膠，碳蠟，明膠等）滲入組織內(nèi)部的過程稱為浸透或透入包埋：使用包埋劑將處理過的組織包于其中，使組織達(dá)到一定韌度和硬度，有利于切片。Ⅳ型膠原是基膜中的重要組成成分，完整的基膜更是良性上皮細(xì)胞的標(biāo)志，如果基膜斷裂或者消失的話則說明腫瘤已經(jīng)發(fā)展成為了惡性腫瘤[5]。免疫組織化學(xué)染色主要包括固定、染色、切片、脫色等過程，整個過程的操作雖然比較簡單，但是卻容易受到外界環(huán)境因素的影響，導(dǎo)致病理診斷中出現(xiàn)一定的誤診現(xiàn)象，所以這就要求操作人員在操作過程中應(yīng)該嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作[2]。50例腫瘤患者中，其中女性有20例，男性有30例，年齡（2461）歲，平均年齡（177。（5）常規(guī)石蠟切片和HE染色標(biāo)本的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（全國統(tǒng)一評定標(biāo)準(zhǔn)）①切片完整，厚度4－6um，薄厚均勻，無褶無刀痕。蘇木精染色后，不宜在水中和鹽酸酒精停留過長，切片分化程度應(yīng)在鏡下觀察，分化過度，應(yīng)水洗后重新在蘇木精中染色，再水洗分化和使切片在自來水或稀氨水中充分變藍(lán)。兩液溶解后將其混合，加入碘酸鈉待蘇木精氧化成紫紅色，再加入冰醋酸。16．二甲苯II 2min。8．伊紅染色20s～1min。（四）冰凍切片蘇木精伊紅染色1．恒冷箱冰凍切片，粘貼在載玻片上，用95%酒精95ml和冰醋酸5ml的混合固定液固定1min。18．95%酒精1min。10．蘇木精染色1至5min。2．二甲苯II 10min。無水乙醇II 2min。自來水洗或蒸餾水洗1min。90%酒精1min。蘇木精在堿性染料中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。5．冰凍切片粘片法冰凍切片粘片法基本按石蠟切片的粘片處理，但烤片溫度不宜超過40℃。已固定的組織切片，收集于清水中。切出切片用載玻片貼附后，進(jìn)行吹干或固定。冰凍切片多用于新鮮組織，甲醛固定的組織和低溫冰箱冷藏的組織塊等。應(yīng)注意維護(hù)切片機(jī)，防止因螺絲松動產(chǎn)生震動，切片時會造成切片厚薄不均?？傊?，組織脫水、透明和浸蠟對于切片質(zhì)量都有一定影響，組織脫水、透明和浸蠟過度，組織塊變硬變脆，因此對于小塊組織或小動物標(biāo)本應(yīng)注意時間。遇到此情況，可將組織浸在香柏油中軟化，用二甲苯洗去香柏油后，再重新浸蠟和包埋。陳舊、腐敗和干枯的組織不宜制作切片。撈起切片后，立即寫上編號。（2）切片多使用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)，使用時左手執(zhí)毛筆，右手旋轉(zhuǎn)切片機(jī)轉(zhuǎn)輪。1．切片前的準(zhǔn)備（1）固定后的標(biāo)本經(jīng)脫水、透明、浸蠟和包埋后，制成蠟塊。常用的切片工具包括組織切片機(jī)、切片刀和自動磨刀儀器等。根據(jù)需要，包埋的方法常有石蠟包埋法和火棉膠包埋法。五、透明透明的目的是將組織內(nèi)的酒精用礦物油或植物油置換出來，并溶解石蠟，幫助石蠟浸透組織。脫水的目的在于將組織內(nèi)的水分用酒精或其他溶劑置換出來，為石蠟等其他包埋劑浸入組織創(chuàng)造條件。最常用的固定液是10%的福爾馬林溶液：使用時，用40%的甲醛飽和水溶液10毫升，加水90毫升配成。切取組織塊大小。因此應(yīng)細(xì)致、耐心、認(rèn)真負(fù)責(zé)，并事先做好計劃安排。石蠟切片報告在實際收到標(biāo)本后五個工作日內(nèi)發(fā)出，如遇特 殊情況（需做酶標(biāo)﹑特染﹑脫鈣等）應(yīng)及時發(fā)出臨時報告。手術(shù)中切下的標(biāo)本由巡回護(hù)士放入容 器內(nèi)，按規(guī)定標(biāo)本完全浸入 10%中性福爾馬林溶液或 95％乙醇溶液 內(nèi)，并貼好標(biāo)碼（姓名﹑住院號），送交手術(shù)室專職人員登記簽收。如送檢標(biāo)本為少見疑難病例，需要進(jìn)一步做免疫組化檢查，在6小時內(nèi)發(fā)出初檢報告，免疫組化報告3工作日內(nèi)發(fā)出。為了解決上述的問題，減少患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，為患者蠃來保貴的治療時間，超聲波快速石蠟制片法可勝任此項工作。最新超聲波快速石蠟制片機(jī)，開展了快速石蠟切片病理檢查。為保證工作順利進(jìn)行，請需做快速石蠟病理切片的標(biāo)本，離體后立即用福爾馬林固定，并由專人快速送到病理科檢查。三、送檢的病理標(biāo)本連同病理申請單由手術(shù)室專職人員送到病理 科，負(fù)責(zé)送檢標(biāo)本人員必須帶上“病理標(biāo)本簽收簿”，由病理科工作 人員核對無誤簽收后，方能留下標(biāo)本。細(xì)胞學(xué)檢查：穿刺涂片一般在穿刺后一小時發(fā)出報告，如有 特殊情況需和病人約定發(fā)出報告日期，脫落細(xì)胞檢查在收到標(biāo)本后二 個工作日內(nèi)發(fā)出報告。一、取材采取病料，要刀剪銳利，剪切時不可擠壓，扯拉病料，以防人為損傷。組織塊病變一面應(yīng)平整光滑，另一面可不平整，以便包埋時辨認(rèn)。三、沖洗固定后的組織塊，應(yīng)將固定液洗去。常用的脫水劑為酒精。由于經(jīng)過透明劑處理的組織塊用肉眼觀察呈透明狀，故稱這一過程為透明。石蠟包埋法：（1）先將熔化的石蠟倒入包埋框，用加熱的鑷子將欲包埋的組織塊在蠟液內(nèi)放置好。以下分別加以敘述。高質(zhì)量的蠟塊和鋒利的切片刀是保證切片質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。先修出標(biāo)本，直到組織全部暴露于切面為止，但小標(biāo)本注意不要修得太多，以免無法切出滿意的用于診斷的切片，標(biāo)本應(yīng)注意切全。（5）切片撈起后，在空氣中略微干燥后即可烤片。用陳腐組織制成的切片，往往核漿共染，染色模糊，組織結(jié)構(gòu)不清，無法進(jìn)行觀察。脫水酒精，尤其是無水酒精中混有水分，則組織脫水不干凈。但若時間不夠，組織塊硬化不夠，也不利于切片和染色，因此，應(yīng)注意各具體環(huán)節(jié)的操作，并注意保證各種試劑的質(zhì)量。遇硬化過度的肝、腦、脾等組織時，應(yīng)輕輕切削，防止由于震動產(chǎn)生空洞現(xiàn)象。組織不經(jīng)任何包埋劑而直接放在制冷臺上冷卻后進(jìn)行切片。這種切片用于科研和教學(xué)的連續(xù)切片，效果較好。根據(jù)目的進(jìn)行染色?？靖珊罅⒓慈〕?，溫度過高，時間過長，則切片易碎。2．細(xì)胞漿染色的原理細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。85%酒精1min。伊紅染色20s至5min。二甲苯I 2min。3．無水乙醇1min。11．自來水洗1min。19．95%酒精1min。自來水洗。9．自來水洗10s。17．二甲苯III 2min。3．伊紅溶液的配制（1）水溶性伊紅 －1g 蒸餾水100ml先將水溶性伊紅加入蒸餾水中，用玻璃棒將伊紅攪起泡沫后過濾，每100ml加冰醋酸1滴。新配的伊紅染色快，切片染色不宜過長，應(yīng)根據(jù)染切片的多少逐步延長染色時間，切片經(jīng)伊紅染后，水洗時間要短。②染色核漿分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封裱美觀。）歲；其中轉(zhuǎn)移性腫瘤26例，肝細(xì)胞肝癌19例，血管瘤8例，子宮癌13例。值得注意的是，在整個染色過程中，切片應(yīng)該一直保持濕潤，在孵育的過程中，孵育盒中的蒸餾水量要合理的放置，孵育盒要放平，保證抗體液體在組織上的均勻性，避免抗體流到組織的一旁造成假陰性的結(jié)果。免疫組織化學(xué)技術(shù)通過觀察抗體對特異性抗原的顏色反應(yīng)來對組織的抗原進(jìn)行診斷，與傳統(tǒng)的病理診斷相比具有優(yōu)越性。組織芯片：又稱組織微列陣，是將數(shù)十個、數(shù)百個、乃至上千個小的組織片整齊的排列在某一載體上（通常是載波片）而成的微縮組織切片?？贵w：受抗原刺激后B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的與相應(yīng)抗原反應(yīng)的球蛋白Envision法：EnVision法又稱為ELPS法(enhance labeled