【正文】 1656cm1 是 酰胺 C=O 鍵的伸縮振動(dòng) [50]，與肟 C=N 的伸縮振動(dòng)重疊。 EEa 體系的分離：梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚 :乙酸乙酯 =1:1 緩慢地調(diào)至 純 乙酸乙酯 。 表 各化合物的狀態(tài)與比移值 化合物 狀態(tài) 比移值 Rf 粗品 純品 石油醚 :乙酸乙酯 =4:5 石油醚 :乙酸乙酯 =1:2 純乙酸乙酯 C 黃色膏狀 白色膏狀 * * * D 淺黃色膏狀 淺黃色膏狀 E 墨綠色膏狀 黃色膏狀 Ea 紅棕色膏狀 黃色膏狀 Eb 淺黃色 膏狀 Ec 淺黃色膏狀 Ed 淺棕色膏狀 Ee 紅色晶體 F 白色固體或 紅褐色膏狀 黃色膏狀 G 白色固體 白色晶體 Ha 淺黃色膏狀 Hb 淺黃色膏狀 * * * U 褐色膏狀 淺棕色膏狀 U 是 E 經(jīng) 二氧化硒 脫氫 得到的 α,β不飽和酮， 也能由 Ea 消除溴化氫得到。 圖 E 的 氧化 脫氫反應(yīng) 各種化合物在不同展開劑中的 TLC 比移值見 。 內(nèi)酰胺的還原 內(nèi)酰胺 G 在乙醚溶液中用 氫化鋁鋰還原 4h，得到內(nèi)酰胺羰基被還原的產(chǎn)物Ha。若時(shí)間允許，最好靜置久一些讓晶粒長(zhǎng)大便于過濾。 將 事先搗碎 的固體 F 與多聚磷酸加入燒杯，用金屬桿式電子溫度計(jì)和一枝玻璃棒將二者充分?jǐn)嚢杌旌稀? 該固體充分干燥后，變成像熟石灰一樣的塊狀，很容易 用藥匙搗成粉末。這樣高的溫度容易導(dǎo)致過度氧化，得到的 E 顏色發(fā)黑，收率很低。柱層析（石油醚 :乙酸乙酯 =1:2）得到化合物 Ec 和少量 Ed。分出乙醚層，用氫氧化鈉固體干燥后旋蒸得到淺黃色的膏狀物 Hb。 用電爐小心 加熱， 緩慢升溫， 將溫度在 100～ 120℃之 間保持 30min。將反應(yīng)液在 1L燒杯中用飽和碳酸鈉溶 14 液調(diào)至中性（約需 50g 無水碳酸鈉），用 3 100mL 乙醚萃取，將乙醚層水洗至中性，旋蒸得到粘稠的氧化乙酰脫氫樅胺 E 粗品。 實(shí)驗(yàn)部分 試劑儀器 試劑 名稱 生產(chǎn)廠家 規(guī)格 歧化松香胺 桂林松塔林化有限公司 含脫氫樅胺 70% 對(duì)甲苯磺酸 上海凌峰化學(xué)試劑有限公司 分析純 無水乙醇 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 氫氧化鈉 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 乙酸酐 上海凌峰化學(xué)試劑有限公司 分析純 乙酸 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 鉻 酸 上海久億化學(xué)試劑有限公司 分析純 乙醚 上海中試化工總公司 分析純 無水硫酸鈉 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 鹽酸羥胺 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 無水乙酸鈉 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 多聚磷酸 上海凌峰化學(xué)試劑有限公司 化學(xué)純 氨水 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 氫化鋁鋰 天津市化學(xué)試劑研究所 含量不少于 95% 柱層析用硅膠 青島海洋化工廠分廠 200300 目 乙酸乙酯 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 石油醚 南京化學(xué)試劑有限公司 分析純 儀器 名稱 生產(chǎn)廠家 規(guī)格 電子天平 常熟雙杰測(cè)試儀器廠 JJ20xx M=20xxg d= 電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司 JA3003N M=300g d=1mg 強(qiáng)力恒速攪拌機(jī) 常州市新析儀器廠 QHJ756B 磁力攪拌器 天津 Autoscience 儀器有限公司 AM3250B 13 分析方法 IR: Nicolet360 型 FTIR， KBr 壓片法測(cè)定 1HNMR: BrukerDPX300 型 NMR 儀，溶劑均為 CDCl3 13CNMR: BrukerDPX300 型 NMR 儀 MS: LCQAdvantage 型 ESITOF 質(zhì)譜儀 ，正離子模式 TLC: GF 254 硅膠板 30100mm, 50100mm 脫氫樅胺的提純 圖 脫氫樅胺的提純 [7] 將 240g 歧化松香胺 A 溶于 560mL 乙醇，置于 2L四口瓶中。 鑒于目前脫氫樅胺 B 環(huán)改性衍生物的研究和報(bào)道較少， 本文的研 究目的在于合成新的脫氫樅胺 B 環(huán)改性 衍生物，并進(jìn)行 DNA 切割活性測(cè)試。它們對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有一定的抗菌活性，其 MIC 分別為 mg/L 和250500 mg/L。當(dāng)濃度超過 20 μmol/L 時(shí)，化合物 5 和 6對(duì)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)表現(xiàn)中等的抑制作用；化合物 7 和 8 表現(xiàn)出最大的抑制作用。而樹脂酸衍生物作為抗動(dòng)脈硬化、抗癌藥物在很多國(guó)家申請(qǐng)了專利 [3738]。 脫氫樅胺衍生物的生物活性 脫 氫樅胺具有三環(huán)二萜的結(jié)構(gòu)，與具有強(qiáng)生物活性的甾類化合物較為接近，其同系物和衍生物具有生物活性。 他們通過結(jié)晶分離了肟的兩種順反異構(gòu)體，并分別進(jìn)行 Beckmann 重排，發(fā)現(xiàn)反式肟重排的收率大于順式肟。 考察了 三種溫度 下化學(xué)熒光強(qiáng)度隨熱降解時(shí)間的變化，計(jì)算了聚合物的動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定參數(shù)、氧化率、活化能等，并且與常用的抗老化劑 A4010（苯胺類化合物）和 Irganox10 1070（酚類化合物）比較。此外，他們還制得了 12,14二硝基脫氫樅酸、 12乙酰脫氫樅酸，并通過衍生物的制 備確定了結(jié)構(gòu)。 姚緒杰等 [20]以脫氫樅胺為原料，合成了 5 種脫氫樅胺水楊醛類 Schieff 堿，用 IR、 1HNMR 確證其結(jié)構(gòu)，并用靜態(tài)失重法研究了它們?cè)谒嵝越橘|(zhì)中對(duì)銅的緩蝕性能，發(fā)現(xiàn)脫氫樅胺 5,6二羥基水楊醛 Schiff堿對(duì)銅的緩蝕性能最強(qiáng)。 王延等 [18]以脫氫樅胺為原料，合成了 6 種脫氫樅基季銨鹽，對(duì)合成化合物通過 UV、 IR、 NMR 及元素分析手段進(jìn)行確認(rèn)。其中前者可以用于抗菌劑、防霉劑方面，后者可以用在工業(yè)助劑方面。 Schertz[9]等合成了脫氫樅胺的五氯酚鹽。 圖 脫氫樅胺 脫氫樅胺的生產(chǎn)和制備 工業(yè)上采用腈化 氫化法生產(chǎn)脫氫樅胺。 圖 松香的催化歧化 Fleck 和 Palkin又在 1939 年證明了無催化劑條件下加熱的松香也能夠發(fā)生歧化反應(yīng)，生成脫氫樅酸和內(nèi)酯化的二氫樅酸 (lactonized dihydroabietic acid)[6]。 1980年后超過美國(guó)居世界第一，占世界松香總產(chǎn)量的 40%。 [1] 松香的生產(chǎn)狀況 目前松香的世界年產(chǎn)量為 110120 萬噸。它們都是帶有一個(gè)羧基和 兩個(gè)共軛的雙鍵的三環(huán)二萜。作者還嘗試用 6溴 7氧代乙酰脫氫樅胺構(gòu)造呋喃、吡咯雜環(huán)，卻意外地得到了原來的 7氧代乙酰脫氫樅胺和消除產(chǎn)物 5,6烯 7氧代乙酰脫氫樅胺。與我一同工作的同志 對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本文的研究目的是對(duì)脫氫樅胺的 B 環(huán)進(jìn)行改性，合成新的脫氫樅胺衍生 物，并測(cè)試其與 DNA 的相互作用，希望能將脫氫樅胺衍生物的應(yīng)用領(lǐng)域拓展到生物制藥領(lǐng)域，促進(jìn)松香產(chǎn)品深加工的發(fā)展。松樹在我國(guó)從南到北都有分布，因此松香是我國(guó)林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)中最重要的產(chǎn)品之一。羧基使得松香具有酸性，可以通過酯化、酰胺化進(jìn)行改性。美國(guó)松香的年平均消耗量為 104 t/a。 歧化松香 人們發(fā)現(xiàn)松香在熱處理后，其抗氧化性和耐候性都發(fā)生了顯著提高。脫氫樅胺及其衍生物廣泛用于手性拆分、金屬離子浮選、表面活性劑、殺菌、制藥等領(lǐng)域。 脫氫樅胺的衍生物 氨基成鹽衍生物 作為氨基化合物，脫氫樅胺能夠和酸 反應(yīng) 成鹽。 Goodson[11]合成了一系列含肽鍵的脫氫樅胺衍生物。 王延等 [16]以脫氫樅胺為原料，合成了三種 N脫氫樅基 N,N二羥乙基季銨鹽類陽離子表面活性劑， 表征了 產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)，測(cè)定了產(chǎn)品的表面物理化學(xué)性質(zhì)，并對(duì)產(chǎn)品的抗菌緩蝕性能進(jìn)行了應(yīng)用研究。 Schiff堿的合成可以自由選擇反應(yīng)物，改變?nèi)〈姆N類和位置，便于開發(fā)大量結(jié)構(gòu)新穎的產(chǎn)品。 芳環(huán)的改性 6 1938 年， Fieser 和 Campbell[23]系統(tǒng)地研究了脫氫樅酸的取代反應(yīng)。通過測(cè)定各化合物的氧化勢(shì)能和清除自由基的能力大小，確定了清除自由基效果最佳的 3 種化合物為 12N對(duì)甲氧基苯氨基 14氨基脫氫樅酸甲酯，12N對(duì)甲氧基苯氨基脫氫樅酸甲 酯，和 12,14N,N二（對(duì)甲氧基苯氨基）脫氫樅酸甲酯。因此對(duì) B 環(huán)進(jìn)行改造的報(bào)導(dǎo)很少。這是一個(gè)非常有用的合成砌塊。在抗氧化作用方面，現(xiàn)在已經(jīng)成功開發(fā)了食品防腐劑和抗氧化劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 1000 mol ratio/TPA 時(shí)，達(dá)到 100%抑制； 500 mol ratio/TPA 時(shí)，達(dá)到 %抑制。 10 抗菌活性 Tapia 等 [43]通過對(duì)脫氫樅酸的微生物轉(zhuǎn)化，得到一種新化合物 12，并研究了脫氫樅酸和該新化合物的抗菌活性。 11 殺蟲 Tan 等 [47]從 Salvia cilicica 中提取出兩種二萜（ 14 和 15），它們都具有抗利什曼原蟲的活性。 12 第二章 脫氫樅胺 B 環(huán)改性的研究 引言 脫氫樅胺是一種具有手性的三環(huán)二萜，結(jié)構(gòu)與具有強(qiáng)生物活性的甾類化合物較為接近，其衍生物多具有生物活性。 脫氫樅胺 的 乙?；脱趸? 圖 脫氫樅胺的乙酰化和氧化 將 (50mmol)C 溶解在 30mL 乙酸中，裝入 250mL 四口瓶。該固體可直接用于下一步反應(yīng) 。分出乙醚層，用氫氧化鈉固體干燥后旋蒸得到淺黃色的膏狀物 Ha。將反應(yīng)液蒸干，用二氯甲烷萃取，柱層析（石油醚 :乙酸乙酯 =1:2）得到化合物 Eb。 [48]由于三氧化鉻的氧化性很強(qiáng)，氧化的選擇性 不是很好，容易造成過度氧化，收率一般比較低 。 Beckmann 重排反應(yīng) 在制備肟 F 時(shí)，最終將反應(yīng)液直接倒入大量冰水，析出白色沉淀。 Beckmann 重排是一個(gè)很強(qiáng)的放熱反應(yīng)。 反應(yīng)液的后處理和 F 基本相同，將反應(yīng)液趁熱倒入冰水，同時(shí)不斷攪拌，讓多聚磷酸水 解，釋出產(chǎn)物。 TLC 分析表明該固體為含有少量 F 的 G。 合成雜環(huán)化合物的嘗試 本文原本希望從 α溴代酮 Ea 出發(fā)，通過 FeistBenary 反應(yīng)和 Hantzsch 吡咯合成反應(yīng)在脫氫樅胺 B 環(huán)構(gòu)造呋喃和吡咯雜環(huán) 。 產(chǎn)物的分離提純 分別用 3 種配比的展開劑，將得到的化合物在硅膠板上進(jìn)行薄層層析 (TLC)， 測(cè)量每種化合物的比移值，匯總于下表。 F 的提純：梯度洗脫，洗脫劑的組成從石油醚 :乙酸乙酯 =1:1 緩慢地調(diào)至石油醚 :乙酸乙酯 =1:2。 Sm (M n , 2 x 4 .0 0 )。 [49] 25 化合物 G C22H32N2O2 Mr= N(3Isopropyl8,11adimethyl 6oxo6,7,7a,8,9,10,11,11aoctahydro 5Hdibenzo[b,d]azepin 8ylmethyl)acetamide MS m /z100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450 475 500 525 550%0100SW B1 2 0 4 1 2 0 1 6 2 5 (1 1 .6 3 2 ) T O F M S ES + 2 .5 6 e 33 5 7 .23 5 8 .23 6 1 .2CY S 70 0 相對(duì)分子質(zhì)量 （ ）和計(jì)算值（ ）基本吻合 IR 410.97478.39525.83548.60580.23608.73639.80673.54764.05818.38887.221033.461057.631087.201134.261175.441280.651388.841406.611431.541459.771479.611522.721562.581620.091681.982866.752938.012