【正文】 然而，類似溶解度問題已經(jīng)在其他疏水性抗癌藥物（如紫杉醇，喜樹堿）遇到過，并已通過使用適當(dāng)?shù)妮o料（44）或新型納米顆粒（45，46）或脂質(zhì)體（47，48）的方法解決。這種可能性也正在進(jìn)一步研究。MOMIPP的特定受體（S）在未來的進(jìn)一步鑒定將是十分重要的，主要有以下幾個原因：（1）確定的受體（S）的表達(dá)水平或活性可能有確定腫瘤的哪種類型對這種化合物最敏感的預(yù)測價值，（2）理解MOMIPP針對的蛋白質(zhì)的功能（S）可能有助于評估對正常細(xì)胞的潛在毒性，（3）對受體蛋白（S）的了解將有助于藥物結(jié)合位點的分析，借此可以提出修改意見，以提高藥效或特異性。然而，我們發(fā)現(xiàn)用3,4,5 三甲氧基苯基團(tuán)更換MOMIPP的4吡啶時產(chǎn)生一種化合物。被廣泛歸類為查耳酮的化合物已被證明通過多種機(jī)制表現(xiàn)出抗癌活性，包括中斷p53與MDM2蛋白或HDM2的相互作用，抑制P糖蛋白（13，34），（3537）和中斷微管聚合。在對MOMIPP以methuosis誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的潛在機(jī)制的思考中，一種可能性是，它可以作為親電試劑（即邁克爾受體）。我們的SAR研究在探求這一類具有誘導(dǎo)methuosis活性的化合物需要什么分子特征方面提供了一些有益的啟示。 SD), with the results expressed as percent of the mean from parallel control dishes treated with an equivalent volume of vehicle alone (DMSO).討論 methuosis是一種新發(fā)現(xiàn)的非細(xì)胞凋亡的形式，由胞吞胞吐販運(yùn)形式的改變引發(fā)，進(jìn)而導(dǎo)致大量細(xì)胞空泡化和細(xì)胞代謝的完整性破壞。2 甲基吲哚在濃硫酸條件下被選擇性硝化生成產(chǎn)物32（見試驗階段驗證regiospecificity的細(xì)節(jié)），然后加氫生成胺33。C, 66%. Compound 35: POCl3, DMF, 0 176。該計劃的第二個步驟，最后30和31兩個化合物，由4 乙酰吡啶在哌啶條件下耦合醛形成。因此，我們致力于制備用活性基團(tuán)微小改良的具有生物活性的類似物，這可能對親光性的藥物靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)工作有一定意義。 SD of determinations performed on three parallel dishes. (E) Normal HMECs were treated with 10 μM MOMIPP or an equivalent volume of DMSO (control) and examined by phasecontrast microscopy after 24 h. (F) MCF7 cells or HMECs were plated in 96well plates. After 48 h, while the cells were still subconfluent, fresh medium containing 10 μM MOMIPP or an equal volume of vehicle (DMSO) was added. MTT viability assays were performed at a 48 h end point. Values are the means (177。為了進(jìn)一步評估MOMIPP對正常細(xì)胞的影響，我們把化合物應(yīng)用到人體皮膚成纖維細(xì)胞。SD) from four separate wells, with the results expressed as percent of the mean of the parallel control wells. (B) U251 cells seeded in parallel 35 mm dishes were treated with MOMIPP (●), MIPP (■), or an equivalent volume of DMSO (▲), and cells were harvested for counting on each of three consecutive days. Each point is a mean 177。在這些條件下，MOMIPP顯??然在減少細(xì)胞的生長和降低細(xì)胞活性方面比MIPP更有效。C。（16）經(jīng)過POCl3/DMF的甲?；幚恚虚g體24和25被獨立制備。然而，我們有些詫異，沒有明顯的產(chǎn)品，可以由21直接烷基化生產(chǎn)。無論是在MTT法的可行性分析還是在克隆形成實驗中，這種化合物的抑制活性超過MIPP（見表1）。5 甲氧基化合物13，反過來用BBr3甲基化形成5OH的化合物15（圖1B）。這一分析結(jié)果（見表1）表明，第一個吡啶環(huán)的氮取向是其是否具有活性的一個關(guān)鍵特征。具體來說，化合物1（有效）與化合物7（無效）的比較表明吡啶環(huán)的重要性，因為當(dāng)用段 甲氧基苯基環(huán)化合物來代替它時呈現(xiàn)無效。它引起的空泡比化合物1引起的更大、更多。這種化合物的結(jié)構(gòu)被描繪在圖1（化合物1）。methuosis也是caspase獨立的，因為它不能被廣譜蛋白酶抑制劑如ZVADFMK阻止。（2）由于GBM細(xì)胞通常在海港抑癌基因的突變（例如，PTEN，P53，PRB），他們是相對不敏感的凋亡刺激。最近，我們描述了1查耳酮化合物，3 （2 甲基1H吲哚3 基）1 （4 吡啶基）2丙烯1（即，MIPP），它可以誘導(dǎo)methuosis在神經(jīng)母細(xì)胞瘤和其他類型的癌細(xì)胞發(fā)生。介紹盡管在發(fā)展中國家針對特有的某些類型的癌癥細(xì)胞的調(diào)控途徑的治療藥物有了最新進(jìn)展，許多腫瘤術(shù)后輔助治療的重要支柱仍然是輻射和DNA烷化劑。在methuosis（8，9），回收的減值和溶酶體導(dǎo)向販運(yùn)macropinocytotic囊泡的作用把他們鎖定在中間階段，在此他們?nèi)诤隙鸩叫纬奢^大的液泡。結(jié)果SARs由于我們開始尋求可能引發(fā)methuosis的 druglike小分子，我們注意到Kirchhausen和同事（11）寫的一個報告，他們描述了被稱為vacuolin1的分子及一些其他三嗪類化合物，這些化合物能夠抑制Ca2+依賴溶酶體胞吐。我們發(fā)現(xiàn)，化合物1幾個小時內(nèi)在膠質(zhì)瘤細(xì)胞引起廣泛空泡，48小時內(nèi)造成細(xì)胞活力的重大損失。我們首先從比較MIPP和市售的幾個相關(guān)化合物（圖1化合物38）誘導(dǎo)methuosis的活性開始。 （2）48小時時結(jié)束用3 （4,5 二甲基2 基）2,5 二苯基溴化四唑（MTT）法對細(xì)胞存活率評估，并在第一個24小時。C, 90%。若其失去活性則證實吡啶氮（見表1）的必要性。因此，我們做了一組在生理PH時增加極性的實驗，用來探討改變過的吲哚5位基團(tuán)所帶來的影響。因此，一個新的路線即在引入吡啶基團(tuán)（計劃2）前官能化吡啶就產(chǎn)生了。C, 93%. Compound 23: methyl4(bromomethyl)benzoate, NaOH, TBAB, CH2Cl2, RT, 63%. Compound 24: (1) POCl3, DMF, 0 176。分別添加每個化合物到指定的濃度，保持2天，并且在第一天后要補(bǔ)充原料。當(dāng)細(xì)胞處理2天時，MOMIPP顯??然在減少細(xì)胞集落形成方面比MIPP有效（圖4A）。為了確定對腫瘤細(xì)胞造成最大限度毒性作用的濃度的MOMIPP是否也會對正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性，我們用10μMMOMIPP處理人類乳腺上皮細(xì)胞（HMEC）。MOMIPP對亞融合與融合的成纖維細(xì)胞的影響差別提供了一個可能的解釋，這意味著，以空泡為典型的內(nèi)體販運(yùn)的中斷可能在不分裂的細(xì)胞中比在正常增殖的細(xì)胞中具有相對較好的耐受性。因此，今后的一個重要目標(biāo)是確定能誘導(dǎo)methuosis的查耳酮的靶目標(biāo)。該系統(tǒng)已被證明能用甲基化的吲哚直接?；? 6位。C RT, 13 and 41% for 28 and 29, respectively. Compound 30: 4acetylpyridine, piperidine, MeOH, reflux, 13%. Compound 31: 4acetylpyridine, piperidine, MeOH, reflux, 74%. (B) Conditions and reagents: Compound 32: NaNO3, H2SO4, 0 176。C, 69%. Compound 41: 4acetylpyridine, piperidine, MeOH, reflu