構(gòu)象性蛋白質(zhì)芯片的制造原理-免費(fèi)閱讀
【正文】 8． Buddy ，et nanostructured surfaces for protein recognition. Nature 1999,398:593597. 9． Gerald Walter, Konrad B252。每一項(xiàng)技術(shù)的突破不僅會給基礎(chǔ)研究帶來莫大的進(jìn)展，而且在21世紀(jì)的現(xiàn)代會立刻誕生難以估量的產(chǎn)業(yè)。這個(gè)過程的第一步是從樣品池中特異性捕捉目標(biāo)蛋白，然后是簡單的洗滌以去除非特異性吸附的蛋白，然后就是可以將保留到靶點(diǎn)的特異性蛋白解吸附下來，借助于SELDI生物質(zhì)譜測的蛋白分子片斷的分子量最終斷定解吸附蛋白的化學(xué)性質(zhì)。 當(dāng)然可以有兩種情形的構(gòu)象性蛋白質(zhì)芯片的制造途徑，一個(gè)就是上述的從實(shí)際蛋白質(zhì)（天然蛋白和基因工程蛋白）出發(fā)的表面印記法；另一種可能看起來更吸引人，就是基于PDB數(shù)據(jù)庫中蛋白質(zhì)三維構(gòu)象的芯片表面蝕刻微處理技術(shù)，整個(gè)蛋白質(zhì)的在芯片（云母）光滑表面的加工過程不涉及生物分子的參與，完全是把數(shù)據(jù)庫中的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息化為計(jì)算機(jī)精密控制的納米雕琢過程。這就是構(gòu)象性蛋白質(zhì)芯片。最終他們將一個(gè)有1萬個(gè)點(diǎn)的芯片與一個(gè)FRB(FKBP12rapamycin binding protein)結(jié)合蛋白和G蛋白結(jié)合蛋白的探針進(jìn)行雜交。蛋白質(zhì)微陣列象DNA微陣列一樣制備時(shí)精確排列，結(jié)果能快速獲取進(jìn)而數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)分析，而且保持蛋白質(zhì)識別結(jié)合的天然性。 目前最成功的且形成一定商業(yè)市場的是DNA芯片，即將無數(shù)預(yù)先設(shè)計(jì)好的寡核苷酸或cDNA在芯片上做成點(diǎn)陣，與樣品中同源核酸分子雜交4。 周建軍1，吳才宏豐美福2所以在生物醫(yī)學(xué)界，人們總是有一個(gè)夢想，用一小片試紙、一小塊芯片，從一滴血（體液）里就能得出關(guān)于被試者健康狀況的必要信息。隨著這些基本的基因組學(xué)問題的提出1，2（后基因組時(shí)代，蛋白組學(xué)），涌現(xiàn)出許多功能強(qiáng)大的研究方法和研究工具，最突出的就是細(xì)胞蛋白質(zhì)二維凝膠電泳（及相應(yīng)的質(zhì)譜法測蛋白分子量）和生物芯片（Biochip）技術(shù)3。有關(guān)DNA芯片的文章一經(jīng)出現(xiàn)就在描述此方面的應(yīng)用上展示了誘人的魅力5?，F(xiàn)在DNA芯片的研究正如火如荼，利用此高通量手段，研究者可以方便地研究眾多的基因在mRNA水平上在某種特定情況下的轉(zhuǎn)錄變化。這幾位先鋒科學(xué)家利用這些簡單的手段制成了每平方厘米有1600個(gè)點(diǎn)的蛋白質(zhì)微陣列。Carl . Borrebaeck所在的瑞典Lund大學(xué)免疫技術(shù)系正從事著這方面的工作，期望從這里找到突破7。然后將二糖包被在吸附蛋白表面，因?yàn)樘鞘嵌嗔u基物質(zhì)，可與蛋白質(zhì)形成氫鍵，造成一個(gè)糖殼，保護(hù)蛋白質(zhì)不在制片過程中變性，使模板分子的結(jié)構(gòu)信息完整保留下來，這樣才可能最終以印跡穴的形式體現(xiàn)出來。也可以應(yīng)用靈敏的熒光染色。第一個(gè)是庫的概念，第二個(gè)則是如何把庫有序化，這就是陣列（
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