【正文】 2. 表面活性劑 新潔爾滅、杜滅芬 烷化劑 甲醛、還氧乙烷、戊二醛等。除菌的濾膜孔徑: μm, 可除去一般細(xì)菌。: ： 100 oC ，30min。 ：干烤箱，加熱至160~170e ，2h。 滅菌(sterilization): 殺死物體上所有微生物（包括細(xì)菌的芽孢）的方法。微生態(tài)失調(diào)的主要原因：1. 長(zhǎng)期使用廣譜抗生素： 長(zhǎng)期服用廣譜抗生素后，正常菌群中的敏感菌被抑制或殺滅，耐藥菌大量繁殖而致病，即二重感染或重疊感染，系一種菌群失調(diào)癥(dysbacteriosis)。?多重復(fù)活兩個(gè)或多個(gè)滅活病毒間。第三節(jié) 病毒的遺傳變異 一、病毒的基因組 1. 遺傳物質(zhì)：DNA 或RNA 2. 特點(diǎn)：只有一種核酸，且存在形式多樣；基因數(shù)目少，結(jié)構(gòu)較簡(jiǎn)單； 復(fù)制方式具有多樣性； 有較大的遺傳不穩(wěn)定性。 轉(zhuǎn)化因子：游離的DNA片段。 回復(fù)突變： 野生型：細(xì)菌在自然環(huán)境下具有的表現(xiàn)型 。 前噬菌體（prophage）：整合在宿主菌基因組中的噬菌體的基因組。分布廣，有細(xì)菌的場(chǎng)所就有相應(yīng)的噬菌體存在。 可編碼許多重要的生物學(xué)性狀。變異：子代與親代性狀的差異性。1． CD8+ CTLCD8+ CTL能特異性殺傷病毒感染的靶細(xì)胞，阻斷病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，是終止病毒感染的主要免疫機(jī)制。此類抗體能與細(xì)胞外游離的病毒結(jié)合從而消除病毒的感染能力。3. 免疫調(diào)節(jié)活性及抗腫瘤活性： 抗腫瘤活性： 1）直接抑制腫瘤細(xì)胞分裂 。（2）抑制性： IFN的抗病毒作用是抑制，而不是殺滅。 （一）干擾素（Interferon, IFN）概念：IFN是病毒或其他干擾素誘生劑刺激細(xì)胞所產(chǎn)生的一類分泌性蛋白，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。 專性胞內(nèi)菌（obligate intracelllular bacteria）只能在細(xì)胞內(nèi)生存, 如立克次體和衣原體。抗體對(duì)胞外菌的作用主要表現(xiàn)為：（1）阻止細(xì)菌粘附： 粘膜免疫系統(tǒng)分泌的 sIgA 發(fā)揮重要的作用。革蘭陰性菌對(duì)溶酶菌不敏感，但在特異性抗體參與下，溶酶菌也可破壞革蘭陰性菌。n 活化的巨噬細(xì)胞（需要T細(xì)胞介導(dǎo)應(yīng)答中釋放的淋巴因子， 其中以IFNγ最為重要）殺菌效力明顯增強(qiáng)， 能有效殺傷、清除細(xì)胞內(nèi)寄生的病原體。（二）吞噬作用小吞噬細(xì)胞，主要指血液中的中性粒細(xì)胞。 如：黃曲霉毒素；真菌性超敏反應(yīng)某些真菌的菌絲、孢子和代謝產(chǎn)物可引起各種類型的超敏反應(yīng)。第三節(jié) 真菌性感染淺表真菌感染有致病性強(qiáng)的外源性真菌引起。如：艾滋病。 病毒顯性感染按癥狀出現(xiàn)早晚和持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)短又分急性感染和持續(xù)性感染。 泌尿生殖道：皰疹病毒、乳頭瘤病毒、人類免疫缺陷病毒等。當(dāng)這種免疫復(fù)合物沉積在某些器官組織的膜表面時(shí)，激活補(bǔ)體引起III型變態(tài)反應(yīng)，造成局部損傷和炎癥。 （cytocidal effect）: 病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制完畢，在很短的時(shí)間內(nèi)，一次釋放出大量子代病毒， 細(xì)胞被裂解死亡；細(xì)胞病變作用（cytopathic effect, CPE） （steady state infection）:有些病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖過程中，對(duì)細(xì)胞代謝、溶酶體膜影響不大，以出芽方式釋放病毒，過程緩慢，病變較輕、細(xì)胞暫時(shí)也不會(huì)出現(xiàn)溶解和死亡。全身性細(xì)菌感染： j毒血癥 (toxemia)：細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素進(jìn)入血流，經(jīng)血液到達(dá)易感的組織和細(xì)胞引起特殊的毒性癥狀。病愈后，致病菌從宿主消失。 v多途徑感染：有些致病菌的傳播可有呼吸道、消化道、皮膚創(chuàng)傷等多種途徑。 ?對(duì)組織無選擇性，引起的毒性作用大致相同。 侵襲性酶：利于細(xì)菌在組織中擴(kuò)散；協(xié)助細(xì)菌抗吞噬。*毒力（virulence）：致病菌的致病性強(qiáng)弱程度。 對(duì)抗生素不敏感。 肝炎病毒對(duì)過氧乙酸、次氯酸鹽較敏感。 ★滅活的病毒仍可保留抗原性、紅細(xì)胞吸附性、血凝集細(xì)胞融合等特性。 235。同樣從前病毒DNA轉(zhuǎn)錄出病毒RNA，在胞漿內(nèi)裝配，以出芽方式釋放。 以脊髓灰質(zhì)炎病毒為例，侵入的RNA直接附著于宿主細(xì)胞核糖體上，翻譯出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解為結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，如依賴RNA的RNA聚合酶。A. 病毒基因的mRNA轉(zhuǎn)錄（早期轉(zhuǎn)錄）: 病毒本身含有RNA聚合酶，可在胞漿中轉(zhuǎn)錄 mRNA。 如：流感病毒（4） 生物合成 (biosynthesis)： 病毒基因組一旦釋放到細(xì)胞中，就開始 病毒的生物合成。人類免疫缺陷病毒的表面結(jié)構(gòu)gp120與淋巴細(xì)胞表面的CD4分子結(jié)合。?病毒吸附蛋白：病毒體表面能與細(xì)胞受體結(jié)合的蛋白質(zhì)。 病毒體（virion ） 完整的、成熟的病毒顆粒。對(duì)數(shù)期：生長(zhǎng)迅速，菌數(shù)急劇上升，細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性等都較典型。 專性厭氧菌厭氧生長(zhǎng)的機(jī)制 : （Eh）高的呼吸酶 細(xì)胞色素和細(xì)胞色素氧化酶 只能在120mV以下的Eh時(shí)生長(zhǎng)。 ②微需氧菌：在低氧壓（5％～6％）生長(zhǎng)最好，氧壓大于10％對(duì)其有抑制作用。多由放線菌和真菌產(chǎn)生。G 菌細(xì)胞壁脂多糖； 耐高溫；121e ，20min不被破壞；250e 高溫， 干烤才能破壞熱原質(zhì)。： 芽孢對(duì)熱、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力。 如：大腸埃希氏菌的 I 型菌毛；腸產(chǎn)毒型大腸桿菌的定植因子（CFA/I） 性 菌 毛傳遞遺傳物質(zhì)。：抗吞噬作用；粘附作用；抗有害物質(zhì)的損傷作用 （二）、鞭毛(flagellum)某些細(xì)菌表面附著的細(xì)長(zhǎng)呈波狀彎曲的絲狀物。集中于細(xì)胞質(zhì)的某一區(qū)域。 核糖體RNA(rRNA)23S, 16S, 5SrRNA。革蘭氏染色陰性。 抵抗?jié)B透壓的影響。 僅有1~2層。第二節(jié) 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)一、微生物學(xué)(microbiology) 是研究微生物的類型、分布、形態(tài)、結(jié)構(gòu)、代謝、生長(zhǎng)繁殖、遺傳、進(jìn)化，以及與人類、動(dòng)植物等相互關(guān)系的科學(xué)。 二、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展史 Leeuwenhoek顯微鏡Pasteur巴氏消毒法Koch分離細(xì)菌，郭霍法則Iwanovsky煙草花葉病毒Loeffler,Frosch口蹄疫病毒W(wǎng)alterReed黃熱病毒Twort噬菌體 、化學(xué)療法及抗生素的發(fā)現(xiàn)Jenner牛痘預(yù)防天花 Pasteur霍亂、炭疽、狂犬疫苗 Behring白喉抗毒素 меЧНИкоВ ИИ吞噬細(xì)胞學(xué)說 Ehrlich體液抗體學(xué)說 Wright體液免疫、細(xì)胞免疫 Ehrlich砷凡納明Fleming，F(xiàn)lorey青霉素 （1）新病原微生物的發(fā)現(xiàn) : 朊病毒，軍團(tuán)菌，幽門螺桿菌，人類免疫缺陷病毒， 瘋牛病，埃博拉病毒，冠狀病毒，禽流感H5N1 （2）病原微生物致病性的認(rèn)識(shí) 內(nèi)源性感染，細(xì)菌耐藥性，分子水平上的致病 機(jī)制的研究…… （3）微生物學(xué)診斷技術(shù) 快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)易 ELISA，PCR…… （4）微生物的防治措施 新型疫苗的研制 : 核酸疫苗，基因工程疫苗……(周亞濱) 第一篇 微生物學(xué)的基本原理第二章 微生物的生物學(xué)性狀第一節(jié) 細(xì) 菌一、細(xì)菌的大小與形態(tài) 觀察儀器：光學(xué)顯微鏡 測(cè)量單位：微米(μm) 球菌(coccus) 桿菌(bacillus) 螺形菌(spiral bacterium)二、 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)（一）、細(xì)胞壁(cell wall)位于細(xì)菌細(xì)胞的最外層，包繞在細(xì)胞膜的周圍，組成較復(fù)雜，并隨不同細(xì)菌而異。 脂蛋白(2).外膜 脂質(zhì)雙層 脂多糖①脂蛋白外膜蛋白（out membrane protein OMP）。參與細(xì)菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換。(3)細(xì)菌L型的培養(yǎng)：高滲、低瓊脂、10%20%血清、3%5%NaCl、10%20%蔗糖； 生長(zhǎng)緩慢； 油煎蛋樣菌落；(4)細(xì)菌L型的致病性：引起慢性感染； （二）、細(xì)胞膜（cell membrane1．功能：參與細(xì)菌物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，生物合成，分泌、呼吸等生物學(xué)作用。 抗生素作用位點(diǎn) .（plasmid）：染色體外的遺傳質(zhì)，存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中。 無核膜、核仁和有絲分裂器。 根據(jù)鞭毛的數(shù)量、位置可將鞭毛菌分 成四類: 單毛菌；雙毛菌；從毛菌；周毛菌。 （四）、芽孢(endospore/spore)某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的休眠形式。 細(xì)菌繁殖體：80℃水中迅速死亡。蒸餾法可除去熱原質(zhì)。 （5）細(xì)菌素：某些細(xì)菌產(chǎn)生的具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。 如幽門螺桿菌。 (SOD)，觸酶或過氧化物酶。194。是細(xì)胞外的結(jié)構(gòu)形式，具有典型的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并有感染性。病毒受體的分布與病毒對(duì)宿主動(dòng)物的感染范圍有關(guān)。 （2）穿入（penetration）: 病毒吸附在易感細(xì)胞表面上后，可通過多種方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。 生物合成一般分兩個(gè)階段: 早期合成 。mRNA有二種：早期m RNA，主要合成復(fù)制病毒DNA所需的酶及調(diào)控蛋白等，如依賴DNA的DNA聚合酶，脫氧胸腺嘧啶激酶等，稱為早期蛋白；B. 病毒核酸復(fù)制：子代病毒DNA的合成是以親代DNA為模板，按核酸半保留形式復(fù)制子代雙股DNA。在這種酶的作用下，以親代RNA為模板形成一雙鏈結(jié)構(gòu)，稱“復(fù)制型（Replicative form）”。被感染的細(xì)胞仍持續(xù)分裂將前病毒傳遞至子代細(xì)胞。 非容納細(xì)胞(nonpermissive cell)：不能為病毒復(fù)制提供相應(yīng)的酶、能量及必要成分的細(xì)胞。理化因素滅活病毒的機(jī)制是：（1）破壞有包膜病毒的包膜凍融或脂溶劑 （2）使病毒蛋白變性酸、堿、溫度 （3）損傷病毒核酸變性劑、射線 （1） 溫度：多數(shù)病毒耐冷不耐熱，病毒標(biāo)本的保存應(yīng)盡快低溫冷凍。 （3）抗生素與中草藥：現(xiàn)有抗生素對(duì)病素?zé)o抑制作用；中草藥對(duì)病毒的增殖有一定的抑制作用。 敏感藥物：灰黃霉素；制霉菌素；二性霉素B 。*半數(shù)致死量(median lethal dose,LD50) 半數(shù)感染量(median infective dose,ID50) 在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，使一定體重或年齡的某種動(dòng)物半數(shù)死亡或感染所需要的最小細(xì)菌數(shù)或毒素量。 如血漿凝固酶；透明質(zhì)酸酶；鏈激酶；鏈道酶；膠原酶等。 u 發(fā)熱反應(yīng)；v 白細(xì)胞反應(yīng)；w 內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克； x Shwartzman與DIC 二、細(xì)菌性感染的傳播（一）、細(xì)菌感染的來源 外源性感染（exogenous infection）：病人；帶菌者；病畜和帶菌動(dòng)物。 結(jié)核分支桿菌；炭疽芽孢桿菌。 如：腦膜炎球菌；霍亂球菌； 腸產(chǎn)毒性大腸桿菌等。如白喉、破傷風(fēng)等。 常見于包膜病毒，如：麻疹病毒。 特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞對(duì)感染細(xì)胞造成損傷，屬IV型變態(tài)反應(yīng)。 破損的皮膚：乙型腦炎病毒、狂犬病毒等。 (acute viral infection)病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)大量增殖，引起細(xì)胞破壞、死亡，機(jī)體出現(xiàn)典型的臨床癥狀。 瘋牛病。 嗜角質(zhì)性。 如：青霉菌。大吞噬細(xì)胞，即單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（mononuclear phagocyte system, MPS），包括血