凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量-免費(fèi)閱讀
【正文】 ? 始終保持柱內(nèi)液面高于凝膠表面，否則水分揮發(fā)，凝膠變干。 ? 5．凝膠柱的處理 凝膠用過(guò)后，反復(fù)用蒸餾水洗后保存，如果有顏色或比較臟，可用 滌。通過(guò) 2— 3倍柱床容積的洗脫液使柱床平衡，然后在凝膠表面上放一片濾紙或尼龍濾布，以防將來(lái)在加樣時(shí)凝膠被沖起，并始終保持凝膠上端有一段液體。 儀器和試劑 ? 儀器：層析柱、恒流泵、紫外檢測(cè)儀、自動(dòng)部分收集器 ? 試劑 ? 待測(cè)樣品：胰島素、牛血清白蛋白 ? 藍(lán)色葡聚糖 2021； Sephardex G75；洗脫劑 實(shí)驗(yàn)步驟 ? 1．凝膠溶脹 凝膠顆粒要求大小比較均勻 ，可流速穩(wěn)定，結(jié)果較好。在一根凝膠柱中，凝膠顆粒間空隙所含水相體積為外水體積 VＯ，不能進(jìn)入凝膠孔徑的那些大分子，當(dāng)洗脫體積為時(shí) VＯ，出現(xiàn)洗脫峰。當(dāng)混合物隨流動(dòng)相經(jīng)過(guò)凝膠層析柱時(shí)，其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術(shù)。該法設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、重復(fù)性好、樣品回收率高。 凝膠顆粒內(nèi)部孔穴的總體積為內(nèi)水體積 Vi，能全部滲入凝膠的那些小分子，當(dāng)洗脫體積為 VＯ +Vi時(shí)，出現(xiàn)洗脫峰。 取葡聚糖 Sep
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