食品安全現(xiàn)代生物檢測(cè)技術(shù)-免費(fèi)閱讀
【正文】 ? 薄層層析分離及定性 ? a薄層板： + +2g硅膠G+15ml水研勻、鋪在玻璃板上（ ）涼干，80℃ 1h干燥器中 ? b點(diǎn)樣：用微量注射器或毛細(xì)管將樣液點(diǎn)于薄層板上（離底 2cm左右 2cm線寬＜ 2mm）成一條底邊的線 ? c展開：層析缸內(nèi)放入展開劑（如莧菜紅、胭脂紅用甲醇：乙二胺：氨水 =10： 3： 4） ? 將薄層板下端浸入溶劑 ，放約 1h（色素明顯分開），取出晾干 ? d比移值 Rf的測(cè)定：可用紙層析（層析紙）測(cè)定方法基本同上 a、 b、 c ? Rf= ? Rf=與標(biāo)準(zhǔn)樣液 Rf比較定性為何種色素 溶劑前沿距離斑點(diǎn)移動(dòng)距離? 定量測(cè)定 ? A 刮下色斑（各條狀） ? 移入漏斗（ G3砂芯）用丙酮 — 氨水液解析抽濾 ? B 用檸檬酸（ 20％）調(diào) pH=6 ? C 定容 ? D 在各色素 λmax處測(cè) A，如檸檬黃 428nm，胭脂紅 508nm ? E 作標(biāo)準(zhǔn)曲線 ? F 計(jì)算 色素（ mg/Kg,L） = CV/W ? c從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出色素含量 μg/ml,v— 提取液總體積 ,w— 樣品質(zhì)量（ g） 作業(yè) 食品添加劑的測(cè)定方法有哪些？ 防腐劑苯甲酸（鈉）的測(cè)定方法有哪些？ 簡(jiǎn)述抗氧化劑 BHA（叔丁基對(duì)羥基茴香醚）、 BHT（ — 二叔丁基對(duì)甲酚）的測(cè)定方法。用 HCl滴定 ,當(dāng)水層顯淡綠色為終點(diǎn)（黃 — 紫藍(lán)， pH=） ? （三）氣相色譜法測(cè)定苯甲酸、山梨酸、及其鹽類(P147,151,152) ? 液相色譜法測(cè)定苯甲酸、山梨酸、糖精 (P152154) ?二、抗氧化劑的測(cè)定 ? BHA（叔丁基對(duì)羥基茴香醚）的測(cè)定 ? 樣品經(jīng)石油醚萃取加入 72％乙醇，使 BHA轉(zhuǎn)入乙醇相中，再與 — 二氯醌氯亞胺 — 硼砂（緩沖）溶液的顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色化合物。但歸納起來主要有：滴定法、比色法、紫外分光光度法、熒光法、離子選擇性電極法、色譜法（氣相、液相、薄層） 食品中添加劑的測(cè)定與食品添加劑的測(cè)定的方法又有區(qū)別，一個(gè)需要進(jìn)行（前處理）分離，一個(gè)則不需要，加之含量差異，分析方法有的采用不同的分析方法?；驹硎窍葮?gòu)建含有修飾過的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn) DNA片段 (競(jìng)爭(zhēng) DNA)，競(jìng)爭(zhēng) DNA由質(zhì)粒組成，帶有一個(gè)改造 PCR擴(kuò)增子，改造部分可以是 DNA插人序列、缺失序列或者點(diǎn)突變，競(jìng)爭(zhēng) DNA與待測(cè)目標(biāo) DNA在同一反應(yīng)管中進(jìn)行 PCR共擴(kuò)增，因競(jìng)爭(zhēng) DNA片段和待測(cè) DNA的大小不同，經(jīng)瓊脂糖凝膠可將兩者分開，通過比較兩種條帶的量可進(jìn)行定量分析。 ? ? 目前基于 GMO特異 DNA片段的定性 PCR篩選方法已廣泛應(yīng)用于 GMO食品檢測(cè)．但是隨著各國(guó)有關(guān) GMO標(biāo)簽法的建立和不斷完善，對(duì)食品中的 GMO含量的下限已有所規(guī)定。 ? （ 一） ELISA技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè) ? ? 建立在抗體抗原免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上。 ? （ 4）克隆并篩選鑒定 PCR產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳、染色，在紫外光照射下可見擴(kuò)增特異區(qū)段的 DNA帶．根據(jù)該帶的不同即可鑒定不同的 DNA。這些技術(shù)顯示出了巨大的潛力，發(fā)揮著越來越大的作用，也正因?yàn)槿绱怂鼈儽蛔u(yù)為 20世紀(jì) 80年代分子生物學(xué)革命和生物技術(shù)的飛躍。 ? 目前最常用的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)如下： ? （ 1）放射免疫測(cè)定技術(shù) ? （ 2）酶免疫測(cè)定技術(shù)
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