【正文】 分子標(biāo)記技術(shù)克服了常規(guī)接種鑒定難以同時(shí)對(duì)兩個(gè)以上株系的抗性基因進(jìn)行鑒定選擇的弱點(diǎn) ,它可以將多個(gè)不同的抗性基因聚合到同一品種。因此 ,利用發(fā)病率低、潛育期長、病情輕的品種做親本 ,通過雜交及其在田間自然發(fā)病條件下的選擇 ,不斷累積抗擴(kuò)展基因 ,培育綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良 ,而兼 具優(yōu)異抗擴(kuò)展的品種 ,從而在一定程度上降低 SMV 對(duì)大豆的影響。由于非主要株系演變成主要株系有一個(gè)過程 ,隨著育種水平的發(fā)展 ,品種更替速度在不斷加快 ,一個(gè)品種在生產(chǎn)上利用年限縮短。這類抗性是由主基因和多基因體系控制的 ,基因累積數(shù)量決定了品種抗性的強(qiáng)弱。但迄今為止 ,關(guān)于大豆 SMV 株系之間是否存在交叉保護(hù)現(xiàn)象的研究未見系統(tǒng)報(bào)道。在此種情況下 ,開始關(guān)注在 SMV流行的情況下可能遭 受輕度產(chǎn)量損失 ,但抗性相對(duì)穩(wěn)定的抗擴(kuò)展并開展了對(duì)其相關(guān)問題的系統(tǒng)研究。說明該品種在株系組成不斷變化的情況下 ,具有一定的持久抗性。個(gè)別基因的作用很小 ,因此 ,某個(gè)微效抗性基因位點(diǎn)上的基因突變對(duì)抗性的影響微乎其微。沒有發(fā)現(xiàn)一個(gè)基因控制多個(gè)株系抗 性的現(xiàn)象 ,即一因多效。 在對(duì) SMV 的研究中發(fā)現(xiàn)大豆中存在對(duì) SMV 的抗侵染和抗擴(kuò)展兩類完全不同的抗性〔 1〕 ,它們的抗性機(jī)理、遺傳方式、抗病效果以及育種程序等方面有諸多不同之處 ,本文對(duì)兩類抗性育種利用問題進(jìn)行了討論。 —— 智海劍，蓋鈞鎰，大豆對(duì) ＳＭＶ 數(shù)量抗性的表現(xiàn)形式與種質(zhì)鑒定，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2020,37(10):14221427 摘 要 大豆既可抗 SMV 的侵染 ,又 可抗擴(kuò)展。例如邳縣茶豆接種 SC8 后 4 d 病指從 4%發(fā)展到 17% ， R 為 ， 直到調(diào)查結(jié)束病情沒有進(jìn)一步擴(kuò)展；另一種情況是初始病情維持到底， R 為 0。它主要表現(xiàn)為潛育期長，嚴(yán)重度低，病情擴(kuò)展緩慢。 發(fā)病率（ I）以出現(xiàn)系統(tǒng)癥狀的植株占調(diào)查總株數(shù)的百分率表示。有關(guān)學(xué)者認(rèn)為數(shù)量抗性在生產(chǎn)上足以起到防病保產(chǎn)的作用，因此它正受到抗病育種者的重視[1～ 7]。結(jié)果表明，品種間４ 個(gè)組分均存在明顯差異；溧水中子黃豆、沛縣天鵝蛋、誘變３０ 等品種雖然對(duì) ４ 個(gè)株系均感染，但在４ 個(gè)組分上均表現(xiàn)出較強(qiáng)抗性，且不同株系間差異較小，說明這些品種對(duì)大豆花葉病毒具有廣譜數(shù)量抗性。Ａｓｈｆｉｅｌｄ等 [15]報(bào)道 ,大豆抗細(xì)菌性斑點(diǎn)病 (Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ ｓｇｌｙｃｉｎｅＣｏｅｒｐｅｒ )基因Ｒｐｇ 1 位于分子遺傳圖譜的Ｆ連鎖群的標(biāo)記Ｋ 644 和Ｂ 212 之間 ,在這一區(qū)域的還有另外 3 個(gè)抗病標(biāo)記 ,即Ｒｐｓ Ｒｓｖ 1 和Ｒｐｖ 1。 連鎖分析表明 :抗南方株系Ｓａ、Ｓｃ Ｓｃ 9 的基因Ｒｓａ、Ｒｓｃ Ｒｓｃ 9 和抗東北株系Ｎ Ｎ 3 的基因Ｒｎ Ｒｎ 3 是 此資料來自企業(yè) 連鎖的 ,且都位于Ｎ 8 Ｄ 1ｂ +Ｗ連鎖群。國內(nèi)也已對(duì)ＳＭＶ株系進(jìn)行了鑒定及抗病性研究 ,其中主要工作是對(duì)東北株系Ｎ Ｎ Ｎ 3 的株系群和江淮下游的Ｓａ、Ｓｃ、Ｓｇ、Ｓｈ株系群的抗性 研究 [2]。Ｒｎ 1和Ｒｎ 3 之間的遺傳距離最近 ,為 10 2ｃＭ。 中感 , 10. 1 30。 抗 , 8 23 個(gè) 。 結(jié)合經(jīng)典遺傳試驗(yàn)和分子標(biāo)記的研究結(jié)果 ,可以初步推測 ,Ｐｅｋｉｎｇ、ＰＩ 9076ＰＩ209332 等抗源中至少存在兩個(gè)相似的抗性基因位點(diǎn) :位 于Ｇ連鎖群上的ｒｈｇ 1 和位于Ａ連鎖群上Ｒｈｇ 4。 由于 常規(guī)抗性鑒定工作量大 ,容易受到環(huán)境因素的影響 ,而且溫室鑒定對(duì)材料是破壞性的 ,因此 ,許多研究致力于利用分子標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇。 大豆胞囊線蟲 (ＨｅｔｅｒｏｄｅｒａｇｌｙｃｉｎｅｓＩｃｈｉｎｏｈｅ )是一種世界性的大豆病害 ,一般造成產(chǎn)量損失 5%10%,嚴(yán)重發(fā)生地塊減產(chǎn)達(dá) 30%以上 ,甚至顆粒無收 ,每年由于大豆胞囊線蟲 病發(fā)生而造成經(jīng)濟(jì)損失可達(dá)數(shù)十億美元 [1]。我國黑龍江、遼寧、吉林、內(nèi)蒙古、陜西、河北、河南、山西、山東、安徽、江蘇、北京等省市都有該病發(fā)生 , 年發(fā)病面積在 267 萬公頃以上 [2 。因此 , 有必要深入了解 AM 真菌侵染大豆胞囊線蟲的胞囊、并在其內(nèi)部產(chǎn)孢的效應(yīng)與機(jī)制。可見 ,AM 真菌對(duì)抑制線蟲、減輕病害具有較好的效果。本試驗(yàn)旨在溫室嚴(yán)格控制條件下 , 探索 AM 真 菌與 SCN 之間的相互作用關(guān)系 , 為今后進(jìn)一步的試驗(yàn)提供依據(jù)。接種 SCN 顯著降低了 G. intraradices 和 G. versif orm e 對(duì)大豆根系的侵染率、 G. f asiculatum 的產(chǎn)孢數(shù)量及 G. intraradices 的侵入點(diǎn)數(shù)量 , 增加了 G. m osseae 的產(chǎn)孢數(shù)量。所以在抗性鑒定中綜合病情指數(shù)分級(jí)方法比 4個(gè)組分的聚類分析方法更具通用性。且綜合病情指數(shù)劃分方法簡單易行。凡在接種后沒有系統(tǒng)感染 ,ＳＤＩ =0的品種為免疫類型 。 潛育期以及病情擴(kuò)展速度反映品種在不同階段的抗擴(kuò)展能力。本文選擇不同抗性類型的代表性品種 ,研究用于評(píng)價(jià)數(shù)量抗性的聚類分析以及綜合病情指數(shù)分級(jí)方法 ,并對(duì)兩種方法的一致性和實(shí)用性進(jìn)行比較。另外 ,利用發(fā)病率、病級(jí)和接種至最大病情的天數(shù)構(gòu)建了度量數(shù)量抗性強(qiáng)弱的綜合病情指數(shù) (ＳＤＩ ),提出各抗性級(jí)別的臨界標(biāo)準(zhǔn) 。因此選育抗性穩(wěn)定的數(shù)量抗性品種引起育種者的關(guān)注。 —— 智海劍，蓋鈞鎰，大豆對(duì) ＳＭＶ 數(shù)量抗性的表現(xiàn)形式與種質(zhì)鑒定，中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020, 37(10): 14221427 摘要 為證實(shí)潛育期長、病 情發(fā)展緩慢、最終病情輕的數(shù)量抗性的利用價(jià)值 ,在接種ＳＭＶ Ｓａ株系條件下 ,比較了同一遺傳背景、不同發(fā)病時(shí)期、不同病情下大豆品種主要農(nóng)藝性狀的變異。例如邳縣茶豆接種 SC8 后 4 d 病指從 4%發(fā)展到 17% ， R 為 ， 直到調(diào)查結(jié)束病情沒有進(jìn)一步擴(kuò)展；另一種情況是初始病情維持到底， R 為 0。 １．２ 試驗(yàn)方法 １．２．１ 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 2020 年將供試品種播于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)站防蟲網(wǎng)室，完全隨機(jī)排列， 2 次重復(fù)。以往關(guān)于大豆抗 SMV 研究均著重質(zhì)量抗性方面，明確了對(duì)不同株系質(zhì)量抗性分別由單顯性基 3 因控制。邳縣茶豆、淮陰秋黑豆等品種對(duì)ＳＭＶ 的抗性可能屬于數(shù)量抗性與質(zhì)量抗性的疊和。大豆對(duì) ＳＭＶ 的數(shù)量抗性是曾被學(xué)術(shù)界忽視而又值得利用的一類抗性，它一般比質(zhì)量抗性具有更寬的抗譜和更好的持久性。關(guān)于大豆對(duì) SMV 數(shù)量抗性的研究迄今未見報(bào)道。在第一對(duì)真葉展平時(shí)摩擦接種病毒株系，第一片復(fù)葉展開時(shí)重復(fù)接種 1 次。第三種情況是初始病情較高，與最終病情差別小，從而 R 值偏小，但實(shí)際病情擴(kuò)展速度并不低，如南農(nóng) 107。研究表明早期感染ＳＭＶ對(duì)大豆產(chǎn)量、褐斑率等的影響顯著大于花期感染 。 在已確認(rèn)大豆對(duì)ＳＭＶ?jǐn)?shù)量抗性主要表現(xiàn)為潛育期長、病情擴(kuò)展緩慢 ,最終病情較輕 ,和在篩選出部分抗源基礎(chǔ)上 ,本研究目的在于利用相同遺傳背景材料 ,研究不同時(shí)期感染ＳＭＶ以及不同 病情對(duì)主要農(nóng)藝性狀的影響 ,研究潛育期長或病情擴(kuò)展慢而最終病情低的數(shù)量抗性品種是否可以降低ＳＭＶ危害。并對(duì)同一批材料聚類和判別分析分級(jí)結(jié)果與綜合病情指數(shù)分級(jí)結(jié)果進(jìn)行了比較 ,結(jié)果顯示兩種方法可取得類似的分級(jí)效果 ,而綜合病情指數(shù)是對(duì)感病對(duì)照的相對(duì)統(tǒng)計(jì)量 ,不受時(shí)間、地點(diǎn)和批次的限制 ,便于不同環(huán)境下品種抗性的鑒定以及品種間抗性的比較 ,且簡單易行。 試驗(yàn)方法 2020年將供試品種播于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)站防蟲網(wǎng)室 ,完全隨機(jī)排列 ,2次重復(fù)。度量病情擴(kuò)展速度常用表觀侵染速率 [3]以及病害發(fā)展曲線下的面積 [5]。ＳＤＩ值在 。所以在數(shù)量抗性鑒定中可以用綜合病情指數(shù)歸類方法替代 4個(gè)組分的聚類分析方法。 —— 智海劍，蓋鈞鎰，何小紅，大豆對(duì)ＳＭＶ?jǐn)?shù)量 (程度 )抗性的綜合分級(jí)方 法研究，大豆科學(xué)， 2020， 24（ 1）： 511 9 摘要 : 在溫室盆栽條件下對(duì)大豆‘開育 10’品種接種了叢枝菌根 (AM ) 真菌 : Gigaspora m argarita Becker amp。認(rèn)為部分 AM 真菌能有效地抑制 SCN 對(duì)大豆根系的侵染、胞囊發(fā)育和 2 齡幼蟲的形成。 AM 真菌與病原線蟲之間的相互作用關(guān)系可以概括為相互抑制、相互促進(jìn)和互不影響 3 個(gè)方面。 10 本文通過對(duì)大豆播種 35 d 時(shí) SCN 病害的調(diào)查分析 , 認(rèn)為 AM 真菌在大豆胞囊線蟲病害發(fā)病初期就能表現(xiàn)出明顯的抑制作用 , 并且與 播種后 105 d 時(shí)對(duì)單株產(chǎn)量和大豆胞囊線蟲的胞囊、卵、幼蟲數(shù)量及菌根發(fā)育狀況的分析結(jié)果基本一致。另外 ,AM 真菌能否直接寄生大豆胞囊線蟲的卵和幼蟲 , 這些都是十分有趣的問題。 產(chǎn)量損失一般為 10%～ 20% ,重者達(dá) 30%～ 50% , 我國每年由此造成的直接經(jīng)濟(jì)損失約數(shù)十億元人民幣。采用輪作、殺線劑等防治方法可以在一定程度上控制其危害 ,而培育抗病品種是最為經(jīng)濟(jì)有效的方法。多數(shù)研究以Ｐｅｋｉｎｇ、ＰＩ 9076ＰＩ8878ＰＩ 437654 等為抗源。ｒｈｇ 1 位點(diǎn)可以解釋較大的遺傳變異 (最高可達(dá) 50%以上 )且具有非小種?；剐?,在許多群體中均可以檢測到 ,Ｒｈｇ 4 與控制種皮色的Ｉ位點(diǎn)緊密連鎖 ,與大豆對(duì) 3 號(hào)生理小種的抗性有關(guān)。 中抗 , 24 39 個(gè) 。 高感 , 30 以上 [46. 直接以孢囊的絕對(duì)數(shù)判定抗病性 , 常常因土壤質(zhì)地及土壤中線蟲密 度的不同或其它條件的不一致 , 造成鑒定結(jié)果的差異 [41. 鑒于此 , T riantphyllou［ 提出以寄生指數(shù) (index of parasitisim, IP)作為抗病性的標(biāo)準(zhǔn) . 寄生指數(shù)指測試植株根上著生的孢囊數(shù)占感病對(duì)照的百分比 , 有時(shí)也稱雌成蟲指數(shù) . Schm itt et al [50 ]總結(jié)了多數(shù)育種家意見后 , 提出鑒定大豆抗病性的 IP 標(biāo)準(zhǔn)為 : 高抗 , 0 9%。多點(diǎn)分析結(jié)果表明 :5 個(gè)抗病基因的排列順序和遺傳距離為Ｒｓｃ 8 35 8ｃＭ Ｒｎ 1 10 3ｃＭ Ｒｎ 3 21 5ｃＭ Ｒｓａ 35 8ｃＭ Ｒｓｃ 9。 抗性鑒定群體和親本的抗性鑒定在防蚜蟲網(wǎng)室進(jìn)行 ,鑒定方法和抗感標(biāo)準(zhǔn)參照向遠(yuǎn)道等 [4]方法。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)今后研究抗性基因的功能和關(guān)系是十分有價(jià)值的。Ｒｐｓ 3 抗真菌病害Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｓｏｊａ ,Ｒｓｖ 1 抗大豆花葉病毒 [16],Ｒｐｖ 1 抗花生斑駁病毒。研究證實(shí)以往報(bào)道的一些抗感染品種如溧水中子黃豆、ＡＧＳ－１９，其實(shí)是抗擴(kuò)展的數(shù)量抗性品種。 大豆花葉病毒（ soybean mosaic virus， SMV）是危害大豆生產(chǎn)的主要病害之一，嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和品質(zhì)。 病級(jí)（ S）是品種癥狀的嚴(yán)重度分級(jí)。研究也表明品種間存在明顯的抗性遺傳變異，這解釋了在 SMV 流行年份某些品種輕度受害，而有些則遭受嚴(yán)重?fù)p失的內(nèi) 此資料來自企業(yè) 在原因。 此資料來自企業(yè) 第三種情況是初始病情較高，與最終病情差別小，從而 R 值偏小，但實(shí)際病情擴(kuò)展速度并不低，如南農(nóng) 107?？骨秩居梢换騼蓪?duì)基因控制 ,具有明顯的株系專化性 ,存在因株系變化而喪失抗性的可能 ,但抗侵染品種不受 SMV 的影響 ,且抗性基因鑒定、轉(zhuǎn)育方便 ,在品種更替速度不斷加快以及注意 SMV動(dòng)態(tài)變化的情況下 ,針對(duì)主要流行株系的抗侵染已被廣泛利用并將繼續(xù)發(fā)揮重要作用。 1 大豆對(duì) SMV 抗侵染和抗擴(kuò)展抗性的特點(diǎn) 按照在大豆花葉病毒侵染時(shí)是否出現(xiàn)系統(tǒng)癥狀這個(gè)絕對(duì)標(biāo)準(zhǔn)把大豆品種分成抗和感截然不同的兩類。因此 ,不能期望通過培育對(duì)特定株系的