【正文】 填寫操作記錄使用記錄本。 9. 臨床意義 HBsAb 是主動接受 HBV 疫苗注射或 HBV 感染康復后所產(chǎn)生的具有保護性作用的中和抗體。 HBsAb 試劑盒說明書。 61 項目名稱 XX大學 XX醫(yī)院輸血科 文件編號 ZNYXXXX/MYXM303 版次 /修改 第 2版 /第 0次修改 ELISA 乙肝 e 抗原 (HBeAg)操作規(guī)程 編制 /時間 XXX/ 審核 /時間 XXX/ 審批 /時間 XXX/ 1．目的 規(guī)范檢測“ HBeAg” 過程。 保證樣品管的密閉狀態(tài)，離心分離血清 /漿備用。C冰箱冷藏。 5．標準和質(zhì)控 室內(nèi)質(zhì)控 符合《 輸血科 室內(nèi)質(zhì)控程序》的要求。 判斷標準 陽性： S/CO。 6．操作步驟： 樣本編號→樣本分離、檢測儀器準備、試劑準備 →樣本測定、錄入資料→分析質(zhì)控 /結(jié)果→打印檢驗結(jié)果→簽發(fā)報告單。 儀器和試劑準備 根據(jù)樣本多少準備試劑，增加 3 孔，分別設置空白對照、陰性對照和臨界質(zhì)控；檢測儀器按《酶標 儀作業(yè)指導書 》和《 自動酶標洗板機作業(yè)指導書 》操作。 每孔加顯色劑 A、 B 各 50ul（或 1 滴），混勻，密封， 37℃避光顯色 15分鐘。 先觀察室內(nèi)質(zhì)控是否在控，判斷結(jié)果的可信性，將數(shù)據(jù)處理、計算、并儲存，導入數(shù)據(jù)庫。 保養(yǎng)儀器，關(guān)機。也是臨床治療的重要依據(jù)之一。 標本采集、接收、保存操作程序。 2．原理 HBeAb 的檢測采用競爭抑制 ELISA 法，即用抗 HBeAg 抗體包被聚苯乙烯微孔，樣本中的 HBeAb 與之競爭結(jié)合游離的 HBeAg，再與酶標記的抗 HBeAb 抗體結(jié)合，經(jīng)顯色劑作用后呈現(xiàn)顏色反應。 儲存樣品，保持樣品管完全密閉，在室溫 (15到 30176。 4．設備試劑 檢測儀器： Biocell Int 酶標儀， DEMIII 自動酶標洗板機。 質(zhì)控品 衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供 , 濃度 1ng/ml。 陰性： S/CO＞ 。 65 樣本編號 按順序?qū)⑸暾垎魏蜆颖疽灰粚幪枴? 樣本檢測 用微量加樣器取 50ul 相應樣品及質(zhì)控品、陰陽性對照品加入對應各孔，空白對照不加。顯色時間從開始加第一滴顯色液 B 開始計時。單項陽性樣本必須復查；“灰區(qū)”結(jié)果必須復查；罕見模式必須復查。 7． 控制品使用水平和頻率 質(zhì)控水平：衛(wèi)生部臨界值血清 , 每板一次 。 HBeAb 試劑盒說明書。 67 項目名稱 XX大學 XX醫(yī)院輸血科 文件編號 ZNYXXXX/MYXM305 版次 /修改 第 2版 /第 0次修改 ELISA 乙肝核心抗體 (HBcAb)操作規(guī)程 編制 /時間 XXX/ 審核 /時間 XXX/ 審批 /時間 XXX/ 1．目的 規(guī)范檢測“ HBcAb” 過程。 用真空采樣管采集受檢者血液標本 4～ 5ml。 如果 8小時內(nèi)不能完成檢測即應將標本放入 2到 8176。濃縮洗滌液按 1/20 比例以蒸餾水稀釋備用。 校驗公式 POS 。 參考波長 630nm。 樣本分離 將已編號的樣本配平離心， 3000r/min 5min。 每孔再加酶標結(jié)合物 50ul（或 1 滴）（空白對照除外），輕微振蕩 5 分鐘后，置 37℃水浴箱中孵育 30 分鐘。 每反應孔加終止液 50ul（或 1 滴），混勻。 核對結(jié)果，打印、簽發(fā)報告。 8．參考范圍 陰性，陰性： S/CO1. 9．臨床意義 HBcAb 是 HBV 病毒感染的主要標志物之一，在感染“窗口期”其它指標為陰性時， HbcAb 有可能為陽性。 69 輸血科 預防措施程序。 洗板機標準操作程序。如為陽性標本，則與檢測線預包被的抗體結(jié)合形成“金標單抗 — Hbs— HbsAg— 單抗 — Hbs”復合物而凝聚顯色。 2． 將試紙條取出后，放在水平工作臺上平置并作好標本標記。 陰性結(jié)果：試紙條只在對照線位置出現(xiàn)一條紫紅線。 2． 實驗環(huán)境應盡量避風。 4． 若所加全 血樣本過于粘稠或樣本量較少，會影響樣本在紙條上的擴散速度，此時可在加樣區(qū)加入 1~2 滴稀釋液，以助于樣本的擴散。 72 項目名稱 XX 大學 XX醫(yī)院輸血科 文件編號 ZNYXXXX/MYXM307 版次 /修改 第 2版 /第 0次修改 乙肝兩對半金標快速診斷 操作規(guī)程 編制 /時間 陳 明 / 審核 /時間 XXX/ 審批 /時間 XXX/ 1．目的 規(guī)范全血金標法檢測乙肝兩對半過程。 2． 從塑料封口膜中取出反應板，用記號筆在反應筆在反應板上相應位置處編號。 2. 若遇到粘稠大的患者血清，可在滴加血清入反應板中后，再滴加幾滴生理鹽水或樣品稀釋液，以便加快滲濾現(xiàn)象。 3．樣本 血清或血漿 樣品類型為受見檢者血清或血漿。C)條件下不超過 8小時。 試劑： 科華公司 抗 HCV 診斷試劑盒 (ELISA) 。 3． 將所需數(shù)量的條板固定于支架，按順序編 號，設置樣品孔、空白對照孔、陽性對照孔和陰性對照孔。（注：洗滌時每孔要加滿洗 74 液，勿使用孔間交叉污染。 9． 將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液充分洗滌 6 遍，拍干。 11． 每孔加入 1 滴終止液終止顯色反應。 3. 若陰性對照 OD 值、陽性對照 OD 值超出正常 范圍或其孔間之差大于 30%，應重復試驗。 2． 為保證樣品稀釋的準確性，樣品液須用加樣器加樣。 2．原理 微孔條已預包被高純度的 HIV 特異性抗原 gp160 和 gp36 等，檢測時若受檢者血樣中含有抗－ HIV 抗體，與之結(jié)合形成特異性復合物，再加入 HRP 標記的 gp3 gp41，采用雙抗原夾心法捕獲人血清或血漿中的 HIV(1+2)抗體，再用 TMB 底物顯色，顯色深淺與抗－ HIV 抗體的含量成正比。 保證樣品管的密閉狀態(tài)，離心分離血清 /漿備用。C冰箱冷藏。 5．操作步驟： 1． 將試劑盒平衡至室溫，取出所需的條板，剩余的及時封存。 5． 密封， 置 37℃水浴溫育 60 分鐘。） 7． 每孔加入 100ul（ 2 滴）酶標記物 ，空白對照不加 。采用洗機時應設定每遍有 30～ 60 秒的浸泡時間。 6．質(zhì)量控制： 每次檢測均要設空白、陰性及陽性對照，用單波 450nm 測定時，以空白對照調(diào)零。 2． 樣品的 OD 值 Cutoff 值者為 HCV 抗體反應陰性。 4． 為保證樣品稀釋的準確性，樣品液須用加樣器加樣。 2．原理 TPAb 的檢測采用雙抗原夾心 ELISA 法，即用梅毒螺旋體（ TP）基因工程混合抗原（ 17KDa、 47KDa）包被聚苯乙烯微孔反應板，樣本中的 TPAb 與之交連后再與酶標記的基因工程抗原（ 17KDa、 47KDa）結(jié)合，經(jīng)顯色劑作用后呈現(xiàn)有色反應。 儲存樣品，保持樣品管完全密閉，在室溫 (15到 30176。 4．設備試劑 檢測儀器： Biocell Int 酶標儀， DEMIII 自動酶標洗板機。 CUTOFF 值計算公式： 樣本 OD 值 /陰性對照 OD 值 判斷標準 陽性： 樣本 OD 值 /陰性對照 OD 值 陰性： 樣本 OD 值 /陰性對照 OD 值 測定波長 450nm。認真檢查檢驗目的、病人姓名、 78 性別、科室、床號，血液量 3ml。 每孔再加酶標結(jié)合物 50ul（或 1 滴）（空白對照除外），輕微振蕩 5 分鐘后，置 37℃水浴箱中孵育 30 分鐘。 每反應孔加終止液 50ul（或 1 滴），混勻。 核對結(jié)果，打印、簽發(fā)報告。 8．參考范圍 陰性， 樣本 OD 值 /陰性對照 OD 值 。 TPAb 試劑盒說明書。