【正文】 ，1930年以后 ， 物理化學(xué)的分析方法如熒光分析法 、 毛細(xì)管像分析法 、 比色法等逐漸應(yīng)用到中藥鑒定中來 。 ? 20世紀(jì) 50年代 ， 色譜技術(shù) 、 光譜技術(shù) 、 電鏡技術(shù)等在中藥分析中的應(yīng)用得到了廣泛的推廣 ， 中藥理化鑒定的系統(tǒng)方法逐漸形成并趨于完善 ， 中藥鑒定學(xué)的理論體系逐漸形成 。 3/5/2023 26 ? 1964年 ， 我國(guó)中醫(yī)藥院校開設(shè)了 《 中藥材鑒定學(xué) 》課程； 1977年 ， 由成都中醫(yī)學(xué)院主編出版了全國(guó)高等中醫(yī)藥院校的協(xié)編教材 《 中藥鑒定學(xué) 》 ， 并作為中藥專業(yè)的專業(yè)課程；根據(jù)教學(xué)的需要 ， 相繼對(duì)《 中藥鑒定學(xué) 》 進(jìn)行了 3次修訂 （ 1980年 ， 1986年 ，1996年 ） ， 其基本內(nèi)容是研究和探討中藥材的來源 、性狀 、 顯微特征 、 理化鑒別 、 質(zhì)量指標(biāo)和尋找新藥等理論和實(shí)踐方面的問題 。 自 1985年 Mullis首創(chuàng)了 PCR技術(shù)之后 ， DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)和 mRNA差異顯示技術(shù)也相繼試用于中藥的品種和質(zhì)量鑒定 。五 ” 期間 ， 組織專家對(duì) 223種常用中藥材進(jìn)行了品種整理和質(zhì)量研究； 1983年 ， 國(guó)家組織了全國(guó)性中藥資源普查 ， 基本查清了我國(guó)中藥資源的現(xiàn)狀 。 3/5/2023 31 ? 中藥鑒定學(xué)作為一個(gè)獨(dú)立的學(xué)科 ， 已經(jīng)形成了中藥來源鑒定 、 性狀鑒定 、 顯微鑒定 、 理化鑒定和生物鑒定5大方法學(xué)體系 ， 其中生物鑒定法正處于方興未艾的階段 。 3/5/2023 32 上一節(jié)需要掌握的關(guān)鍵問題： ? ? ? ? （鑒定的目的） ? （ 5條） ? 首要任務(wù)；基本任務(wù)；歷史任務(wù)（使命）；戰(zhàn)略任務(wù)；長(zhǎng)期任務(wù) ? ? ? 3/5/2023 33 第 3章 中藥的資源 ? 第一節(jié) 中藥的天然資源 ? 第二節(jié) 中藥的人工資源 ? 第三節(jié) 中藥材的資源保護(hù)與可持續(xù)利用 3/5/2023 34 ? 中藥資源 (resources of Chinese medicinal materials)是自然資源 (natural resource)的一部分 。 3/5/2023 35 第一節(jié) 天然資源 ? 我國(guó)藥用植物 、 藥用動(dòng)物和藥用礦物的資源總數(shù)約為 13 000種左右 ， 其中藥用植物有 11 000余種 、 藥用動(dòng)物近 1 600種 ， 藥用礦物近 100種 。 3/5/2023 37 東北產(chǎn)區(qū) ? 包括黑龍江省大部分 、 吉林省和遼寧省的東半部及內(nèi)蒙古自治區(qū)的北部 。 3/5/2023 39 華東產(chǎn)區(qū) ? 包括浙江省 、 江西省 、 上海市 、 江蘇省中部和南部 、 安徽省中部和南部 、 湖北省中部和東部 、 湖南省中部和東部 、福建省中部和北部 ， 以及河南省及廣東省的小部分 。 除了眾多栽培的品種外 ， 尚 有 許 多 野 生 藥 材 ， 如 七 葉 一 枝 花 P a r i s polyphylla Smith. var. chinensis (Franch.) Hara、 茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf、 厚樸 Magnolia officinalis Wils.、 胡黃連 Picrorhiza scrophulariiflora Pennell、 天麻 Gastrodia elata Bl.、 半夏 Pinellia ternate (Thunb.) Breit.、 烏梢蛇 Zaocys dhumnades (Cantor)、雄黃 、 朱砂等 。 3/5/2023 42 內(nèi)蒙古產(chǎn)區(qū) ? 包括黑龍江省中南部 、 吉林省西部 、 遼寧省西北部 、河北及山西省的北部 、 內(nèi)蒙古自治區(qū)中部及東部 。 3/5/2023 43 西北產(chǎn)區(qū) ? 包括新疆自治區(qū)全部 、 青海及寧夏回族自治區(qū)的北部 、 內(nèi)蒙古自治區(qū)西部以及甘肅西部和北部 。 本區(qū)具有許多高山名貴藥材 ， 其中蘊(yùn)藏量占全國(guó) 60%~80%以上的種類有：冬蟲夏草 Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc.、 甘松 Nardostachys chinensis Batal.、掌葉大黃 Rheum palmatum L.、 胡黃連Picrorhiza scrophulariiflora Pennell等 。 3/5/2023 46 第二節(jié) 人工資源 ? 中藥的人工資源就是對(duì)中藥材的自然資源所進(jìn)行的多層次 、 多功能 、 全方位的綜合開發(fā)和利用 。 其主要方法是應(yīng)用細(xì)胞全能性規(guī)律 ， 用生物組織或細(xì)胞 ， 經(jīng)過培養(yǎng) ， 在試管內(nèi)繁殖試管苗 （ 微繁殖 ） 和保存種質(zhì) 。 3/5/2023 48 中藥飲片的加工與炮制 ? 中藥飲片的加工與炮制是中藥資源開發(fā)利用的深化和提高 ， 其作用在于清潔藥材 ， 利于貯藏；便于調(diào)劑和制劑；消除或降低毒副作用 ， 保證用藥安全；調(diào)整和改變藥物性能 ， 適應(yīng)醫(yī)療需要；引藥歸經(jīng) ， 提高治療效果等 。 3/5/2023 49 中成藥的生產(chǎn) ? 中成藥的生產(chǎn)是中藥資源深度開發(fā)的重要方式 。 2023年的中成藥總產(chǎn)值已增至 400多億元人民幣 。 這些藥材在中藥經(jīng)營(yíng)行業(yè)中被稱為 “ 道地藥材 ” (authentic and superior medicinal herbals)。 傳統(tǒng)的道地藥材常按產(chǎn)地不同而分為 “ 川藥 ” 、 “ 浙藥 ” 、 “ 云藥 ” 、“ 關(guān)藥 ” 、 “ 懷藥 ” 、 “ 廣藥 ” 、 “ 貴藥 ” 或“ 黔藥 ” 、 “ 南藥 ” 、 “ 西藥 ” 等商品 。 然而藥用資源是開發(fā)最早的自然資源之一 ， 因此資源消耗很大 。 3/5/2023 54 ? 因此保護(hù)中藥材資源已成為亟待完成的重要任務(wù) 。 有效地保護(hù)中藥材資源 ， 應(yīng)主要開展下列工作： 3/5/2023 55 中藥材資源保護(hù)的具體措施 ? ， 建立和完善以藥用植物 、 藥用動(dòng)物為主的自然資源保護(hù)區(qū) 。 例如 ，在長(zhǎng)白山自然保護(hù)區(qū) ， 野生人參為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物 ， 嚴(yán)禁采挖 。 資源的利用是指人們對(duì)已開發(fā)出來的資源進(jìn)行一定目的的使用 ， 如進(jìn)行加工和制成新產(chǎn)品等 。 如甘草提取甘草酸后的殘?jiān)梢栽偬岣什蔹S酮類成分 ， 作為化妝品添加劑和抗氧劑；甘草地上部分為優(yōu)良飼料 ， 甘草粉加工品大量用于食品及煙草工業(yè) 。 ? 、 民間用藥 。 ? ， 或者從古代本草中發(fā)掘失落品種 。 本章將重點(diǎn)討論中藥材的采收和產(chǎn)地加工與質(zhì)量的關(guān)系 。 兩者是相輔相成的 ， 絕不可弧立地看待 。 3/5/2023 64 二、中藥材的現(xiàn)代采收原則 ? 中藥的療效取決于其有效成分含量多少，在其有效成分含量最高時(shí)采收，便可得到優(yōu)質(zhì)的藥材。 ? ，有的且含一定量的毒性成分 ， 要考慮有效成分的總含量及毒性成分的含量 ， 當(dāng)有效成分的總含量為最大值 、 毒性成分的總含量 。如果貯藏中保管不當(dāng)，中藥材就可能會(huì)發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象：蟲蛀、生霉、變色、泛油等。 3/5/2023 69 防治措施的要點(diǎn)： ? 干燥，避光，冷藏，通風(fēng)。 《 中華人民共和國(guó)藥典 》 是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn) ， 它規(guī)定了我國(guó)藥品的來源（ source） 、 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) (quality standard)和檢驗(yàn)方法 ， 是國(guó)家對(duì)藥品生產(chǎn) 、 經(jīng)營(yíng) 、 使用 、 檢驗(yàn)和監(jiān)督管理的法定依據(jù) 。 ? 一 、 樣品登記 ? 二、取樣 ? 。 鑒定程序通常按上述排列依次進(jìn)行 。 中藥的雜質(zhì)主要分為來源性雜質(zhì)和摻入性雜質(zhì)兩大類 ， 來源性雜質(zhì)是指來源與規(guī)定相同 ， 但其性狀或藥用部位與規(guī)定不符；摻入性雜質(zhì)是指來源與規(guī)定不同的物質(zhì) ， 如在采收 、 加工和貯藏等過程中混入的無機(jī)物或人為摻入的非藥用物質(zhì) 。各類雜質(zhì)確定后，應(yīng)分別稱重，計(jì)算出被檢中藥中雜質(zhì)的含量?；b定法就是應(yīng)用植物 、 動(dòng)物或礦物形態(tài)和分類學(xué)等方面的知識(shí) ， 對(duì)中藥的來源或原料藥進(jìn)行鑒定 ， 確定其正確的學(xué)名 （ 或礦物的名稱 ） 或中成藥的原料組成 ， 以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確的一種方法 。 ? （ 2） 描述的方法 描述時(shí)要準(zhǔn)確使用植物形態(tài)學(xué)知識(shí)及專業(yè)術(shù)語 ， 要按上述觀察的順序依次描述 ， 并要詳細(xì)記錄 。 它包括看 、量 、 嗅 、 嘗 、 試 5種主要的傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別法 。 3/5/2023 82 性狀特征的描述方法 ? 通常采用兩種方法進(jìn)行：一是使用生物學(xué)或礦物學(xué)的形態(tài)、組織學(xué)等名詞；二是采用廣大醫(yī)藥工作者在長(zhǎng)期實(shí)踐中積累起來的生動(dòng)、形象的經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語。 ? 。在鑒定過程中，以采用顯微鏡觀察動(dòng)、植物的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀、內(nèi)含物的特征以及礦物的光學(xué)特性等為主要內(nèi)容。 按照鑒定的方法可分為組織鑒定 、 粉末鑒定 、 顯微常數(shù)測(cè)定和顯微定量等 。大小和數(shù)量的描述 。 電子顯微鏡主要分為透射電鏡和掃描電鏡 （ s c a n n i n g e l e c t r o n microscope,SEM） 兩大類 。它具有放大范圍廣、分辨率高（ 100197。 3/5/2023 90 四、理化鑒定法 ? 理化鑒定 (physical and chemical identification)法就是利用中藥中存在某些化學(xué)成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過化學(xué)的、物理的或儀器分析的手段，鑒定其真?zhèn)巍⒓兌?、?nèi)在質(zhì)量，以及有害物質(zhì)的有無或含量多少。 定性鑒定法根據(jù)性質(zhì)又可以分為物理分析法 、 化學(xué)分析法和物理化學(xué)分析法 。 ? 是利用中藥或其所含的化合物對(duì)生物體（ anism） 的作用強(qiáng)度 ， 以及用 DNA特異性遺傳標(biāo)記特征和基因表達(dá)差異等來鑒別中藥的品種和質(zhì)量的一種方法 。 ? 常用的方法有免疫鑒定法 、 細(xì)胞生物學(xué)鑒定法 、 藥物效價(jià)測(cè)定法和單純指標(biāo)測(cè)定法等 。 本方法具有特異性強(qiáng)的特點(diǎn) ， 可以準(zhǔn)確地進(jìn)行中藥的品種鑒別 。 本法根據(jù)染色體的排列 ， 制成核型模式圖；或用“ 不對(duì)稱核型分類 ” 標(biāo)準(zhǔn)確定其核型 ， 并與染色體的背景資料比較 ， 達(dá)到鑒定的目的 。 藥物效價(jià)測(cè)定法 ， 也叫生物檢定或生物測(cè)定法 。生物檢定法的主要原則是將供試品與對(duì)照品 (包括中藥，純成分 )在嚴(yán)格規(guī)定的條件下，比較它們對(duì)生物體所產(chǎn)生的反應(yīng)強(qiáng)度，再計(jì)算出中藥或其制劑的劑量標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)檫@種方法不能把它在腸內(nèi)吸收的差別、作用的快慢以及效力的久暫等估計(jì)在內(nèi)。 如對(duì)含皂苷類中藥溶血指數(shù)的測(cè)定 ， 如使用溶血法鑒定柴胡和大葉柴胡；對(duì)含苦味中藥苦味指數(shù)的測(cè)定；對(duì)含蒽醌類大黃的瀉下作用的測(cè)定；對(duì)青黛中靛玉紅 、 兩頭尖中竹節(jié)香附素 A的抗癌活性的測(cè)定；黃芪中黃芪皂苷甲 、 三七中三七皂苷降血壓和擴(kuò)張血管作用的測(cè)定；對(duì)人參中人參多糖 ， 刺五加根中刺五加多糖和紅花多糖的免疫作用的測(cè)定；對(duì)三七抗凝血作用的測(cè)定等 。 3/5/2023 104 DNA遺傳標(biāo)記 ? 這些基因區(qū)域在生物進(jìn)化過程中所受的壓力不同 ， 前者所受選擇壓力大 ， 表現(xiàn)出高度的保守性；后者所受選擇壓力小 ， 表現(xiàn)出較大的差異性 。 3/5/2023 106 （六） mRNA差異顯示鑒定法 ? mRNA差異顯示鑒定法是利用中藥不同組織或細(xì)胞在基因表達(dá) （ gene expression） 上的差異進(jìn)行鑒定的一種方法 。 3/5/2023 107 DNA的分離 ? 好的分離程序，應(yīng)符合 3個(gè)主要標(biāo)準(zhǔn)： ? RFLP（限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性）分析的 DNA，其純度的要求為可用限制性內(nèi)切酶完全酶解并成功地轉(zhuǎn)移到膜上進(jìn)行 Southern雜交；用于 PCR分析的DNA不應(yīng)含干擾 PCR反應(yīng)的污染物。 ? DNA模板 +引物（兩條寡苷酸，分別與特定區(qū)段的DNA的兩條相對(duì)的鏈互補(bǔ)） 引物延伸（產(chǎn)生新鏈）重復(fù) — 初 始 DNA鏈和新 DNA鏈作為模板 — PCR產(chǎn)物（指數(shù)形式增長(zhǎng)）。如果引物 3’端有太多的 G和 C，以產(chǎn)生錯(cuò)配。 ? ５．簡(jiǎn)并性 ＰＣＲ常用來分離親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的物種中的相似基因，使用與目的基因兩個(gè)區(qū)域同源的寡聚核苷酸擴(kuò)增中間的基因片斷。 ? （組織，粉末，顯微常數(shù)、顯微化學(xué)、顯微定量）。 ? 。 ? 紅外干燥器測(cè)定法。 3/5/2023 115 第 6節(jié) 中藥的安全性檢測(cè) ? 中藥的安全性檢測(cè)包括有害物質(zhì)檢查 、 重金屬檢查 、 藥品微生物限量檢驗(yàn) 、 熱原檢查 、 毒性試驗(yàn) (toxicity test)、 刺激試驗(yàn)(irritant test)、 過敏試驗(yàn) 、 對(duì)紅細(xì)胞影響試驗(yàn)等 ， 本節(jié)重點(diǎn)介紹用于中藥材及中成藥的原料藥安全性檢測(cè)的幾項(xiàng)內(nèi)容 。 3/5/2023 116 ? 1． 薄層 — 熒光法 ? 2． 高效液相色譜法 ? 3． 質(zhì)譜法 ? （ 二 ） 農(nóng)藥殘留量的檢測(cè) ? 有機(jī)氯和由機(jī)磷農(nóng)藥 。砷鹽若超過一定量，對(duì)人體就會(huì)產(chǎn)生毒性，故有些中藥材及其制劑都規(guī)定有砷鹽檢查。飲片的藥效組分用經(jīng)方驗(yàn)證 3/5/2023 120 ? （ 1） 有效性指標(biāo) ? 藥效組分的標(biāo)示量 ， ED50。