【正文】 ，1930年以后 ， 物理化學(xué)的分析方法如熒光分析法 、 毛細管像分析法 、 比色法等逐漸應(yīng)用到中藥鑒定中來 。 ? 20世紀(jì) 50年代 ， 色譜技術(shù) 、 光譜技術(shù) 、 電鏡技術(shù)等在中藥分析中的應(yīng)用得到了廣泛的推廣 ， 中藥理化鑒定的系統(tǒng)方法逐漸形成并趨于完善 ， 中藥鑒定學(xué)的理論體系逐漸形成 。 3/5/2023 26 ? 1964年 ， 我國中醫(yī)藥院校開設(shè)了 《 中藥材鑒定學(xué) 》課程； 1977年 ， 由成都中醫(yī)學(xué)院主編出版了全國高等中醫(yī)藥院校的協(xié)編教材 《 中藥鑒定學(xué) 》 ， 并作為中藥專業(yè)的專業(yè)課程；根據(jù)教學(xué)的需要 ， 相繼對《 中藥鑒定學(xué) 》 進行了 3次修訂 （ 1980年 ， 1986年 ，1996年 ） ， 其基本內(nèi)容是研究和探討中藥材的來源 、性狀 、 顯微特征 、 理化鑒別 、 質(zhì)量指標(biāo)和尋找新藥等理論和實踐方面的問題 。 自 1985年 Mullis首創(chuàng)了 PCR技術(shù)之后 ， DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)和 mRNA差異顯示技術(shù)也相繼試用于中藥的品種和質(zhì)量鑒定 。五 ” 期間 ， 組織專家對 223種常用中藥材進行了品種整理和質(zhì)量研究； 1983年 ， 國家組織了全國性中藥資源普查 ， 基本查清了我國中藥資源的現(xiàn)狀 。 3/5/2023 31 ? 中藥鑒定學(xué)作為一個獨立的學(xué)科 ， 已經(jīng)形成了中藥來源鑒定 、 性狀鑒定 、 顯微鑒定 、 理化鑒定和生物鑒定5大方法學(xué)體系 ， 其中生物鑒定法正處于方興未艾的階段 。 3/5/2023 32 上一節(jié)需要掌握的關(guān)鍵問題： ? ? ? ? （鑒定的目的） ? （ 5條） ? 首要任務(wù)；基本任務(wù)；歷史任務(wù)（使命）；戰(zhàn)略任務(wù)；長期任務(wù) ? ? ? 3/5/2023 33 第 3章 中藥的資源 ? 第一節(jié) 中藥的天然資源 ? 第二節(jié) 中藥的人工資源 ? 第三節(jié) 中藥材的資源保護與可持續(xù)利用 3/5/2023 34 ? 中藥資源 (resources of Chinese medicinal materials)是自然資源 (natural resource)的一部分 。 3/5/2023 35 第一節(jié) 天然資源 ? 我國藥用植物 、 藥用動物和藥用礦物的資源總數(shù)約為 13 000種左右 ， 其中藥用植物有 11 000余種 、 藥用動物近 1 600種 ， 藥用礦物近 100種 。 3/5/2023 37 東北產(chǎn)區(qū) ? 包括黑龍江省大部分 、 吉林省和遼寧省的東半部及內(nèi)蒙古自治區(qū)的北部 。 3/5/2023 39 華東產(chǎn)區(qū) ? 包括浙江省 、 江西省 、 上海市 、 江蘇省中部和南部 、 安徽省中部和南部 、 湖北省中部和東部 、 湖南省中部和東部 、福建省中部和北部 ， 以及河南省及廣東省的小部分 。 除了眾多栽培的品種外 ， 尚 有 許 多 野 生 藥 材 ， 如 七 葉 一 枝 花 P a r i s polyphylla Smith. var. chinensis (Franch.) Hara、 茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf、 厚樸 Magnolia officinalis Wils.、 胡黃連 Picrorhiza scrophulariiflora Pennell、 天麻 Gastrodia elata Bl.、 半夏 Pinellia ternate (Thunb.) Breit.、 烏梢蛇 Zaocys dhumnades (Cantor)、雄黃 、 朱砂等 。 3/5/2023 42 內(nèi)蒙古產(chǎn)區(qū) ? 包括黑龍江省中南部 、 吉林省西部 、 遼寧省西北部 、河北及山西省的北部 、 內(nèi)蒙古自治區(qū)中部及東部 。 3/5/2023 43 西北產(chǎn)區(qū) ? 包括新疆自治區(qū)全部 、 青海及寧夏回族自治區(qū)的北部 、 內(nèi)蒙古自治區(qū)西部以及甘肅西部和北部 。 本區(qū)具有許多高山名貴藥材 ， 其中蘊藏量占全國 60%~80%以上的種類有：冬蟲夏草 Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc.、 甘松 Nardostachys chinensis Batal.、掌葉大黃 Rheum palmatum L.、 胡黃連Picrorhiza scrophulariiflora Pennell等 。 3/5/2023 46 第二節(jié) 人工資源 ? 中藥的人工資源就是對中藥材的自然資源所進行的多層次 、 多功能 、 全方位的綜合開發(fā)和利用 。 其主要方法是應(yīng)用細胞全能性規(guī)律 ， 用生物組織或細胞 ， 經(jīng)過培養(yǎng) ， 在試管內(nèi)繁殖試管苗 （ 微繁殖 ） 和保存種質(zhì) 。 3/5/2023 48 中藥飲片的加工與炮制 ? 中藥飲片的加工與炮制是中藥資源開發(fā)利用的深化和提高 ， 其作用在于清潔藥材 ， 利于貯藏；便于調(diào)劑和制劑；消除或降低毒副作用 ， 保證用藥安全；調(diào)整和改變藥物性能 ， 適應(yīng)醫(yī)療需要；引藥歸經(jīng) ， 提高治療效果等 。 3/5/2023 49 中成藥的生產(chǎn) ? 中成藥的生產(chǎn)是中藥資源深度開發(fā)的重要方式 。 2023年的中成藥總產(chǎn)值已增至 400多億元人民幣 。 這些藥材在中藥經(jīng)營行業(yè)中被稱為 “ 道地藥材 ” (authentic and superior medicinal herbals)。 傳統(tǒng)的道地藥材常按產(chǎn)地不同而分為 “ 川藥 ” 、 “ 浙藥 ” 、 “ 云藥 ” 、“ 關(guān)藥 ” 、 “ 懷藥 ” 、 “ 廣藥 ” 、 “ 貴藥 ” 或“ 黔藥 ” 、 “ 南藥 ” 、 “ 西藥 ” 等商品 。 然而藥用資源是開發(fā)最早的自然資源之一 ， 因此資源消耗很大 。 3/5/2023 54 ? 因此保護中藥材資源已成為亟待完成的重要任務(wù) 。 有效地保護中藥材資源 ， 應(yīng)主要開展下列工作： 3/5/2023 55 中藥材資源保護的具體措施 ? ， 建立和完善以藥用植物 、 藥用動物為主的自然資源保護區(qū) 。 例如 ，在長白山自然保護區(qū) ， 野生人參為國家二級保護植物 ， 嚴(yán)禁采挖 。 資源的利用是指人們對已開發(fā)出來的資源進行一定目的的使用 ， 如進行加工和制成新產(chǎn)品等 。 如甘草提取甘草酸后的殘渣可以再提甘草黃酮類成分 ， 作為化妝品添加劑和抗氧劑；甘草地上部分為優(yōu)良飼料 ， 甘草粉加工品大量用于食品及煙草工業(yè) 。 ? 、 民間用藥 。 ? ， 或者從古代本草中發(fā)掘失落品種 。 本章將重點討論中藥材的采收和產(chǎn)地加工與質(zhì)量的關(guān)系 。 兩者是相輔相成的 ， 絕不可弧立地看待 。 3/5/2023 64 二、中藥材的現(xiàn)代采收原則 ? 中藥的療效取決于其有效成分含量多少，在其有效成分含量最高時采收，便可得到優(yōu)質(zhì)的藥材。 ? ，有的且含一定量的毒性成分 ， 要考慮有效成分的總含量及毒性成分的含量 ， 當(dāng)有效成分的總含量為最大值 、 毒性成分的總含量 。如果貯藏中保管不當(dāng)，中藥材就可能會發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象：蟲蛀、生霉、變色、泛油等。 3/5/2023 69 防治措施的要點： ? 干燥，避光，冷藏，通風(fēng)。 《 中華人民共和國藥典 》 是國家藥品標(biāo)準(zhǔn) ， 它規(guī)定了我國藥品的來源（ source） 、 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) (quality standard)和檢驗方法 ， 是國家對藥品生產(chǎn) 、 經(jīng)營 、 使用 、 檢驗和監(jiān)督管理的法定依據(jù) 。 ? 一 、 樣品登記 ? 二、取樣 ? 。 鑒定程序通常按上述排列依次進行 。 中藥的雜質(zhì)主要分為來源性雜質(zhì)和摻入性雜質(zhì)兩大類 ， 來源性雜質(zhì)是指來源與規(guī)定相同 ， 但其性狀或藥用部位與規(guī)定不符；摻入性雜質(zhì)是指來源與規(guī)定不同的物質(zhì) ， 如在采收 、 加工和貯藏等過程中混入的無機物或人為摻入的非藥用物質(zhì) 。各類雜質(zhì)確定后，應(yīng)分別稱重，計算出被檢中藥中雜質(zhì)的含量?；b定法就是應(yīng)用植物 、 動物或礦物形態(tài)和分類學(xué)等方面的知識 ， 對中藥的來源或原料藥進行鑒定 ， 確定其正確的學(xué)名 （ 或礦物的名稱 ） 或中成藥的原料組成 ， 以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確的一種方法 。 ? （ 2） 描述的方法 描述時要準(zhǔn)確使用植物形態(tài)學(xué)知識及專業(yè)術(shù)語 ， 要按上述觀察的順序依次描述 ， 并要詳細記錄 。 它包括看 、量 、 嗅 、 嘗 、 試 5種主要的傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別法 。 3/5/2023 82 性狀特征的描述方法 ? 通常采用兩種方法進行：一是使用生物學(xué)或礦物學(xué)的形態(tài)、組織學(xué)等名詞；二是采用廣大醫(yī)藥工作者在長期實踐中積累起來的生動、形象的經(jīng)驗鑒別術(shù)語。 ? 。在鑒定過程中，以采用顯微鏡觀察動、植物的組織構(gòu)造、細胞形狀、內(nèi)含物的特征以及礦物的光學(xué)特性等為主要內(nèi)容。 按照鑒定的方法可分為組織鑒定 、 粉末鑒定 、 顯微常數(shù)測定和顯微定量等 。大小和數(shù)量的描述 。 電子顯微鏡主要分為透射電鏡和掃描電鏡 （ s c a n n i n g e l e c t r o n microscope,SEM） 兩大類 。它具有放大范圍廣、分辨率高（ 100197。 3/5/2023 90 四、理化鑒定法 ? 理化鑒定 (physical and chemical identification)法就是利用中藥中存在某些化學(xué)成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過化學(xué)的、物理的或儀器分析的手段，鑒定其真?zhèn)?、純度、?nèi)在質(zhì)量，以及有害物質(zhì)的有無或含量多少。 定性鑒定法根據(jù)性質(zhì)又可以分為物理分析法 、 化學(xué)分析法和物理化學(xué)分析法 。 ? 是利用中藥或其所含的化合物對生物體（ anism） 的作用強度 ， 以及用 DNA特異性遺傳標(biāo)記特征和基因表達差異等來鑒別中藥的品種和質(zhì)量的一種方法 。 ? 常用的方法有免疫鑒定法 、 細胞生物學(xué)鑒定法 、 藥物效價測定法和單純指標(biāo)測定法等 。 本方法具有特異性強的特點 ， 可以準(zhǔn)確地進行中藥的品種鑒別 。 本法根據(jù)染色體的排列 ， 制成核型模式圖；或用“ 不對稱核型分類 ” 標(biāo)準(zhǔn)確定其核型 ， 并與染色體的背景資料比較 ， 達到鑒定的目的 。 藥物效價測定法 ， 也叫生物檢定或生物測定法 。生物檢定法的主要原則是將供試品與對照品 (包括中藥，純成分 )在嚴(yán)格規(guī)定的條件下，比較它們對生物體所產(chǎn)生的反應(yīng)強度，再計算出中藥或其制劑的劑量標(biāo)準(zhǔn)。因為這種方法不能把它在腸內(nèi)吸收的差別、作用的快慢以及效力的久暫等估計在內(nèi)。 如對含皂苷類中藥溶血指數(shù)的測定 ， 如使用溶血法鑒定柴胡和大葉柴胡；對含苦味中藥苦味指數(shù)的測定；對含蒽醌類大黃的瀉下作用的測定；對青黛中靛玉紅 、 兩頭尖中竹節(jié)香附素 A的抗癌活性的測定；黃芪中黃芪皂苷甲 、 三七中三七皂苷降血壓和擴張血管作用的測定；對人參中人參多糖 ， 刺五加根中刺五加多糖和紅花多糖的免疫作用的測定；對三七抗凝血作用的測定等 。 3/5/2023 104 DNA遺傳標(biāo)記 ? 這些基因區(qū)域在生物進化過程中所受的壓力不同 ， 前者所受選擇壓力大 ， 表現(xiàn)出高度的保守性；后者所受選擇壓力小 ， 表現(xiàn)出較大的差異性 。 3/5/2023 106 （六） mRNA差異顯示鑒定法 ? mRNA差異顯示鑒定法是利用中藥不同組織或細胞在基因表達 （ gene expression） 上的差異進行鑒定的一種方法 。 3/5/2023 107 DNA的分離 ? 好的分離程序，應(yīng)符合 3個主要標(biāo)準(zhǔn)： ? RFLP（限制性片斷長度多態(tài)性）分析的 DNA，其純度的要求為可用限制性內(nèi)切酶完全酶解并成功地轉(zhuǎn)移到膜上進行 Southern雜交；用于 PCR分析的DNA不應(yīng)含干擾 PCR反應(yīng)的污染物。 ? DNA模板 +引物（兩條寡苷酸，分別與特定區(qū)段的DNA的兩條相對的鏈互補） 引物延伸（產(chǎn)生新鏈）重復(fù) — 初 始 DNA鏈和新 DNA鏈作為模板 — PCR產(chǎn)物（指數(shù)形式增長）。如果引物 3’端有太多的 G和 C，以產(chǎn)生錯配。 ? ５．簡并性 ＰＣＲ常用來分離親緣關(guān)系較遠的物種中的相似基因，使用與目的基因兩個區(qū)域同源的寡聚核苷酸擴增中間的基因片斷。 ? （組織，粉末，顯微常數(shù)、顯微化學(xué)、顯微定量）。 ? 。 ? 紅外干燥器測定法。 3/5/2023 115 第 6節(jié) 中藥的安全性檢測 ? 中藥的安全性檢測包括有害物質(zhì)檢查 、 重金屬檢查 、 藥品微生物限量檢驗 、 熱原檢查 、 毒性試驗 (toxicity test)、 刺激試驗(irritant test)、 過敏試驗 、 對紅細胞影響試驗等 ， 本節(jié)重點介紹用于中藥材及中成藥的原料藥安全性檢測的幾項內(nèi)容 。 3/5/2023 116 ? 1． 薄層 — 熒光法 ? 2． 高效液相色譜法 ? 3． 質(zhì)譜法 ? （ 二 ） 農(nóng)藥殘留量的檢測 ? 有機氯和由機磷農(nóng)藥 。砷鹽若超過一定量，對人體就會產(chǎn)生毒性，故有些中藥材及其制劑都規(guī)定有砷鹽檢查。飲片的藥效組分用經(jīng)方驗證 3/5/2023 120 ? （ 1） 有效性指標(biāo) ? 藥效組分的標(biāo)示量 ， ED50。