生物材料(衛(wèi)檢)-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 發(fā)，指甲以及組織臟器等的總稱。尿液可分為全日尿，晨尿，定時(shí)尿和隨時(shí)尿。 （3）檢出限的表示方法 濃度或絕對(duì)量表示，用濃度表示時(shí)要說(shuō)明方法取樣體積。（3）用標(biāo)準(zhǔn)方法或權(quán)威方法比較：①兩個(gè)方法均值相對(duì)誤差應(yīng)小于10% ②t檢驗(yàn) 在確定一個(gè)置信水平條件，兩方法測(cè)定無(wú)明顯差異 5）干擾試驗(yàn) ：如果有干擾，要找出消除干擾的方法 6）樣品的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) ：時(shí)間：當(dāng)天，3天，1周，2周 溫度：室溫，普通冰箱冷藏（4℃），冷凍保存（8℃），低溫冰箱（20℃） 1）新方法的驗(yàn)證：必須是另一單位①研制方提供方法所有技術(shù)材料 ②驗(yàn)證內(nèi)容：四項(xiàng) 線性范圍，精密度，準(zhǔn)確度，樣品的穩(wěn)定性。 易揮發(fā)性有機(jī)溶劑從呼吸氣中排出較多。 檢驗(yàn)指標(biāo)的選擇與分類（1） 、選擇的基本要求 特異性好；具有良好的劑量—效應(yīng)關(guān)系；穩(wěn)定性好； 有準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)方法。l 呼出氣 1）特點(diǎn) ①優(yōu)點(diǎn)：操作方便、干擾物少，非損傷性 ②缺點(diǎn)：a、被測(cè)物的含量比較低 b、肺泡氣中水分對(duì)某些測(cè)定有影響 c、肺部“死腔”中環(huán)境空氣對(duì)肺泡氣稀釋不穩(wěn)定，影響測(cè)定結(jié)果的解釋；2）適用性 ①監(jiān)測(cè)僅限于揮發(fā)性物質(zhì) ②主要用于測(cè)定化學(xué)物質(zhì)原形 ③呼出氣監(jiān)測(cè)結(jié)果能反映采樣期間車間空氣的平均濃度； 3）呼出氣的分類 混合呼出氣、終末呼出氣（肺泡氣） 第一階段呼出的是空氣，第二階段混合呼出氣，第三階段肺泡氣。 3).?反腐 ?測(cè)尿中汞或揮發(fā)性有機(jī)物要盡快測(cè)定?要保存5天以上的，最好冷凍血樣1）采集 （1）、全血；要抗凝 （2）、血清（血漿）或紅細(xì)胞 2)注意事項(xiàng) ??（取下）再擠出針管時(shí)不能太快?取末梢血要避免擠壓采集部位，自然流出棄去第一滴血④ 3)血樣的運(yùn)輸與保存 ?避免振動(dòng)和溫度的改變 ?血樣冷凍肯定溶血采集血清或血漿時(shí)，應(yīng)分離再保存 ?臨時(shí)存放4℃過(guò)夜，長(zhǎng)時(shí)間保存要冷凍 ④測(cè)酶活性要采集后盡快分析. 1）采集方法：?先深呼吸2~3次，再恢復(fù)正常呼吸時(shí)采集呼出氣?采集肺泡氣只收集末端呼出氣2）注意事項(xiàng)：?受檢者必須時(shí)肺功能正常者 ?要選擇對(duì)被測(cè)物吸附小的容器 ?要在正常呼吸狀態(tài)下收集樣品呼出過(guò)程不能有阻力 ④采樣的時(shí)機(jī)要依被測(cè)物代謝速度決定三、生物材料樣品的預(yù)處理原則（一）無(wú)機(jī)物分析的樣品處理稀釋法.1）.常用的稀釋劑。（二）鉛接觸的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) 血鉛：直接反映近期接觸鉛的情況 尿鉛：反應(yīng)機(jī)體中鉛的負(fù)荷量，是鉛中毒的輔助診斷指標(biāo) 生物效應(yīng)指標(biāo)：1）尿中σ—ALA 2）血中鉛原卟啉三、樣品的采集與保存——用于尿鉛血鉛的測(cè)定 . ①采樣時(shí)間的限定 ②隨即采集一次尿樣 ③按1%比例加HNO3，4℃可保存兩周。 （2）FFAP柱，分離苯酚和對(duì)甲酚 說(shuō)明：（1）3ml乙醚萃取要避免乙醚揮發(fā)，分層后不是3ml，加乙醚補(bǔ)至3ml （2）可用內(nèi)標(biāo)志法定量四、甲苯、二甲苯 （一） 代謝及生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) 1）代謝 (1)甲苯 ①約15%~25%以原型呼出約1%從尿中排出 ②約80%代謝甲苯→[O]苯甲酸→馬尿酸 馬尿酸排出的半減期為2~3人。重氮化試劑：亞硝酸鹽 偶和顯色劑：鹽酸萘乙二胺 操作要點(diǎn)(1)樣品處理：①鹽酸酸化沸水浴水解約1人 ②萃取先用NaOH調(diào)中性，用乙酸乙酯萃取，再用鹽酸溶液反萃取。排出：①代謝產(chǎn)物與葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合，隨尿排出。③還原 用三氯化鈦將其還原成對(duì)氨基酚。顯色測(cè)定 ①先加鄰甲酚，再加三氯化鈦溶液。說(shuō)明 1）尿液采集后，盡快加鹽酸，10o c以下運(yùn)輸。3）各種代謝產(chǎn)物以結(jié)合態(tài)隨尿排出。 ①約98%經(jīng)肺排出 ②約2%代謝轉(zhuǎn)化成三氯乙酸 (二)生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) ：①尿中三氯乙酸和三氯乙醇聯(lián)合作為三氯乙烯接觸的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) ②呼出空氣中三氯乙烯特異性指標(biāo)：①尿中三氯乙酸 非特異性 ②呼出空氣中 特異性二、尿中三氯乙酸的測(cè)定（一）頂空GC法 原理 ①在密閉頂空瓶中 三氯乙酸三氯乙烷②抽取頂空氣注入氣相色譜儀 ③FID檢測(cè) 內(nèi)標(biāo)法定量 內(nèi)標(biāo)物為正丁醇第七章：農(nóng)藥接觸指標(biāo)的測(cè)定第一節(jié)、有機(jī)磷農(nóng)藥 二代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)（一）、毒性效應(yīng) 抑制膽堿酯酶的活性造成乙酰膽堿過(guò)量，導(dǎo)致膽堿能神經(jīng)過(guò)度興奮，使中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂（二）、膽堿酯酶 1）指的是乙酰膽堿酯酶和紅細(xì)胞膽堿酯酶 2）主要存在于神經(jīng)組織和細(xì)胞中 3）對(duì)乙酰膽堿有很高的特異性 4）在血中活性占80%以上假性膽堿酯酶 1）指的是血清膽堿酯酶 2）存在于血清中 3）是非特異性膽堿酯酶 4）在血中活性約20%（三）生物監(jiān)測(cè)指標(biāo) ：血中膽堿酯酶活性——效應(yīng)性指標(biāo) （三全血中膽堿酯酶的活性測(cè)定）（1）三氯化鐵分光光度法 ：①乙酰膽堿乙酸+膽堿②剩余的乙酰膽堿與羥胺反應(yīng) 乙酸膽堿乙酰羥胺③顯色 乙酰羥胺紅色物質(zhì) 520nm測(cè)定吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量標(biāo)準(zhǔn)系列液——乙酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)系列液樣品處理及測(cè)定 1）樣品處理：①將A、B兩個(gè)樣品管37℃水浴5min ②向A管加入乙酰膽堿標(biāo)液1ml，37℃水浴中精確反應(yīng)30min（每隔10min振搖一次）取出 ③立即向A、B管各加膽堿羥胺液4ml ④再向B管加乙酰膽堿標(biāo)液1ml 2）測(cè)定 向A、B管及標(biāo)準(zhǔn)管各加鹽酸（1+2）2ml 加2ml FeCl3液振搖過(guò)濾 520nm測(cè)定吸光度計(jì)算：被水解的乙酰膽堿吸光度=ABAA以此吸光度（差值）查標(biāo)準(zhǔn)曲線得到被水解乙酰膽堿量（μmol）此值為40ul血37℃反應(yīng)30min膽堿酯酶活性絕對(duì)值（G）全血膽堿酯酶活性（μmol/ml）=c/ （絕對(duì)值）全血膽堿酯酶活性相對(duì)值（%）=C/正常人血膽堿酯酶活性注意事項(xiàng)：P116（2）DTNB分光光度法 ： 硫代乙酰膽堿試劑測(cè)定血清中酶活性
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