【正文】 ；（ 2） 單位；（ 3）如果多肽中無二硫鍵存在，經(jīng)胰蛋白酶水解后應(yīng)得 4個(gè)肽段；如果存在一個(gè)二硫鍵應(yīng)得 3個(gè)肽段并且個(gè)肽段所帶電荷不同，因此可用離子交換層析、電泳等方法將肽段分開，鑒定出含二硫鍵的肽段，測定其氨基酸順序，便可確定二硫鍵的位置 ] 解：（ 1）此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時(shí)，與 FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生α DNP氨基酸，說明此肽不含游離末端 NH2，即此肽為一環(huán)肽； （ 2）糜蛋白酶斷裂 Phe、 Trp和 Tyr等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵，由已知兩肽段氨基酸組成（ Ala、Tyr、 Ser和 Pro、 Phe、 Lys、 Arg）可得： ( )( )Tyr和 ( )( )( )Phe； （ 3）由（ 2）得的兩肽段分別與 FDNB反應(yīng)，分別產(chǎn)生 DNPSer和 DNPLys 可知該兩肽段的 N末端分別為 Ser和 Lys，結(jié)合（ 2）可得： SerAlaTyr和 Lys( )( )Phe； （ 4）胰蛋白酶專一斷裂 Arg或 Lys殘基的羧基參與形成的肽鍵，由題生成的兩肽段氨基酸組成（ Arg、Pro 和 Phe、 Tyr、 Lys、 Ser、 Ala）可得： ProArg和 ( )( )( )( )Lys； 綜合（ 2）、（ 3）、（ 4）可得此肽一級結(jié)構(gòu)為： LysProArgPheSerAlaTyr 所有試卷資料免費(fèi)下載 corundum 整理 7 三肽 Lys Lys Lys的 pI 值必定大于它的任何一個(gè)個(gè)別基團(tuán)的 pKa值，這種說法是否正確？為什么？[正確，因?yàn)榇巳奶幱诘入婞c(diǎn)時(shí)，七解離集團(tuán)所處的狀態(tài)是 C末端 COO（ pKa=）， N末端 NH2（ pKa≌）， 3個(gè)側(cè)鏈 3（ 1/3ε NH3+）（ pKa=） ,因此 pI最大的 pKa值（ ） ] 解：嗜熱菌蛋白酶作用專一性較差，根據(jù)題中已知條件： （ 1）消化原多肽得到（ Ala、 Cys Val），說明鏈 1在 2位 Cys 后及 11位 Val前發(fā)生斷裂， 2位 Cys與 12位 Cys之間有二硫鍵； （ 2）由鏈 1序列可得該肽段序列為： PheProLysArg； （ 3）由（ 1）（ 2）可知該肽段 (Arg Cys Trp、 Tyr)中必有一 Cys來自鏈 2，另 一 Cys為鏈 1中 8位 Cys，即鏈 1中 8位 Cys與鏈 2中的一個(gè) Cys有二硫鍵； （ 4）嗜熱菌蛋白酶能水解 Tyr、 Phe等疏水氨基酸殘基，故此肽（ Cys Phe）來自鏈 2，結(jié)合（ 3）中含 Tyr，可知（ 3）中形成的二硫鍵為鏈 1 8位 Cys與鏈 2中 3位 Cys與鏈 2中 3位 Cys之間；（ 4）中（ CysPhe）說明鏈 2中 1位 Cys與 5位 Cys中有二硫鍵。 [（ 1）兩個(gè)；（ 2）二硫鍵的位置可能是 13和 1115 或 111和 315 或 115和 311，第一種情況，用胰蛋白酶斷裂將產(chǎn)生兩個(gè)肽加 Arg；第二種情況和第三種，將產(chǎn)生一個(gè)肽加 Arg，通過二硫鍵部分氧化可以把后兩種情況區(qū)別開來。 120=2022個(gè)。 [在伸展的蛋白質(zhì)中大多數(shù)氫鍵的供體和接納體都與水形成氫鍵。時(shí)可知該螺旋為左手性，每圈殘基數(shù)為 。 ] 101殘基的蛋白質(zhì)。該蛋白質(zhì)的折疊形式在 25℃時(shí)是否穩(wěn)定？ [（ a） W=2200= 1060；（ b）Δ S 折疊 = kj/（ K但是在正常情況下 A 是以單體形式存在的，而 B 是以四聚體（ B4）形式存在的，問 A 和 B 的氨基酸組成可能有什么差別。 RRPVVLMAACLRPVVFITYGDGGTYYHWYH [殘基 411是一個(gè)α螺旋，殘基 1419和 2430是β折疊片。大的組分占總蛋白質(zhì)的三分之二，具有催化活性。 ] ，直接用 SDS 凝膠電泳分析（見第 7 章）時(shí)，它的區(qū)帶位于肌紅蛋白（相對分子質(zhì)量為 16900）和β 乳球蛋白（相對分子質(zhì)量 37100）兩種蛋白之間，當(dāng)這個(gè)毒素蛋白用β 巰基乙醇和碘乙酸處理后，在 SDS 凝膠電泳中仍得到一條區(qū)帶，但其位置靠近標(biāo)記蛋白細(xì)胞素（相對分子質(zhì)量為13370），進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，該毒素蛋白與 FDNB反應(yīng)并酸水解后，釋放出游離的 DNPGly和 DNPTyr。穩(wěn)定締合的是哪種類型的相互作用（同種或異種）？（ b）假設(shè)四聚體，如血紅蛋白，是由兩個(gè)相同的單位（每個(gè)單位含α和β兩種鏈）組成的。（ 2）該復(fù)合物分 3個(gè)階段形成：第一階段，多肽 A和 B的合成；第二階段， AB二聚體的形成；第三階段， 6個(gè) AB二聚體裝配成復(fù)合物。（ a）哪個(gè)蛋白質(zhì)對配體 X的親和力更高？（ b）將這兩個(gè)蛋白質(zhì)的 Kd轉(zhuǎn)換為結(jié)合常數(shù) Ka。 （ b） 肺中 [100 torr p（ O2） ]結(jié)合的氧有百分之多少輸送給組織 [30 torr p（ O2） ]？ （ c） 如果在毛細(xì)血管中 pH 降到 ，利用圖 617 數(shù)據(jù)重新估算（ b）部分。在這些條件下輸氧效率（ Y 肺 Y 毛細(xì)血管 =Δ Y）是多少？除 n= 外，重復(fù)上面計(jì)算。如果這樣的血用于輸血可能會產(chǎn)生什么后果？ [貯存過時(shí)的 紅血球經(jīng)酵解途徑代謝 BPG。為什么 HbA具有這一效應(yīng)？ [去氧 HbA含有一個(gè)互補(bǔ)部位，因而它能加到去氧 HbS纖維上。（ a）結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)自由能（ 25℃和 pH7時(shí)）是多少？（ b）此 Fab的親和力結(jié)合常數(shù)是多少？（ c）從該復(fù)合體中釋放半抗原的速度常數(shù)為 所有試卷資料免費(fèi)下載 corundum 整理 11 120S1。 （ b）根據(jù) Scatchard方程，利用下列數(shù)據(jù)作圖求出抗體 抗原反應(yīng)的 n和 Ka值。 （ a） 估算在松弛和收縮時(shí)粗絲和細(xì)絲的重疊情況。一種純酶按重量計(jì)算含亮氨酸 %和異亮氨酸 %，問其最低相對分子質(zhì)量是多少？ [13110； 15870] 解：（ 1）蛋白質(zhì) Mr=247。假設(shè)某化合物的分配系數(shù)，（ a） Kd=1；（ b）Kd=50。 [肌球蛋白、過氧化氫酶、血清清蛋白、胰凝乳蛋白酶原、肌紅蛋白、細(xì)胞色素 C] 5題所述的，從分子排阻層析柱上洗脫細(xì)胞色素 C、β 乳球蛋白、未知蛋白和血清紅蛋白時(shí)，其洗脫體積分別為 11 5 37 和 24ml，問未知蛋白的 Mr 是多少？假定所有蛋白質(zhì)都是球形的，并且都處于柱的分級分離范圍。 PI 值： Ala： Ser： Phe： Leu： Arg： Asp： His： [（ 1） Ala、 Ser、 Phe 和 Leu 以及 Arg 和 His 向負(fù)極， Asp 移向正極；（ 2）電泳時(shí)，具有相同電荷的較大分子比較小分子移動得慢，因?yàn)殡姾?/質(zhì)量之比較小，因而引起每單位質(zhì)量遷移的驅(qū)動力也較小。對適當(dāng)?shù)目瞻诇y定 595nm波長處的光吸收（ A595）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算出 中的蛋白質(zhì)濃度。 ？酶的專一性有哪些？如何解釋酶作用的專一性？研究酶的專一性有何意義？ 答：酶的專一性是指酶對催化的反應(yīng)和反映物有嚴(yán) 格的選擇性。它有利于闡明生物體內(nèi)有序的代謝過程，酶的作用機(jī)制等。通過透析方 法可以除去，如輔酶Ⅰ和輔酶Ⅱ等。 ５ .酶分哪幾大類？舉例說明酶的國際系統(tǒng)命名法及酶的編號。根據(jù)底物中別所用的基團(tuán)或鍵的特點(diǎn)將每一大類分為若干亞類，每一個(gè)亞類又按順序變成 3??等數(shù)字；每一個(gè)亞基可再分亞亞類，仍用 3??編號，每一個(gè)酶的分類編號由 4 個(gè)數(shù)字組成，數(shù)字間由由“ 和比活力？測定酶活力應(yīng)注意什么？為什么測定酶活力時(shí)以測定初速率為宜，并且底物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于酶濃度？ 答：酶活力指酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力，其大小可用在一定條件下所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率來表示；酶的比活力代表酶的純度，根據(jù)國際酶學(xué)委員會的規(guī)定比活力用每 mg 蛋白質(zhì)所含的酶活力單位數(shù)表示。 底物濃度太低時(shí)， 5%以下的底物濃度變化實(shí)驗(yàn)上不易測準(zhǔn)，所以在測定酶的活力時(shí)，往往使底物濃度足夠大，這樣整個(gè)酶反應(yīng)對底物來說是零級反應(yīng)，而對酶來說卻是一級反應(yīng)，這樣測得的速率就比較可靠地反映酶的含量。酶 RNA 的發(fā)現(xiàn)，提出了生物大分子和生命起源的新概念，無疑促進(jìn)對生物進(jìn)化和生命起源的研究。 （ 3） 活化能：在一定溫度下 1mol底物全部進(jìn)入活化狀態(tài)所需要的自由能（ kJ/mol） （ 4） 酶的轉(zhuǎn)化數(shù)：在一定條件下每秒鐘每個(gè)酶分子轉(zhuǎn)換底物的分子數(shù)。 （ 8） 誘導(dǎo)契合說： 1958年 Koshland提出，當(dāng)酶分子與底物分子接近時(shí)，酶蛋白受底物分子誘導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生有利于底物結(jié)合的變化，酶與底物在此基礎(chǔ)上互補(bǔ)契合進(jìn)行反應(yīng)。 所有試卷資料免費(fèi)下載 corundum 整理 15 AgNO3對在 10ml 含有 ，需用 mol AgNO3，求該酶的最低相對分子質(zhì)量。 [1/（ 92 103） ]= 40單位的某種酶，其轉(zhuǎn)換數(shù)為 6 104min1，試計(jì)算 該酶在細(xì)胞內(nèi)濃度（假設(shè)新鮮組織含水 80%，并且全部在細(xì)胞內(nèi)）。它的一個(gè)活力單位規(guī)定為：在標(biāo)準(zhǔn)測定條件下， 37℃、 15min內(nèi)水解 10μ mol焦磷酸所需要的酶量。 mol）酶活性中心 ] 解：（ 1） 2800 [（ 10 106） /（ 15 60） ]= 105 mol （ 2）（ 1 103） /（ 120 103） 6=5 108 mol （ 3） {（ 105） /[（ 1 103） /（ 120 103） ]}/6=622 25mg 蛋白酶粉配制成 25ml 酶溶液，從中取出 酶液，以酪蛋白為底物，用 Folin酚比色法測定酶活力，得知每小時(shí)產(chǎn)生 1500μ g 酪氨酸。 [， 105U] 解：（ 1）（ ） /（ 2 25/25） = （ 1500/60） /（ 25/25） =250U （ 2） 250/=400U/mg （ 3） [（ 1 25/25） ] 103= 10