【正文】 ysine) Lys K 天冬酰氨 (asparagines) Asn N 甲 硫 氨 酸 ( 蛋氨酸 )(methionine) Met M 天冬氨酸 (aspartic acid) Asp D 苯丙氨酸 (phenylalanine) Phe F 半胱 氨酸 (cysteine) Cys C 脯氨酸 (praline) Pro P 谷氨酰氨 (glutamine) Gln Q 絲氨酸 (serine) Ser S 谷氨酸 (glutamic acid) Glu E 蘇氨酸 (threonine) Thr T 甘氨酸 (glycine) Gly G 色氨酸 (tryptophan) Trp W 組氨酸 (histidine) His H 酪氨酸 (tyrosine) Tyr Y 異亮氨酸 (isoleucine) Ile I 纈氨酸 (valine) Val V Asn 和 /或 Asp Asx B Gln和 /或 Glu Gls Z 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 5 解： pH = pKa + lg20% pKa = (見表 33， P133) pH = + lg20% = 解： pH = pKa + lg2/3 pKa = pH = + = 計算下列物質(zhì) ： (a)亮氨酸鹽酸鹽； (b)亮氨酸鈉鹽； (c)等電亮氨酸。 [(a)約 ,(b)約 , (c)約 ] 解： pI = 1/2（ pKa1+ pKa2） pI(Ala) = 1/2（ +） = pI(Cys) = 1/2（ +） = pI(Glu) = 1/2（ +） = pI(Ala) = 1/2（ +） = 解： pH1=pKa1+lg(7/3)= pH2=pKa2+lg(3/7)= 將丙氨酸溶液（ 400ml）調(diào)節(jié)到 ，然后向該溶液中加 入過量的甲醛，當所得溶液用堿反滴定至 時，消耗 。問起始溶液中丙氨酸的含量為多少克？ [] 解：由 pH=pK1+lg（ His2+/） =pKr+lg（ His+/His2+） =pK2+lg（ His0/ His+） 得 His2+為 104， His+為 ， His0為 104 說明用含一個結(jié)晶水的固體組氨酸鹽酸鹽（相對分子質(zhì)量 =；咪唑基 pKa=）和 1mol/L KOH 配制 [取組氨酸鹽酸鹽 ()，加入 352ml 1mol/L KOH，用水稀釋至 1L] 解：茚三酮在弱酸性溶液中與α 氨基酸共熱，引起氨基酸氧化脫氨脫羧反映，（其反應化學式見 P139），其中，定量釋放的 CO2可用測壓法測量，從而計算出參加反應的氨基酸量。 1 L亮氨酸溶液（ ）在 20cm 旋光管中測得的旋光度為 +。計算 L亮氨酸在6mol/L HCl 中的比旋（ [a]）。 [[a]=+] 1標出異亮 氨酸的 4個光學異構(gòu)體的（ R， S）構(gòu)型名稱。 [參考圖 315] 1解：根據(jù)逆流分溶原理，可得： 對于 Gly： Kd = CA/CB = 4 = q(動相 )/p（靜相） p+q = 1 = (1/5 + 4/5) 4個分溶管分溶 3次：（ 1/5 + 4/5） 3=1/125+2/125+48/125+64/125 對于 Phe： Kd = CA/CB = 2 = q(動相 )/p（靜相） p+q = 1 = (1/3 + 2/3) 4個分溶管分溶 3次：（ 1/3 + 2/3） 3=1/27+6/27+12/27+8/27 故利用 4個分溶管組成的分溶系統(tǒng)中，甘氨酸和苯丙氨酸各在 4管和第 3管中含量最高，其中： 第 4管： Gly： 64/125 100= mg Phe： 8/27 81=24 mg 第 3管： Gly： 48/125 100= mg Phe： 12/27 81=36 mg 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 6 1指出在正丁醇：醋酸：水的系統(tǒng)中進行紙層析時，下列混合物中氨基酸的相對遷移率（假定水相的 pH為 ）： (1)Ile, Lys。 (2)Phe, Ser (3)Ala, Val, Leu。 (4)Pro, Val (5)Glu, Asp。 (6)Tyr, Ala, Ser, His. [Ile lys； Phe, Ser； Leu Val Ala,； Val Pro； GluAsp； Tyr AlaSer≌ His] 解：根據(jù) P151 圖 325可得結(jié)果。 15．解：在 pH3 左右，氨基酸與陽離子交換樹脂之間的靜電吸引的大小次序是減刑氨基酸 (A2+)中性氨基酸 (A+)酸性氨基酸 (A0)。因此氨基酸的洗出順序大體上是酸性氨基酸、中性氨基酸，最后是堿性氨基酸，由于氨基酸和樹脂之間還 存在疏水相互作用，所以其洗脫順序為： Asp, Thr, Gly, Leu, Lys。 第四章 蛋白質(zhì)的共價結(jié)構(gòu) 習題 ： 1012022/120=10100 有解： N末端分析： FDNB 法得： Asp； C末端分析：羧肽酶法得： Val； 胰蛋白酶只斷裂賴氨酸或精氨酸殘基的羧基形成的肽鍵，得到的是以 Arg 和 Lys 為 C末端殘基的肽斷。酸水解使 Asn → Asp+ NH4+ ， 由 已 知 條 件 （ Lys 、 Asp 、 Glu 、 Ala 、 Tyr ） 可 得 ：Asn( )( )( )Lys( )( )Val； FDNB 法分析 N末端得 DNPHis，酸水解使 Gln→ Glu+NH4+由已知條件（ His、 Glu、 Val）可得：Asn( )( )( )LysHisGlnVal； 糜蛋白酶斷裂 Phe、 Trp和 Tyr等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵。由題，得到的一條肽（ Asp、 Ala、Tyr）結(jié)合（ 3）、（ 4）可得該肽的氨基酸序列為： AsnAlaTyrGluLysHisGlnVal 3 、 某 多 肽 的 氨 基 酸 序 列 如 下 ： GluValLysAsnCysPheArgTrpAspLeuGlySerLeuGlu AlaThrCysArgHisMetAspGlnCysTyrProGlyGlu_GluLys。（ 1）如用胰蛋白酶處理，此多肽將產(chǎn)生幾個肽？并解釋原因（假設沒有二硫鍵存在）；（ 2）在 時，此多肽的凈電荷是多少單位？說明理由（假設 pKa值：α ；α NH3+； Glu和 Asp側(cè)鏈基 ； Lys和 Arg側(cè)鏈基 ； His側(cè)鏈基 ； Cys 側(cè)鏈基 ； Tyr 側(cè)鏈基 ）；（ 3）如何判斷此多肽是否含有二硫鍵？假如有二硫鍵存在，請設計實驗確定 5， 17 和 23 位上的 Cys 哪兩個參與形成？ [（ 1） 4 個肽；（ 2） 單位；（ 3）如果多肽中無二硫鍵存在，經(jīng)胰蛋白酶水解后應得 4個肽段；如果存在一個二硫鍵應得 3個肽段并且個肽段所帶電荷不同，因此可用離子交換層析、電泳等方法將肽段分開，鑒定出含二硫鍵的肽段，測定其氨基酸順序，便可確定二硫鍵的位置 ] 解：（ 1）此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時，與 FDNB反應不產(chǎn)生α DNP氨基酸，說明此肽不含游離末端 NH2，即此肽為一環(huán)肽； （ 2）糜蛋白酶斷裂 Phe、 Trp和 Tyr等疏水氨基酸殘基的羧基端肽鍵，由已知兩肽段氨基酸組成（ Ala、Tyr、 Ser和 Pro、 Phe、 Lys、 Arg）可得： ( )( )Tyr和 ( )( )( )Phe； （ 3）由（ 2）得的兩肽段分別與 FDNB反應，分別產(chǎn)生 DNPSer和 DNPLys 可知該兩肽段的 N末端分別為 Ser和 Lys，結(jié)合（ 2）可得： SerAlaTyr和 Lys( )( )Phe； （ 4）胰蛋白酶專一斷裂 Arg或 Lys殘基的羧基參與形成的肽鍵，由題生成的兩肽段氨基酸組成（ Arg、Pro 和 Phe、 Tyr、 Lys、 Ser、 Ala）可得： ProArg和 ( )( )( )( )Lys； 綜合（ 2）、（ 3）、（ 4）可得此肽一級結(jié)構(gòu)為： LysProArgPheSerAlaTyr 所有試卷資料免費下載 corundum 整理 7 三肽 Lys Lys Lys的 pI 值必定大于它的任何一個個別基團的 pKa值，這種說法是否正確？為什么？[正確，因為此三肽處于等電點時，七解離集團所處的狀態(tài)是 C末端 COO（ pKa=）， N末端 NH2（ pKa≌）， 3個側(cè)鏈 3（ 1/3ε NH3+）（ pKa=） ,因此 pI最大的 pKa值（ ） ] 解：嗜熱菌蛋白酶作用專一性較差，根據(jù)題中已知條件： （ 1）消化原多肽得到（ Ala、 Cys Val），說明鏈 1在 2位 Cys 后及 11位 Val前發(fā)生斷裂， 2位 Cys與 12位 Cys之間有二硫鍵； （ 2）由鏈 1序列可得該肽段序列為： PheProLysArg； （ 3）由（ 1）（ 2）可知該肽段 (Arg Cys Trp、 Tyr)中必有一 Cys來自鏈 2，另 一 Cys為鏈 1中 8位 Cys，即鏈 1中 8位 Cys與鏈 2中的一個 Cys有二硫鍵； （ 4）嗜熱菌蛋白酶能水解 Tyr、 Phe等疏水氨基酸殘基，故此肽（ Cys Phe）來自鏈 2，結(jié)合（ 3）中含 Tyr，可知（ 3）中形成的二硫鍵為鏈 1 8位 Cys與鏈 2中 3位 Cys與鏈 2中 3位 Cys之間；（ 4）中（ CysPhe）