tlc基本原理-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 ，配成 1％水溶液。若在同一塊板上點(diǎn)幾個(gè)樣，樣品點(diǎn)間距離為 5mm 以上。 顯色 如果化合物本身有顏色，就可直接觀察它的斑點(diǎn)。這在有機(jī)合成上很有意 義。 很多時(shí)候 ,展開(kāi)劑的選擇要靠自己不斷變換展開(kāi)劑的組成來(lái)達(dá)到最佳效果。（選擇所添加的堿性物質(zhì)，還必須考慮容易從產(chǎn)品中除去，氨水無(wú)疑是較好的選擇。 根據(jù)化合物溶解性選擇 展開(kāi)劑 . 脂溶性好我一般用 TLC,常用體系 :氯仿 /甲醇 /水 ,氯仿 /石油醚 /甲醇等 . 如水溶性好我一般用紙層析 . 極性小點(diǎn)的，可以用乙酸乙酯加正己烷調(diào)比例，大點(diǎn)的可以用氯仿加甲醇，再大點(diǎn)的，可以用異丙醇加水，再大點(diǎn)的，我用了 DMF 加水加醇 一般來(lái)說(shuō) 氯仿 甲醇系統(tǒng) 常用一些，對(duì)付大多數(shù)成分來(lái)說(shuō)足夠了，不過(guò)缺點(diǎn)是氯仿的毒性大了點(diǎn) 只需記住 5 種常用洗脫劑的極性，石油醚 二氯甲烷 乙酸乙酯 丙酮 甲醇，石油醚和甲醇不混溶，不要考慮其它溶劑，嘗試著混合著用就行。 一般來(lái)說(shuō)，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯來(lái)調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性 ，以達(dá)到好的分離效果，適合于生物堿、黃酮、萜類等的分離；中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來(lái)調(diào)節(jié)，適合于蒽醌、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和萜類的分離；強(qiáng)極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來(lái)調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類化合物的分離。對(duì)于在硅膠中這種酸性物質(zhì)上易分解的物質(zhì)，在展開(kāi)劑里往往加一點(diǎn)點(diǎn)三乙胺，氨水，吡啶等堿性物質(zhì)來(lái)中和硅膠的酸性。溫度，濕度對(duì)分離效果影響也很明顯，在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)有時(shí)同一展開(kāi)條件，上下午的 Rf 截然不同 。如果對(duì)某一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。這種極性的增大是一個(gè)十分緩慢的過(guò)程，稱為“梯度洗脫”，使吸附在層析柱上的各個(gè)成分逐個(gè)被洗脫。以上的洗脫順序僅適用于極性吸附劑，如硅膠、氧化鋁。對(duì)極性吸附劑而言，成分的極性大，吸附住強(qiáng)。首先要考慮被分離物質(zhì)的極性。此外，能否獲得滿意的分離，還與選擇的溶劑梯度有很大關(guān)系。如改用吸附性較弱的硅酸鎂以替代氧化鋁，由于硅酸鎂的吸附性較弱，洗脫劑的極牲需相應(yīng)降低，亦即采用苯或含 5％氯仿的苯，即可將一元羥基皂甙元從吸附劑上洗脫下來(lái)。其原理與柱層析基本相似。用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度不宜過(guò)高，以Ⅱ～Ⅲ級(jí)為宜。但在實(shí)際工作中，經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小，對(duì)展開(kāi)劑的極性予以調(diào)整。為避免不同定量毛細(xì)管理體制的占樣誤差，建議一塊薄層板上最好用同一只定量毛細(xì)管。HPLC 樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑 1mm 點(diǎn)間距 5mm 底邊距 1cm. 展開(kāi)劑的選擇 TLC 與 HPLC 相比，一個(gè)突出的優(yōu)點(diǎn)就是流動(dòng)相的選擇具有更大的靈活性，流動(dòng)相的選擇的目的是使絕大部分樣品的 Rf 值位于 － 之間 并達(dá)到較好的分離，與此對(duì)應(yīng)的是流動(dòng)相要有適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度和組成。
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