【正文】 法時(shí)要注意染毒期間定期 (每4天一次 )給動(dòng)物稱重，按實(shí)測(cè)體重，調(diào)整化學(xué)毒物的染毒絕對(duì)量。此時(shí)，計(jì)算累積總接觸劑量 [LD50(n)]，根據(jù)公式計(jì)算 K值，然后依表6— 5進(jìn)行評(píng)價(jià)。 蓄積作用及其評(píng)價(jià) 9/15/2020 29 ? (一 )蓄積系數(shù)法 ? 蓄積系數(shù) (accumulation coefficient)是多次染毒使半數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)效應(yīng) (或死亡 )的累積劑量[ED50(n)]與一次染毒使半數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)相同效應(yīng)(或死亡 )的劑量 [ED50(1)]的比值 ， 即： K＝ ED50(n)/ED50(1) K＝ LD50(n)/LD50(1) 蓄積作用及其評(píng)價(jià) 二、蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評(píng)價(jià) 9/15/2020 30 1．固定劑量法： 一般常選用大、小鼠灌胃或腹腔注射方法進(jìn)行染毒。 2 蓄積毒性 9/15/2020 26 化學(xué)毒物進(jìn)入機(jī)體后，經(jīng)過生物轉(zhuǎn)化以代謝產(chǎn)物或化學(xué)物原型排出體外。 急性毒性作用 9/15/2020 21 二、急性毒性試驗(yàn) ? （ 五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 ? ?重點(diǎn)觀察和記錄每只動(dòng)物死亡的時(shí)間，特別是最早出現(xiàn)死亡的時(shí)間以及各個(gè)劑量組動(dòng)物的死亡數(shù)。所以，對(duì)存活動(dòng)物尤其是對(duì)低于 LD50劑量組的存活動(dòng)物．應(yīng)在觀察期 14天內(nèi)稱量其體重的變化．以便了解受試物引起毒效應(yīng)的持續(xù)時(shí)間。 體重可以反映動(dòng)物中毒后的整體變化。 ?一般來說、根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)所選用的 LD50計(jì)算方法來確定組數(shù)。 ?② 根據(jù)確定的劑量組進(jìn)行染毒 。 ?② 確定使用哪一種計(jì)算方法求 LD50， 然后再設(shè)計(jì)劑量分組 。 ? ： ? 選擇健康動(dòng)物 ? 1~2周的檢疫期 急性毒性作用 9/15/2020 12 二、急性毒性試驗(yàn) （二）試驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)環(huán)境 ? 恒定的溫度： 22177。 急性毒性作用 9/15/2020 10 二、急性毒性試驗(yàn) ? ： ? 急性毒性試驗(yàn)的主要內(nèi)容是求 LD50，除特殊要求外，一般急性毒性試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物性別要求為 雌雄各半 。 而急性吸入毒性試驗(yàn)和經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)則優(yōu)先考慮大鼠 。 急性毒性作用 9/15/2020 6 一、急性毒性和急性毒性試驗(yàn)的目的 ? 急性毒性試驗(yàn)常用的毒性參數(shù)： ? LD50/LC50 ? Zac （ LD50/Limac） ? LD84/LD16(或 LC84／ LC16) ? 劑量 — 反應(yīng)曲線斜率 急性毒性作用 9/15/2020 7 二、急性毒性試驗(yàn) ? (一 )試驗(yàn)動(dòng)物 ? [原則 ]： ?① 急性毒性試驗(yàn)要求選擇對(duì)化學(xué)毒物的代謝和毒效應(yīng)表現(xiàn)與人的反應(yīng)盡可能一致的試驗(yàn)動(dòng)物 。 ? ③ 探求化學(xué)毒物急性毒性的劑量 —反應(yīng)關(guān)系與中毒特征 。 4 局部毒性作用 9/15/2020 3 167。9/15/2020 1 第六章 化學(xué)毒物的一般毒性作用 衛(wèi)生毒理學(xué)教研室 9/15/2020 2 第六章 基礎(chǔ)毒性 ? 167。 3 亞慢性和慢性毒性作用 ? 167。 ? ② 并通過觀察動(dòng)物中毒表現(xiàn)和死亡的情況 ， 了解急性毒作用性質(zhì) 、 可能的靶器官和致死原因 ， 提供化學(xué)毒物的急性中毒資料 、 初步評(píng)價(jià)對(duì)人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性 。 ? ⑥ 為毒理學(xué)機(jī)制研究提供線索 。 ? 急性皮膚毒性試驗(yàn)可選用成年大鼠 、 豚鼠或家兔 ，優(yōu)先考慮白色家兔 。 同一批試驗(yàn)動(dòng)物體重變異范圍不應(yīng)超過該批動(dòng)物平均體重的 20％。 急性毒性作用 9/15/2020 11 二、急性毒性試驗(yàn) ? ： ? 大、小鼠等小動(dòng)物 每組 10只 ? 狗等大動(dòng)物 每組 6只 ? 分組原則 —— 隨機(jī)化原則 ? ： ? 經(jīng)消化道染毒時(shí)，要求試驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物禁食 ? 大鼠、小鼠 —— 隔夜進(jìn)食；染毒后禁食 4h ? 大動(dòng)物 —— 每日上午喂食前染毒 ? 染毒后繼續(xù)禁食 2~4h，但在禁食時(shí)要保障飲水。 急性毒性作用 9/15/2020 14 二、急性毒性試驗(yàn) ? 經(jīng)口 (胃腸道 )接觸 : 灌胃 :小鼠 ?? 大鼠一次灌胃體積不超過 5ml/只 家兔不超過 10ml/2kg 狗不超過 50ml/10kg 吞咽膠囊 : ? 經(jīng)呼吸道接觸 : 靜式吸入 動(dòng)式吸入 ? 經(jīng)皮膚接觸 : ? 注射途徑接觸 : 急性毒性作用 9/15/2020 15 二、急性毒性試驗(yàn) ? （四）染毒劑量與分組 : 1．查閱文獻(xiàn) ?① 了解化學(xué)毒物的結(jié)構(gòu)式 、 分子量 、 常溫常壓下的狀態(tài) 、 熔點(diǎn) 、 沸點(diǎn) 、 密度 、 閃點(diǎn) 、 揮發(fā)度 、 蒸氣壓 、 水溶性和脂溶性等理化特性 ， 生產(chǎn)批號(hào)及純度 ， 雜質(zhì)成分與含量等 。 急性毒性作用 9/15/2020 16 二、急性毒性試驗(yàn) ? （四）染毒劑量與分組 : ? 2． 預(yù)試驗(yàn) ?① 設(shè)定以此預(yù)期值作為待測(cè)化學(xué)物的中間劑量組 ， 并在該劑量的上下各設(shè)計(jì) l一 2個(gè)劑量組作為預(yù)試驗(yàn)劑量 。 急性毒性作用 9/15/2020 17 二、急性毒性試驗(yàn) ? （四）染毒劑量與分組 : ? 3．正式試驗(yàn) 。 1 2 3 4 5 6 ? LgLD0 LgLD0+i LgLD0+2i LgLD0+3i LgLD0+4i ??? 急性毒性作用 9/15/2020 18 二、急性毒性試驗(yàn) ? （ 五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 ? 急性毒性作用 9/15/2020 19 二、急性毒性試驗(yàn) ? （五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察 : ?在觀察試驗(yàn)動(dòng)物中毒癥狀的過程中，應(yīng)同時(shí)觀察體重的變化。如果化學(xué)毒物影響水的攝取或腎功能急性損傷，也可能在體重上反映出來。根據(jù)試驗(yàn)需要可進(jìn)一步擴(kuò)大觀察項(xiàng)目．如體溫、心電圖、腦電圖或進(jìn)行某些生化指標(biāo)測(cè)定等。 急性毒性作用 9/15/2020 23 三、急性毒性評(píng)價(jià) 外源化學(xué)物急性毒性分級(jí)（ WHO） 毒性分級(jí) 大鼠一次經(jīng)口 LD50 (mg/kg) 6只大鼠吸入 4小時(shí)，死亡 2~4只的濃度 (ppm) 兔經(jīng)皮LD50(/mg/kg) 對(duì)人可能致死的估計(jì)量 g/kg 總量 (g/60kg) 劇毒 1 10 5 高毒 1~ 10~ 5~ ~ 3 中等毒 50~ 100~ 44~ ~ 30 低毒 500~ 1000~ 350~ 5~ 250 實(shí)際無毒 5000~ 10000~ 2180~ 15 1000 急性毒性作用 9/15/2020 24 三、急性毒性評(píng)價(jià) 我國(guó)食品毒理急性毒性分級(jí)法 (1994) 急性毒性分級(jí) 大鼠經(jīng)口 LD50(mg/kg) 大致相當(dāng)于 70kg人的致死量 6級(jí) (極毒 ) 1 稍嘗 ,7滴 5級(jí) (劇毒 ) 1~50 7滴 ~1茶匙 4級(jí) (中等毒 ) 51~500 1茶匙 ~35克 3級(jí) (低毒 ) 501~5000 35~350克 2級(jí) (實(shí)際無毒 ) 5001~15000 350~1050克 1級(jí) (無毒 ) 15000 1050克 急性毒性作用 9/15/2020 25 ? 一、 基本概念 ? 二 、 蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評(píng)價(jià) 蓄積作用及其評(píng)價(jià) 167。 ? 蓄積毒性試驗(yàn)是研究化學(xué)毒物基礎(chǔ)毒性的重要內(nèi)容之一 ， 目的是通過試驗(yàn)求出蓄積系數(shù) K， 了解化學(xué)毒物蓄積毒性的強(qiáng)弱 ， 并為慢性毒性試驗(yàn)及其他有關(guān)毒性試驗(yàn)的劑量選擇提供參考 。當(dāng)試驗(yàn)組累積發(fā)生一半動(dòng)物死亡即可終止試驗(yàn)。一般來說，在試驗(yàn)第 2l天也可結(jié)束試驗(yàn)，因?yàn)檫@之前如果動(dòng)物沒