【正文】 此品種的其它性狀均十分優(yōu)良，唯獨該性狀表現(xiàn)不佳，試論述如何應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)的方法對該性狀進行改良？、談?wù)勼w細胞雜種在育種中的應(yīng)用。？。’ATCG TACG GGTT3’，則能與其互補配對的另一條鏈可能是：（）A：5’ATCG TACG GGTT3’ B：5’AACC CGTA CGAT3’ C：3’TAGC ATGC CCAA5’ D：3’UAGC AUGC CCAA5’:（）A：血清學檢測 B：PCR檢測 C：同工酶檢測 D：指示植物鑒定：()A：酒精消毒 B：HgCl2消毒 C：NaClO消毒 D：NaCl消毒：（）A：對稱融合 B：非對稱融合 C：配子—體細胞融合 D：：（）A：抗生素基因 B：NPTⅡ基因 C：花青素基因 D：熒光素酶基因：（）A：兩側(cè)的引物 B：DNA模板 C：TaqDNA聚合酶 D：Mg+ ：（）Ａ：誘導莖細胞的伸長 Ｂ：對形成層的細胞分化有影響 Ｃ：可以解除種子、塊莖、鱗莖等休眠 Ｄ：抑制衰老，下列可能是遺傳物質(zhì)的有：()A：DNA B：RNA C：Protein D：多糖：()A：熱處理脫除病毒 B：莖尖培養(yǎng)脫除病毒 C：微芽嫁接脫除病毒 D：高壓滅菌脫除病毒：（）Ａ：植物的類型 Ｂ：基因型 Ｃ：外植體類型 Ｄ：生理狀態(tài) most important contribution of Watson and Crick is:()A：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)模型 B：RNA結(jié)構(gòu)模型 C：DNA是遺傳物質(zhì) D：DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)：（）A：形態(tài)學 B：細胞學 C：電子顯微鏡觀察法 D：遺傳標記：（）A：同源序列法 B：圖位克隆法 C：功能克隆法 D：差減雜交法:()A：有性雜交 B：體細胞雜交 C：組織培養(yǎng) D：基因克?。海ǎ〢：繪制品種的指紋圖譜B：種質(zhì)資源的遺傳多樣性及分類研究 C：物種的起源與演化 D：種質(zhì)資源的評價、鑒定與創(chuàng)新：（）A：免疫注射 B：細胞融合 C：篩選 D：克隆化’ATCGTACGGGTT3’，下列虛線部分為500—1000 pb長的DNA區(qū)域，請分析其中能進行2的指數(shù)倍擴增的有：()A: 5’ATCGTACGGGTT— — —3’ B: 5’ — — —ATCGTACGGGTT 3’ C: 5’ ATCGTACGGGTT— — —TACCATGCCCAA 3’ D: 5’ ATCGTACGGGTT— — —TTGGGCATGCAT 3’，長方形是探針結(jié)合部位，試問3三種DNA樣品用該酶/探針組合進行RFLP分析能得到的雜交信號條帶數(shù)分別是：A： 1 B：2 C：1 D：2 ：（）Ａ：原生質(zhì)體來源 Ｂ：基因型 Ｃ：培養(yǎng)基 Ｄ：滲透壓調(diào)節(jié)劑：（）Ａ：種質(zhì)資源保存 Ｂ：原生質(zhì)體融合 Ｃ：篩選突變體 Ｄ：遺傳轉(zhuǎn)化五、簡答題：將下列各題的答案填在下面的方框內(nèi)。，如果實驗很成功，且檢測方法正確，則下列基因的作用效果應(yīng)呈現(xiàn)的顏色分別是：LacZ基因重組子_____色菌斑；GUS呈______色；GFP呈_______色。、＿、＿等四種。，其中我國首先報道的有40多種。、GUS、Ant、Luc、AFLP等。，而花粉培養(yǎng)則屬于器官培養(yǎng)的范疇。第四篇：園藝植物生物技術(shù) 試卷（模版）一、將下面詞組相對應(yīng)的中文譯成拉丁文或拉丁文譯成中文。按下列體系配制反應(yīng)混合液，混勻，離心5秒（注意加1滴礦物油覆蓋PCR管）。PCR技術(shù)的特異性取決于引物和模板結(jié)合的特異性。實驗三 PCR技術(shù)一、實驗?zāi)康木酆厦告準椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）是一種體外核酸擴增系統(tǒng)，是分子克隆技術(shù)中常用技術(shù)之一。五、實驗注意事項實驗中的液氮、氯仿、EB等都是有毒物質(zhì)，操作時應(yīng)注意防護，盡量減少臺面污染。吸取800ul上清液（注意：不要吸到漂浮的雜質(zhì)）至另一Eppendorf管中，加入2/，混勻，室溫放置5min，4℃離心12000g 15min。，12000g離心1min，收集菌體，倒掉菌液；，再次收集菌體，盡量將菌液倒干凈。16loading buffer（上樣緩沖液）:%溴酚藍，%二甲苯青FF，40%（W/V）蔗糖水溶液。15TBE:Trisbase 54g，EDTANa配制方法：1M TrisHCl（pH ）1ml， EDTA（pH ），加ddH2O至100ml。配制方法：2N NaOH 1ml，10% SDS 1ml，加ddH2O至10ml，使用前臨時配制。溶液I: 50mM葡萄糖，25mM TrisHCl（pH ），10mM EDTA（pH ）。高壓滅菌15min，室溫貯存。三、主要儀器及試材含有質(zhì)粒pUC18載體的大腸桿菌菌液及離心機、移液槍、離心管及質(zhì)粒DNA提取有關(guān)試劑。本實驗以堿裂解法為例介紹質(zhì)粒的抽提過程，應(yīng)掌握堿裂解法抽提質(zhì)粒的原理、步驟及各試劑的作用。五、思考題根據(jù)參觀內(nèi)容，描述本次參觀有了解到的主要儀器的名稱、用途及使用中的注意事項。二、實驗場所選擇及實驗內(nèi)容園藝學院植物分子生物技術(shù)實驗室與開展現(xiàn)代生物技術(shù)研究直接相關(guān)的實驗室分工與布局和主要相關(guān)儀器：如與組織培養(yǎng)有關(guān)的超凈工作臺、高壓滅菌鍋、接種至、培養(yǎng)室等；與分子生物學有關(guān)的高速冷凍離心機、PCR儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)等。目前，轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其轉(zhuǎn)基因植物已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、食品工業(yè)、畜牧業(yè)等各個領(lǐng)域，其經(jīng)濟效益、生態(tài)效益和社會效益都是巨大的。（4）減少環(huán)境污染，保護人類賴以生存的自然環(huán)境：轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以生產(chǎn)許多抗性強、適應(yīng)性廣的植物，最大限度地利用土地資源，增加全球植被的覆蓋率，減少水土流失和土地沙漠化，減少因CO2增加引起的溫室效應(yīng)。因此，人們將以轉(zhuǎn)基因技術(shù)為核心的生物技術(shù)上的巨大飛躍譽為第二次“綠色革命”。答：自1983年美國在世界上首次獲得轉(zhuǎn)基因煙草以來，植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)得到了迅速發(fā)展，在世界范圍內(nèi)得到了廣泛的應(yīng)用。⑧引物之間：上下游引物之間盡量少的存在互補序列，否則上下游引物退火結(jié)合，將影響到PCR的擴增效率。④G+C含量：有效引物中的G+C含量一般為40%60%。答：PCR反應(yīng)中引物設(shè)計原理為：①選擇合適的靶序列：設(shè)計引物之前，必須分析待測靶序列的性質(zhì)，選擇高度保守、堿基分布均勻的區(qū)域進行引物設(shè)計。② 在離心管中加入1mL 65℃CTAB提取液(100mmol/L的TrisHCl，20mmol/L的EDTA，4%的β巰基乙醇)，放至65℃水浴30min，其間輕搖3次以混勻反應(yīng)液。④數(shù)據(jù)分析，可用Quantity One軟件統(tǒng)計，再用NTSYS軟件計算出遺傳相似性系數(shù)，用UPGMA法進行聚類分析構(gòu)建聚類圖。⑦依賴DNA的RNA聚合酶：識別特異性啟動子，RNA轉(zhuǎn)錄。③DNA聚合酶：催化單核苷酸鏈延伸。主要過程為：①分離目的基因片段；②將目的片段鏈接到克隆載體上，形成重組DNA分子；③將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適當?shù)氖荏w細胞進行增殖；④從細胞中篩選重組子；⑤提取已經(jīng)擴增的基因，進一步分析研究；⑥將目的基因克隆到表達載體，一般采用雙元載體；⑦利用表達載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌；⑧利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植株，常用的方法有原生質(zhì)體法、真空滲入法和蘸花法3種。野生型大腸桿菌產(chǎn)生的β半乳糖苷酶可以將無色化合物Xgal切割成半乳糖和深藍色的物質(zhì)5溴4靛藍。3．Northern blot：是一種通過檢測RNA的表達水平來檢測基因表達的方法，通過Northern blot可以檢測到細胞在生長發(fā)育特定階段或者脅迫或病理環(huán)境下特定基因表達情況。參考文獻(1)文平，[J].生物學教學，(2)Russia says genetically modified foods are harmful(3)[J].,27(4)[J].(5)[J]攀枝花學院學報?？傊?，轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展是不可逆轉(zhuǎn)的。第二，轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的殺蟲毒素可由根部滲入土壤，某種單一的轉(zhuǎn)基因植物的大量種植可能會對土壤生物及微生物和環(huán)境產(chǎn)生不良影響，因而減少本地區(qū)物種的多樣性。2009年12月，法國科學家發(fā)表了新的研究結(jié)果并證實，孟山都公司出產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因玉米對大鼠的肝臟和腎臟具有毒性，這些副作用是性別依賴的、也時常是劑量依賴的；其他副作用也見于大鼠的心臟、腎上腺、脾和造血系統(tǒng)。在經(jīng)過長達20周的觀察之后，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品影響了小鼠的生殖能力,《俄羅斯科學家證實轉(zhuǎn)基因食物是有害的》。2005年5月22日，英國《獨立報》又披露了知名生物技術(shù)公司“孟山都”的一份報告，以轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的老鼠出現(xiàn)器官變異和血液成份改變的現(xiàn)象。該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉最大優(yōu)點是不依賴組織培養(yǎng)人工再生植株，技術(shù)簡單不需要，裝備精良的實驗室，常規(guī)育種工作者易于掌握。它可能是更具有抗?jié)?、抗旱、抗蟲害、增加了大米里的蛋白質(zhì)含量。在傳統(tǒng)作物中植入快速生長基因后，農(nóng)作物的特性得到了改善，不僅可縮短生長期而且還增加作物產(chǎn)量，使土地得到了最大限度的充分利用，也使人類從此告別缺糧的歷史。凡事都有兩面性，對于轉(zhuǎn)基因技術(shù)我們不能全部的否定也不能全部的肯定。而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所操作和轉(zhuǎn)移的一般是經(jīng)過明確定義的基因，功能清楚，后代表現(xiàn)可準確預期。特別是遺傳學創(chuàng)立后近百年的轉(zhuǎn)基因育種則是采用人工雜交的方法，進行優(yōu)良基因的重組和外源基因的導入而實現(xiàn)遺傳基因的改良。該技術(shù)可以使重組生物增加人們所期望的新性狀，培育出新品種。第一篇：植物生物技術(shù)我對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的認識與體會園藝111班蔡朝途1131100916轉(zhuǎn)基因技術(shù)（Genetically Modified，簡稱GM），是指運用科學手段，將基因片段轉(zhuǎn)入特定生物中，并最終獲取具有特定遺傳性狀個體的技術(shù)?；蚱伪晦D(zhuǎn)入特定生物中，與其本身的基因組進行重組，再從重組體中進行數(shù)代的人工選育，從而獲得具有特定的遺傳性狀個體。人們認為轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以在一定程度上通過科學技術(shù)手段讓其他生物、植物朝著對人類有利方向發(fā)展的技術(shù)。但是他們又有本質(zhì)上的區(qū)別：傳統(tǒng)技術(shù)只能在生物種內(nèi)個體間實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移，而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所轉(zhuǎn)移的基因則不受生物體間親緣關(guān)系的限制；傳統(tǒng)的雜交和選擇技術(shù)一般是在生物個體水平上進行，操作對象是整個基因組，所轉(zhuǎn)移的是大量的基因，不可能準確地對某個基因進行操作和選擇，對后代的表現(xiàn)預見性較差。我們應(yīng)該對其一分為二地看，既有利也有弊，人們應(yīng)該客觀地看待其利弊，將其作為一把雙刃劍來使用。轉(zhuǎn)基因技術(shù)有如下優(yōu)勢：第一，增加產(chǎn)量。例如轉(zhuǎn)基因大米是通過人為改變大米的基因使其擁有更好的性狀的一種稻子結(jié)出來的大米。例如20世紀80年代初期由我國學者周光宇提出的，我國目前推廣面積最大的用花粉管通道法培育出來的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，是對轉(zhuǎn)基因技術(shù)對人類有利的最好的證明。2004年，瑞士聯(lián)邦技術(shù)研究院踢球植物學研究所海爾比克教授發(fā)現(xiàn)，先正達研發(fā)的轉(zhuǎn)基因Bt176玉米中，用來毒殺歐洲玉米螟的Bt毒素，無法分解，最終毒死了奶牛。2007年，在奧地利政府的資助下，澤特克教授及其研究小組對孟都山公司研發(fā)的“轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米NK603和轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米MON810的雜交品種”進行了實驗。2008年，美國科學家也證實了長時間喂食轉(zhuǎn)基因玉米，小白鼠的免疫系統(tǒng)會受到損害，該研究成果發(fā)表在同年《農(nóng)業(yè)與食品化學》雜志上。如加拿大發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因油菜與野生近緣種間發(fā)生過交叉雜交,從而形成所謂超級雜草，導致野生等位基因的丟失，從而造成遺傳多樣性的喪失，影響生態(tài)平衡。第四，轉(zhuǎn)入植物的標記基因(特別是抗生素基因),有可能通過某種途徑擴散到其他微生物中并使其產(chǎn)生新的抗藥性，導致超級病原菌的產(chǎn)生。我們應(yīng)采取積極的態(tài)度對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的開發(fā)和利用，坦然面對在對轉(zhuǎn)基因技術(shù)運用過程中帶來的是與非，在對轉(zhuǎn)基因技術(shù)充分重視的同時加快安全性技術(shù)的研究，讓轉(zhuǎn)基因技術(shù)在促進人類生存和發(fā)展中發(fā)揮重大作用，帶來科技領(lǐng)域和生物界領(lǐng)域的重大飛躍，讓轉(zhuǎn)基因技術(shù)真正造福于人類。二是實時PCR的縮寫，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。5．藍白斑篩選：藍白斑篩選是一種基因工程常用的重組菌篩選方法。答：農(nóng)桿菌介導的植物遺傳轉(zhuǎn)化是以農(nóng)桿菌為媒介，將目的基因通過載體上的特定區(qū)域?qū)爰毎?，并整合到染色體中。②DNA連接酶：將兩段DNA分子拼接起來的酶。⑥堿性磷酸酶：催化去除DNA、RNA等的5磷酸基團。主要過程：①反應(yīng)體系，包括模板DNA、SSR引物、10PCR緩沖液、dNTP、Tap 酶和ddH2O；②反應(yīng)過程包括預變性、變性、退火、延伸，在PCR儀上進行；③將PCR產(chǎn)物在測序電泳儀上用5%聚丙烯酰胺凝膠分離，DNA染色采用銀染法。主要過程：① 稱取植物組織約100200mg，加適量液氮，研磨至組織破碎成粉末狀，迅速轉(zhuǎn)入2mL離心管。⑤ 用75%的乙醇清洗 3次，沉淀為白色透明狀，用濾紙條吸干殘留乙醇，在超凈工作臺上無菌風干后，將DNA溶于