【正文】 ?？上扔萌阂蜃友鍣z查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。 第四節(jié) 常見致病菌的測定 ?3)血清學(xué)分型和進一步的生化試驗 ? ? 挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗。 ?，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各 1管。 ?志賀氏菌屬是由四個亞群組成，即 A、 B、 C、 D四個亞群。 – 測試中應(yīng)同時接種陽性對照菌株 。 注 3：＋表示陽性；－表示陰性；＋ /－表示多數(shù)陽性，少數(shù)陰性。 1℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h，必要時可延長至 48h，按生化反應(yīng)初步鑒定表判定結(jié)果。兩種增菌液可同時劃線接種在同一個平板上。 鮮肉、鮮蛋、鮮乳或其他未經(jīng)加工的食品不必經(jīng)過前增菌。固體食品可先應(yīng)用均質(zhì)器以 8000～ 10000r/min打碎 1min，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用滅菌匙或玻棒研磨使乳化，于 36℃ 177。 1） ℃ 18～ 24 h BS DHL(或 HE、 WS、 SS) （ 36177。從水，土壤，昆蟲中，從工廠和廚房設(shè)施的表面和動物糞便中已發(fā)現(xiàn)該類細菌。感染劑量為 15～ 20個菌，死亡率達 1～ 4%。 第三節(jié) 大腸菌群的測定 ?儀器與材料 ?高壓蒸氣滅菌器 干熱氣菌箱 恒溫箱 天平 均質(zhì)器 顯微鏡 冰箱 接種環(huán) 載玻片 試管、童漢氏小管、刻度吸管等，置于干熱滅菌箱中 160℃ 滅菌 2h。 1℃ 溫箱內(nèi)培養(yǎng) 24+2小時，觀察產(chǎn)氣情況，凡乳糖發(fā)酵管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。 第三節(jié) 大腸菌群的測定 ?（ 3）分離培養(yǎng) ? 將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種到伊紅美蘭瓊脂平板上，置36177。固體檢樣最好用均質(zhì)器，以 8000～ 10000r／分鐘的速度處理 1分鐘作成 1∶10 的均勻稀釋液． ? b．用 1毫升滅菌吸管吸取 1∶10 稀釋液 1毫升，注入含有 9毫升滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混勻，作成 l∶100 的稀釋液。 1 ℃ 48 177。 1℃ ）、恒溫水浴鍋（ 46℃ 177。 ?大腸菌群數(shù) MPN（ most probable number,MPN） 是指在 100ml(g)食品檢樣中聽含的大腸菌群的最近似或最可能數(shù)。 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 30～ 300之間，其中一部分大于 300或小于 30時，則以最接近 30或 300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。若其比值小于或等于 2，應(yīng)報告其平均數(shù)；若大于 2則報告其中較小的數(shù)字。一個稀釋度使用兩個平板，應(yīng)采用兩個平板平均數(shù)，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘 2以代表全皿菌落數(shù)。 1） ℃ 恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（ 48177。 ?（ 4）根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或?qū)z樣污染情況的估計，選擇 23個適宜稀釋度，分別在作 10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移 1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個稀釋度作兩個平皿。 第一節(jié) 概述 ?菌落總數(shù)測定 —— 菌落總數(shù)的概念 菌落總數(shù)是指在被檢樣品的單位重量（ g）、容積（ ml）或表面積（ cm2）內(nèi)，所含能于某種固體培養(yǎng)基上，在一定條件下培養(yǎng)后所生成的菌落的總數(shù) 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 ?一、設(shè)備與材料 ?冰箱 ?恒溫培養(yǎng)箱 ?恒溫水浴鍋 ?均質(zhì)器或滅菌乳缽 ?藥物天平 ?菌落計數(shù)器 ?放大鏡 ?滅菌吸管 ??. 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 ?二、培養(yǎng)基和試劑 ?營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 ?磷酸緩沖液 ?%滅菌生理鹽水 ?75%乙醇 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 ?三、培養(yǎng)程序 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 ?四、操作步驟 ? ?（ 1）以無菌操作，將檢樣 25g（或 25mL）剪碎以后，放于含有 225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)先置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成 1： 10的均勻稀釋液。 ?2）大腸菌群可作為腸道致病菌污染食品的指標菌 第一節(jié) 概述 ? ? 食品生產(chǎn)是一個時間長、環(huán)節(jié)多的復(fù)雜過程。 第一節(jié) 概述 ?大腸菌群 ?大腸菌群 系指一群在 36℃ 條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性的無芽胞桿菌。例如，活的家禽，皮膚表面的細菌數(shù)可低到 103cfu／ cm2。 第一節(jié) 概述 ?2）食品中細菌數(shù)量可預(yù)測食品耐放程度和時間 ?一般講，細菌數(shù)越少，食品耐放時間越長；相反，食品耐放時間就越短，例如用 O℃ 保存牛肉，菌落總數(shù)為 103cfu／ cm2時，可保存 18天，而當(dāng)菌落總數(shù)增至 lO5cfu／ cm2時則只能保存 7天。通常以 1g或 1mL或 1cm2樣品中的細菌總數(shù)來表示。再取檢樣 25g做稀釋處理。 第一節(jié) 概述 ?將中樣 (≥100g) 剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進一步剪碎，放入帶 225mL稀釋液和直徑 5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖 50次，振幅要大于 40cm。 代表單位（章） 代表單位（章） 簽字 簽字 日期 年 月 日 日期 年 月 日 備 注 第一節(jié) 概述 四 .樣品的送檢要求 要快速運送：不要超過 3小時； 若路途遙遠，可在 1~5℃ 低溫下運送； 要注意防污染、防散漏、防變質(zhì)； 要填寫檢驗申請單。 ?若為檢驗食品污染情況，可取表層樣品；若為檢驗食品品質(zhì)情況，應(yīng)從深部取樣。 第一節(jié) 概述 （五）食品微生物檢驗采樣方法 采樣原則： 能采取完整包裝的樣品就不拆開取樣，必須拆開包裝取樣的應(yīng)按無菌操作進行取樣 . 第一節(jié) 概述 液體樣品采樣方法 充分混勻后，無菌操作打開包裝，用100mL無菌注射器抽取 ,注入無菌盛樣容器 . 第一節(jié) 概述 半固體樣品采樣方法 ?無菌操作打開包裝，用無菌勺子從幾個部位挖取樣品，放入無菌容器。 所采樣品必須具有代表性。 第一節(jié) 概述 三 .樣品的采集 第一節(jié) 概述 （一）采樣的目的和意義 1. 便于食品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)督管理 2. 鑒別食品中是否存在有毒有害物質(zhì)。 第一節(jié) 概述 ?二、食品微生物檢驗的種類 ?感官檢驗：通過人的感官檢定，看食品的色澤、氣味、口味是否正常，有無霉變和其他異物污染。第九章 食品中食品衛(wèi)生微生物的測定 ?一、食品微生物檢驗的意義 ?食品微生物檢驗方法為食品監(jiān)測必不可少的重要組成部分。 ?(3)食品微生物檢驗是以貫徹“預(yù)防為主”的衛(wèi)生方針，可以有效地防止或者減少食物中毒人畜共患病的發(fā)生，保障人民的身體健康；同時，它對提高產(chǎn)品質(zhì)量，避免經(jīng)濟損失，保證出口等方面具有政治上和經(jīng)濟上的重要意義。 ?培養(yǎng)檢驗：根據(jù)食品的特點和分析目的選擇適宜的培養(yǎng)方法求的帶菌量。 第一節(jié) 概述 （三）采樣的步驟 采樣前調(diào)查 → 現(xiàn)場觀察 → 確定采樣方案 → 采樣 → 樣品封存 → 開具采樣證明 第一節(jié) 概述 （四）采樣的要求 嚴格遵守樣品采集的操作規(guī)程。 樣品采集和現(xiàn)場測定必須有二人以上參加 。 第一節(jié) 概述 冷凍食品采樣方法 ?大包裝小塊冷凍食品按小塊個體采??； ?大塊冷凍食品可用無菌刀從不同部位削取或用無菌手鋸從凍塊上鋸取樣品，放入無菌容器。 第一節(jié) 概述 采樣單 樣品編號： ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 產(chǎn)品名稱（商品名） ______規(guī)格型號 __________注冊商標 _____________生產(chǎn)廠家_______________通訊地址 __________郵政編碼 □ □ □ □ □ □ 受檢地點_______________通訊地址 __________郵政編碼 □ □ □ □ □ □ 采樣地點_______________采樣日期 __________采樣基數(shù) ______________生產(chǎn)日期_______________批 號 __________產(chǎn)品依據(jù)標準 __________有效成分及含量____________________________________________________________檢驗?zāi)康豞_______________檢測項目 _____________________________ 采樣人仔細閱讀以下句子，然后簽字 我認真負責(zé)地填寫了該樣品采樣單，承認以上填寫的合法性，被 該采樣單位所證實的樣品系按照采樣方法取得的，該樣品具有代表性、真實性和公正性。 第一節(jié) 概述 （二）固體樣品的處理 1. 搗碎均質(zhì)法 2. 剪碎振搖法 3. 研磨法 4. 整粒振搖法 5. 胃蠕動均質(zhì)法 第一節(jié)