【正文】
區(qū)間隔離,不同衛(wèi)生等級的制品不能混流、混放,更不能倒流,造成重復性加工和污染。、通風、采暖、降溫等設施。必須注意:要盡可能利用生產(chǎn)車間的空間運輸;合理安排生產(chǎn)車間各種廢料的排出,人員進出要和物料進出分開。首先滿足生產(chǎn)的要求,同時,還必須從本車間在總平面圖上的位置,考慮與其他車間或部門間的關系以及發(fā)展前景等,滿足總體設計的要求;,但有些特殊設備可按相同類型設備作適當集中,務必使生產(chǎn)過程占地最少、生產(chǎn)周期最短、操作最方便。除平面圖外,有時還必須畫出生產(chǎn)車間剖面圖,剖面圖又叫“立剖面圖”。車間布置設計以工藝設計為主導,必須與土建、給排水、供電、供汽、通風采暖、制冷以及設備、安裝、安全、衛(wèi)生等方面取得統(tǒng)一和協(xié)調(diào)。具體部件的計算過程同發(fā)酵罐,其材料為1Cr8Ni9Ti耐酸不銹鋼材料。)10179。=S—罐體厚 ρ鋼=10179。/s 取流速2m/s 則F=㎡ d=()1/2= 選取Ф37728無縫鋼管(2)排料管選取Ф37725無縫鋼管(3)通風管 風量Q=179。/735)/100]1/4= 根據(jù)資料得,應按彎曲強度計算,考慮到軸上開鍵槽,軸徑增加20%, (1+20%)= (4)擋板:取4塊擋板(5)減速器設計與電機選型大功率皮帶減速機選用YPV9a1301150型,出軸轉(zhuǎn)速150r/min,傳動比:4功率:130KW。(100/60) ]/103=106 其中:N—轉(zhuǎn)速 查圖得:Np= P0= NpDi5N3ρ=(100/60)179。 ρ=179。/s 取冷卻水的流速為v=1m/s 冷卻水管總面積S總=(102m179。按通用罐系列,取攪拌槳直徑Di=(1/3)D=(1/3)=,取整Di=材料:1Cr18Ni9Ti耐酸不銹鋼罐體厚:S0=(PD)/[(230[σ]Ф)P]+C1+C2(mm)其中:P—耐受壓強, D—罐徑,單位mmФ—焊縫系數(shù),取Ф= C1—腐蝕欲度,取C1=3mmC2—鋼板抗拉欲度,取C2=1mm [Ф]—許用應力,取12則S0=(3100)/(23012)+3+1=取S0=,。[hb+(1/6)D] =(π/4)()178。內(nèi)部設擋板和攪拌器,大型罐內(nèi)設列管式換熱器。Δtm)=[600080103/]/( 400)}= 洗水用量(取罐容積的5%)每個生產(chǎn)周期共需:(80+8+.08)25%=全年共需:65*2=冷卻水用量(1)種子罐:培養(yǎng)時間按24h計 C水= kJ/(kgΔtm)=[6000103/]/( 400)= m2發(fā)酵罐:采用立式蛇管換熱器,換熱系數(shù)為K=400Kg/(m3h1=2,設計種子罐2個。重組畢赤酵母可獲得的發(fā)酵水平為50000U/mL、經(jīng)后處理得到的木聚糖酶活性為50000U/g、木聚糖酶的收率按80%,年工作日為280天。具體如下:菌種一級種子罐放大培養(yǎng)二級種子罐放大培養(yǎng)發(fā)酵罐發(fā)酵發(fā)酵液清洗廢水清洗廢水清洗廢水處理后進污水池蒸汽、空氣、水、酵母粉、蛋白胨、甲醇、液氨等原料儲罐噴霧干燥塔熱空氣篩分分級半成品固體產(chǎn)品離心搖瓶培養(yǎng)圖31 木聚糖酶酶簡易生產(chǎn)工藝流程圖表32 產(chǎn)品的規(guī)格與使用方法產(chǎn)品規(guī)格酶活(U/g)使用方法液體80000可單獨使用,實際生產(chǎn)中,請根據(jù)飼料配方在每噸配合飼料中添加酶活5000U/g的本品50g;與其他酶制劑配合使用,效果更加明顯。 將料液分散為霧滴的霧化器是噴霧干燥器的關鍵部件,常用的三種霧化器是氣流式霧化器、壓力式霧化器和旋轉(zhuǎn)式霧化器。 根據(jù)現(xiàn)有型號,選用JMDJ211VC03C離心機,處理量為10~15t/h,分離因數(shù)9000,動力22KW。 ,~。 離心沉降設備有瓶式離心機、管式離心機、多室式離心機和碟片式離心機。此外, K atakura等研究表明, 在畢赤酵母高密度補料 批式發(fā)酵過程中, 在過渡階段流加甘油/甲醇混合底物有助于菌體更快地進行甲醇代謝 。當細胞完全適應甲醇環(huán)境后, 處于非生長狀態(tài)下的畢赤酵母甲醇比消耗速率維持恒定。(5)攪拌轉(zhuǎn)速:220r/min(6)pH控制:37。1℃。(4)總空氣管道:120~150℃,~,1h,每月一次。甘油、甲醇和氨水的流加均使用校正好的蠕動泵(Watson 101)進行流加。發(fā)酵過程采用了Invitrogen Corporation的發(fā)酵規(guī)范(Carlsbad, CA, USA, 2002),整個發(fā)酵過程分為甘油期和甲醇期兩個階段。甲醇期流加發(fā)酵培養(yǎng)基:100%的甲醇配以一定量的FM21和PTM l 。甘油期間歇發(fā)酵培養(yǎng)基:甘油40。MgS04 yeast extract 10。 KI 。H20 。 FeS047Hz0 。基礎鹽溶液(FM21):CaS04(6)攪拌速率:220r/min(1)原料的選擇選來源豐富、質(zhì)量好、且便于儲存運輸?shù)脑?;因地制宜,就近取材,盡量降低成本;符合生產(chǎn)工藝要求;(2)菌種:根據(jù)實際需要,本次設計用到的重組巴斯德畢赤酵母基因工程菌由本實驗室構建(如上所述)并保藏。(3)罐壓:。 的獲得-pPIC9K 的構建-pPIC9K-GS115 將可以分泌木聚糖酶的重組畢赤酵母加入到大型種子罐中進行擴大培養(yǎng),種子罐操作。提高CWPTI可以提高誘導階段的生物量,并使更多的甲醇轉(zhuǎn)向蛋白合成,,從而提高表達量。(DO )的影響 高密度發(fā)酵需要消耗大量的氧氣,尤其是在甲醇誘導階段,供氧往往成為限制性因子。菌體生長最適溫度為30℃,誘導表達的最適溫度應降低,常為2028℃,尤其是分泌蛋白,低溫更有利于表達。因此,必須選擇合適的pH,一般在3. 0~7. 0,而且在不同階段,應選擇不同pH,采用變pH發(fā)酵。Zhao等在誘導前添加2%大豆胨后, HAS2IFN2α2b只有極輕微的降解。,降低蛋白酶降解在培養(yǎng)基中添加VitC、VitE可以減少菌體死亡,減少蛋白酶的分泌。濃度過高,會導致菌體死亡,并增加蛋白酶釋放,增加蛋白降解。謝靜莉等在發(fā)酵后期添加(NH4 ) 2 SO4 ,使NH4+濃度維持在150mmol/L以上,蛋白表達量提高58. 8%?! “彼W鳛榈?并用于調(diào)節(jié)pH,其釋放的NH4濃度對菌體生長、蛋白表達和降解有重要影響。CMeOH過低,會限制菌體生長和誘導強度。 (210)GAP酵解生成內(nèi)酮酸以及合成細胞物質(zhì)的方程分別見下式: (211) (212)內(nèi)酮酸被氧化為乙酞輔酶A甲醇期乙酞輔酶A以后的代謝途徑以及呼吸鏈中的代謝途徑與甘油期相同,前面有所介紹,這不過多重復,主要反應有: (24) (25) (26)同前所述。不可否認,φ 的取值未必精確,還需要進一步的實驗結(jié)果來修正。對于 φ 的大小,文獻報道結(jié)論不一。在分解代謝中,甲醛首先被甲醛脫氫酶(FLD1p)氧化為甲酸鹽,并進一步被甲酸鹽脫氫酶(FDH)氧化為二氧化碳,同時以電子 NADH 的形式釋放能量,同時也避免了細胞內(nèi)部甲醇積累過多而產(chǎn)生毒害作用(Sibirny et al., 1990)。在我們的實驗中,溶氧濃度一直保持在 30%以上,所以溶氧不受限;同時實時測量表明發(fā)酵罐內(nèi)乙醇濃度在 0~ g l1較低的范圍內(nèi),為此出于模型的簡化,本文忽略乙醇的發(fā)酵途徑,認為丙酮酸直接進入三羧酸循環(huán): (24) (25) (26)其中(25)是 TCA 循環(huán)的簡化方程,(26)描述了三羧酸循環(huán)過程中細胞物質(zhì)的生成。關于甘油期內(nèi)細胞的合成代謝,在此假定細胞物質(zhì)小部分由 G3P 轉(zhuǎn)化生成,其余大部分在 TCA 循環(huán)中生成。此時,丙酮酸在丙酮酸脫羧酶的作用下生成乙醛(Acetaldehyde),乙醛在醇脫氫酶的作用下生成乙醇。經(jīng)過糖酵解過程,磷酸二羥丙酮被分解成丙酮酸(PYR)。在分解代謝中,甲醛被氧化為甲酸鹽和二氧化碳,并以電子NADH的形式釋放能量??紤]到面包酵母和畢氏酵母在代謝行為和菌體形態(tài)多方面有很大的相似性,因此面包酵母的很多研究成果可以為畢氏酵母所借鑒。它具有外源目的蛋白表達量高、基因遺傳穩(wěn)定和分泌效率高等優(yōu)點, 并具有甲醇精確調(diào)控的強啟動子—醇氧化酶啟動子( PAOX )及日臻成熟的高密度發(fā)酵工藝, 是目前最優(yōu)秀、應用最廣泛的外源基因表達系統(tǒng)之一, 越來越受到人們的重視, 被國內(nèi)外廣泛應用于大量生產(chǎn)外源真核或其他結(jié)構較為復雜的原核蛋白。由于巴斯德畢赤酵母能夠在簡單培養(yǎng)基上高密度發(fā)酵生長,所以它最初是作為一種工業(yè)的甲醇營養(yǎng)型酵母,主要用來生產(chǎn)單細胞蛋白質(zhì)。與國外相比,國內(nèi)在木聚糖酶方面的研究起步較晚,主要集中于海棗曲霉、黑曲霉、木霉菌、青霉菌等真核微生物和短小芽孢桿菌、串珠鏈孢菌、鏈霉菌、環(huán)狀芽孢桿菌、堿性假單胞菌等原核微生物木聚糖酶的研究。該方法便于在生產(chǎn)過程中進行實時檢測、控制,易于擴大生產(chǎn)規(guī)模。這兩種發(fā)酵方式各有其優(yōu)缺點:固體發(fā)酵所用培養(yǎng)基相對便宜,主要以農(nóng)副產(chǎn)品為主。另據(jù)報道,木聚糖酶在去污洗滌,醫(yī)藥制造,以及在果實成熟、種子萌發(fā)、真菌的寄生及植物的抗性等諸多生理過程中都有著重要的應用。在新鮮蔬菜、水果加工成嬰兒食品、膏狀物、干燥蔬菜粉末和速溶食品時,營養(yǎng)物質(zhì)通常被一層堅硬的半纖維素、果膠等物質(zhì)組成的細胞壁所包圍,如果對其用含有纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶的酶制劑來處理,就可在比較溫和條件下使組織柔化,使細胞破壁,將有效物質(zhì)充分提取出來。木聚糖酶在造紙工業(yè)中還應用于廢紙脫墨這一重要環(huán)節(jié),不僅使脫墨工藝變得容易,而且減少了化學藥品的用量。但隨著生物技術的發(fā)展和木聚糖酶廣泛應用,采用液體發(fā)酵生產(chǎn)木聚糖酶將成為今后發(fā)展方向。但固體發(fā)酵同時也存在不易控制,酶系復雜,纖維素等酶含量高,難以精酶化等缺點;相比較而言,液體發(fā)酵由于是在液態(tài)環(huán)境中進行,菌體、底物、產(chǎn)物(包括熱)均易于擴散,使得發(fā)酵能夠在均質(zhì)或擬均質(zhì)條件下進行。根據(jù)發(fā)酵工藝的不同,可分為固體發(fā)酵和液體發(fā)酵兩種。 木聚糖酶的研究始于20世紀60年代。持水性:由于木聚糖具有高的持水性,這在木聚糖溶度較高時變得尤其顯著,因為此時可以形成凝膠。木聚糖在低溶度時,因與水分子直接互作而增加了食糜的粘度。木聚糖酶 中223。根據(jù)對幾十種內(nèi)切223。木糖苷酶[]主要作用是切割低聚木糖和木二糖,有助于木聚糖徹底降解為木糖。1,4木聚糖酶[]是從木聚糖主鏈的內(nèi)部切割223。木糖苷酶。 fermentation pot 第一章 緒論 木聚糖酶(Xylanase)[EC ]是指將木聚糖降解成低聚糖和木糖的一組酶的總稱,是木聚糖降解酶系中最關鍵的酶。 C, by adjusting the stirring rate to the dissolved oxygen concentration was maintained at 30%, mainly in methanol as carbon source, nitrogen source, ammonia did, by adding ammonia flow control pH ≈ , make every 12 h Add a Methanol, postfermentation to add 5% (NH4) 2 SO4, NH4 + levels were maintained to 150mmol / L or more (2 g / L or so). Seeds with two and two 6 m3 tank and two second seed containers, with two 60m3 fermenter, the fermentation tank diameter of 3100m. Fermentation Tanks thickness design is , made ??of stainless steel materials used 1Cr18Ni9Ti acid. Selected according to the design of βxylanase production process and the design of puting devices, according to the requirements of the mission statement drawn flow cha