酶促反應動力學 (2)-全文預覽
【正文】 結構相類似的物質(zhì) ， 該物質(zhì)也能在酶的活性部位上結合 ， 從而阻礙了酶與底物的結合 ， 使酶催化底物的反應速率下降 。 如果某種抑制可用諸如透析等物理方法把抑制劑去掉而恢復酶的活性 ， 則此類抑制稱為可逆抑制 ， 此時酶與抑制劑的結合存在著解離平衡的關系 。 maxr例 42：在 pH=， 15℃ 時測得葡萄糖淀粉酶水解麥芽糖的初速度為： [S] 103 (M) V 104 (M/min） 試從測定結果求這個酶反應的 Km 和 Vmax 值。 [S]作圖法 (EadieHofstee) 將米氏方程改寫： 將米氏方程改寫： CornishBowden直接線性作圖 將米氏方程改寫： （二）積分法 Henri Michaelis Menten積分方程式 有時在酶反應過程中，基質(zhì)或產(chǎn)物的濃度可以測得，但反應初速度則難以測定。為此常將該方程加以線性化，通過作圖法直接求取動力學參數(shù)。 K3 表示當酶被底物飽和時每秒鐘每個酶分子轉換底物的分子數(shù)，這個常數(shù)又叫轉換數(shù)（簡稱 TN)，通稱催化常數(shù)（ catalytic constant, kcat). Kcat值越大，表示酶的催化效率越高。催化可逆反應的酶，對正逆兩向底物的 Km不同。 mk（三）動力學參數(shù)的意義 mkmk③ 根據(jù) km值，可以估計胞內(nèi)基質(zhì)濃度，如 時， 。min 0 2 0 a x ??mkrk5m a x ????? mkkr（ 1）米氏常數(shù)的意義 ① 是酶的一個特性常數(shù)： 的大小只與酶的性質(zhì)有關，而與酶濃度無關。 ? 當 [s]＝ Km時， 。 （二） MichaelisMenten 方程修正 第一步： 第二步： ES P E + “擬穩(wěn)態(tài) ” 假設 合成的 『 ES』 =分解 『 ES] 認為由于反應體系中底物濃度要比酶的濃度高得多，中間復合物分解時所得到的酶又立即與底物相結合，從而使反應體系中復合物的濃度維持不變，即中間復合物的濃度不再隨時間而變化。對均相酶的催化反應，單位反應體系常用單位體積表示。若要忽略該反應的存在，則必須是產(chǎn)物 P為零，換言之，該方程適用于反應的初始狀態(tài)。 （ 1）一級反應 反應速率只與反應物的濃度的一次方成正比關系，為一級反應。 難點： 酶催化反應動力學機理方程的推導。 重點： 各種情況下的酶動力學方程。 （ 1）單分子反應 根據(jù)質(zhì)量作用定律，單分子反應的動力學方程： kcdtdcr ???（ 2）雙分子反應 根據(jù)質(zhì)量作用定律，雙分子反應的動力學方程： 21 ckcdtdcr ??? 根據(jù)實驗結果，整個化學反應反應的速率服從哪種分子反應速率方程式，則這個反應就是幾級。 ②不考慮這個逆反應的存在。 例如：酶反應 其反應機理可表示為 k +1k 1E+S ESk +2P + E? 根據(jù)化學動力學，反應速率通常以單位時間、單位反應體系中某一組分的變量來表示。 ? ?ESkr p 2??根據(jù)上述假定（ 3），可列出 K S 為解離常數(shù)（ mol/l） 反應體系中酶的總濃度 為 ? ? ? ? ? ?ESKSEK 11 ?? ???? ? ? ?? ? ? ?? ?SESKSESKKE S?????11? ?0E ? ? ? ? ? ?ESEE ??0? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ? ???????? ????? SKESESSESKE SS 10? ? ? ? ? ?? ?SKSSEES??? 0 代入 得米氏方程或稱 M—M方程 rp,max： P的最大生成速率 [E0]：酶的總濃度，亦為酶的初始濃度 ? ?ESkr p 2??? ? ? ?? ?? ?? ?SkSrSkSEkrspsp ??????? ? m a x,02Briggs和 J． B． Haldane對上述第三點假設進行修正，提出了 “ 擬穩(wěn)態(tài) ” 假設 。 ? 當 [s]Km時， ，屬零級反應。試求：（ 1）當反應進行了 3 min，底物轉化為產(chǎn)物的百分數(shù)是多少？此時底物和產(chǎn)物的濃度分別為多少？（ 2）當 [S0]為 1 106mol/l時，也反應了 3 min，底物和產(chǎn)物的濃度又是多少？（ 3）最大反應速率 rmax值為多少？ 解：（ 1）根據(jù)題意， ﹤ ，此時一般可認為按一級反應處理，其動力學方程可表示為： ??0S ? ?? ? tktkrSSm???? m a x0lnmin1?t? ?sx00SSSxS??? ? ? ?? ? ? ? 550 ?? ??????? SxSS∴ mol/l 時 將已知數(shù)據(jù)代入上式中，求得
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1