【正文】 細(xì)胞殺死，細(xì)胞間質(zhì)被溶解，使細(xì)胞容易分離；（ 3）壓片時，用力的大小要適當(dāng)，要使根尖被壓平，細(xì)胞分散 開。 一定要找到分生區(qū)。 要弄碎根尖，再垂直向下均勻用力 壓片 ，不可移動蓋玻片， 目的：使細(xì)胞分散，避免細(xì)胞重疊，便于觀察。 染色時間不宜過長，否則顯微鏡下一片紫色，無法觀察。 2．漂洗：待根尖酥軟后，用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min。 解離時間也不宜過長。 置于溫暖處，常換水。 三．實驗材料： 洋蔥（可用蔥、蒜代替）。 3．繪制植物 細(xì)胞有絲分裂簡圖。然后將實驗裝置放到 25350C 的環(huán)境中培養(yǎng) 810h。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng) CO2 的產(chǎn)生情況。 2．提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么？ 答：提取葉綠體色素的關(guān)鍵是：①葉片要新鮮、濃綠；②研磨要迅速、充分；③濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。 防止色素溶解在層析液中， 層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。 增加色素在濾紙上的附著量，實驗結(jié)果更明顯。 4．劃濾液細(xì)線 用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線，干后重復(fù)三次。 3．制備濾紙條 將干燥的濾紙，順著紙紋剪成長 6cm，寬 1cm 的紙條，一端剪去二個角，并在距這一端 1cm 處劃一鉛筆線。 葉綠體色素易溶于 無水乙醇 等有機溶劑。 三、實驗材料：幼嫩、鮮綠的菠菜葉 四、實驗步驟： 步 驟 注 意 問 題 分 析 1．提取色素 5 克綠葉剪碎，放入研缽，加SiO CaCO3 和 10mL 無水乙醇 ， 迅速、充 分研磨。 二．實驗原理： 1．葉綠體中的色素是有機物，不溶于水，易溶于丙酮等有機溶劑中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。）麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。 二）方法步驟： 步驟 注意問 題 解釋 取 4 支潔凈試管，編號，分別加入 2mL H2O2 溶液 不讓 H2O2接觸皮膚 H2O2 有一定的腐蝕性 將 2 號試管放在 900C 左右的水浴中加熱，觀察氣泡冒出情況，與 1 號對照 向 3 號、 4 號試管內(nèi)分別滴入2 滴 FeCl3 溶液和 2 滴肝臟研磨液，觀察氣泡產(chǎn)生情況 不 可 用 同一支滴管 肝臟研磨液 必 須 是新鮮的 肝臟 要 制成研磨液 由于酶具有高效性，若滴入的 FeCl3 溶液中混有少量的過氧化氫酶，會影響實驗準(zhǔn)確性 因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì)，放置過久，可受細(xì)菌作用而分解，使肝臟組織中酶分子數(shù)減少，活性降低 研磨可 破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來，增加酶與底物的接觸面積 23min 后，將點燃的衛(wèi)生香分別放入 3 號和 4 號試管內(nèi)液面的上方，觀察復(fù)燃情況 放 衛(wèi) 生 香時，動作要快，不要插到氣泡中 現(xiàn)象： 4 號試管產(chǎn)生氣泡多，冒泡時間短，衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃， 3 號試管產(chǎn)生氣泡少，冒泡時間長，衛(wèi)生香幾乎無變化 避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅 實例 2：溫度對酶活性的影響 一）實驗?zāi)康模? 1．初步學(xué)會探索溫度對酶活性的影響的方法。 2．培養(yǎng)實驗設(shè)計能力。 實驗討論答案： 1．如果將上述表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細(xì)胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？ 答：表皮細(xì)胞維持原狀，因為細(xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。 重復(fù)幾次。 從蓋玻片的一側(cè)滴入清水，在另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次。 重復(fù)幾次 糖液濃度不能過高 蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度，細(xì)胞通過滲透作用失水，細(xì)胞壁伸縮性小原生質(zhì)層的伸縮性大，液泡和原生質(zhì)層不斷收縮，所以發(fā)生質(zhì)壁分離。 從蓋玻片的一側(cè)滴入 0． 3g/ml的蔗糖溶液，在另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次。（或水綿細(xì)胞中有帶狀葉綠體，原生質(zhì)層呈綠色，緊貼著細(xì)胞壁。蓋上蓋玻片。 。 2．質(zhì)壁分離復(fù)原的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細(xì) 胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細(xì)胞液中，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，緊貼細(xì)胞壁，使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。 實驗六 觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原 （必修一 P61“探究”） 7 一、實驗?zāi)康模? 1．學(xué)會觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的方法。 3．將兩個漏斗分別浸入盛有蒸餾水的燒杯中，在兩漏斗的液面處做標(biāo)記 4．靜置一段時間后，觀察燒杯中蒸餾水顏色的 變化及長頸漏斗的液面變化，并將觀察到的結(jié)果設(shè)計表格進行記錄?；蛘撸úＡЪ垼┧肿涌梢酝高^，而蔗糖分子因為比較大，不能透過。 葉綠體的形態(tài)和分布，與葉綠體的功能有什么關(guān)系？ 答：葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照，完成光合作用。 制片和鏡檢時，臨時裝片中的葉片不能放干了，要隨時保持有水狀態(tài) 否則細(xì)胞或葉綠體失水收縮，將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察。 若用菠菜葉作實驗材料，要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。 線粒體辨認(rèn)依據(jù)：線粒體的形態(tài)多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。 各種細(xì)胞之間的差異和產(chǎn)生差異的可能原因是：這些細(xì)胞的位置和功能不同，其結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)，這是個體發(fā)育過程中細(xì)胞分化產(chǎn)生的差異。 第四步：觀察并用細(xì)胞準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。 附：淀 粉的檢測和觀察 用試管取 2ml 待測組織樣液，向試管內(nèi)滴加 2 滴碘液，觀察顏色變化。 否則 CuSO4 的藍(lán)色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色。鑒定時先加 A 液后加B 液。） 黃豆浸泡 1 至 2 天，容易研磨成漿，也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。 裝片不宜久放。同時，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。 在子葉薄片上滴 2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液，染色 1 分鐘。 管，造成燙傷； （二）脂肪的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。 3. 向試管內(nèi)注入 1mL 新制的斐林試劑，振蕩。 五、方法步驟： （一）可溶性糖的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 1. 制備組織樣液。） 2．做脂肪的鑒定實驗。 3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。 1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的 Cu 2O 沉淀。 實驗一 觀察 DNA、 RNA 在細(xì)胞中的分布 （必修一 P26） 一．實驗?zāi)康模撼醪秸莆沼^察 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中分布的方法 二．實驗原理： 1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對 DNA 和 RNA 的親和力不同，甲基綠使 DNA 呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使 RNA呈現(xiàn)紅色。（原因：物像移動的方向和實際移動玻片的方 向相反） 6．污點判斷： 1）污點隨載玻片的移動而移動，則位于載玻片上； 2）污點不隨載玻片移動，換目鏡后消失，則位于目鏡；換物鏡后消失，則位于物鏡； 3）污點不隨載玻片移動，換鏡后也不消失，則位于反光鏡上。 順序：移裝片→轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器→調(diào)反光鏡或光圈→調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 注：換高倍物鏡時只能移動轉(zhuǎn)換器，換鏡后，只準(zhǔn)調(diào)節(jié)細(xì) 準(zhǔn)焦和反光鏡（或光圈）。（找不到物像時，可重復(fù)一次或移動裝片使標(biāo)本移至通光孔中心）。調(diào)節(jié)視野亮度只可用遮光器和反光鏡，光線過強，改用較小光圈或用平面反光鏡；光線過弱，改用較大光圈或用凹面反光鏡。 二、顯微鏡的使用 ：置鏡（裝鏡頭）→對光→置片→調(diào)焦→觀察 2 1． 安放。 一、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、呈像原理、放大倍數(shù)計算方法 結(jié)構(gòu)： 光學(xué)部分：目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器（有大小光圈）和反光鏡（有平面鏡和凹面鏡） 機械部分：鏡座、傾斜關(guān)節(jié)、鏡臂、載物臺（上有通光孔、壓片夾）、鏡頭轉(zhuǎn)換器、粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。 補初中實驗：認(rèn)識顯微鏡的結(jié)構(gòu)，學(xué)會使用顯微鏡 實驗?zāi)康模赫J(rèn)識顯微鏡的結(jié)構(gòu)，初步掌握使用顯微鏡的方法。（物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度） 放大倍數(shù)：目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積） 注：顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù)，即長度和寬度，而不是面積。左眼注視目鏡，同時把反光鏡轉(zhuǎn)向光源，直至視野光亮均勻適度。轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋（順時針），俯首側(cè)視鏡筒慢慢下降，直到物鏡接近切片（約 ），左 眼觀察目鏡，（反時針）旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒慢慢上升，看到物像時輕微來回旋轉(zhuǎn)細(xì)準(zhǔn)焦，直到物像清晰。找到物像后，把要觀察的物像移到視野中央，把低倍鏡移走，換上高倍鏡，只準(zhǔn)用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到物像清楚為止。 5．裝片的制作和移動：制作：滴清水→放材料→蓋片 移動：物像在何方，就將載玻片向何處移。把顯微鏡放正。 三．方法步驟： 操作步驟 注意問題 解釋 取口腔上皮細(xì)胞制片 載玻片要潔凈， 滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的 NaCl 溶液 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞 將載玻片在酒精燈下烘干 防止污跡干擾觀察效果 保持細(xì)胞原有形態(tài) 消毒為防止感染，漱口避免取材失敗 固定裝片 （細(xì)胞已死亡） 水解 將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的鹽酸溶液中，用 300C水浴保溫 5min 改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進入細(xì)胞，促進染色體的 DNA 與蛋白 3 質(zhì)分離而被染色 沖冼涂片 用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片 10S 洗去殘留在外的鹽酸 染色 滴 2 滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色 5min 兩種溶液混合，現(xiàn)配現(xiàn)用 觀察 先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察 使觀察效果最佳 實驗二 檢測生物組織中 的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) （必修一 P18） 一．實驗?zāi)康模? 嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 二．實驗原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。淀粉遇碘變藍(lán)色。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。 四、實驗試劑 斐林試劑（包括甲液：質(zhì)量濃度為 ：質(zhì)量濃度為 ）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括 A 液：質(zhì)量 濃度為 ：質(zhì)量濃度為 CuSO4 溶液）、體積分?jǐn)?shù)為 50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。 2. 取 1 支試管，向試管內(nèi)注入 2mL 組織樣液。 4. 試管放在盛有 50650C 溫 最好用試管夾夾住試管上部，使 防止試管