【正文】 顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞 （必修一 P7） 一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 1）使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞，比較不同細(xì)胞的異同點(diǎn) 2）運(yùn)用制作臨時(shí)裝片的方法 二．實(shí)驗(yàn)原理： 利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，例如：可以看到葉綠體、線粒體等細(xì)胞器，從而能夠區(qū)別不同的細(xì)胞。 可用蛋清代替豆?jié){。 CuSO4 溶液不能多加。 鑒定。 時(shí)間一長，油滴會(huì)溶解在乙醇中。 用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上1~2 滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。 染色時(shí)間不宜過長。 干種子要浸泡 3~4 小時(shí)，新花生的浸泡時(shí)間可縮短。 應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ) 存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑； 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測。 （去皮、切塊、研磨、過濾） 蘋果或梨組織液必須臨時(shí)制備。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡 3~4 小時(shí)（也可用蓖麻種子）。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性 NaOH 溶液中能與 雙縮脲試劑中的 Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。如： 加熱 葡萄糖 + Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（磚紅色） + H 2O，即 Cu ( OH ) 2 被還原成 Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中的分布。 7．完畢工作。 問 1：低倍鏡換為高倍鏡后，若看不到或看不清原來的像，可能原因？（ ABC） A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反，蓋玻片在下面 D、未換目鏡 問 2：放大倍數(shù)與視野的關(guān)系： 放大倍數(shù)越小，視野范圍越大，看到的細(xì)胞數(shù)目越多，視野越亮，工作距離越長； 放大倍數(shù)越大，視野范圍越小，看到的細(xì)胞數(shù)目越少，視野越暗，工作距離越短。．觀察時(shí)兩眼都要睜開，便于左眼觀察，右眼看著畫圖。選低倍鏡→選較大的光圈→選反光鏡（左眼觀察） 3．觀察。顯微鏡放置在桌前略偏左，距桌緣 8— 10cm 處，裝好物鏡和目鏡（目鏡 5 物鏡 10） 2．對(duì)光。 注 意 ：目鏡無旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長，放大倍數(shù)越??；物鏡有旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長，放大倍數(shù)越大。 1（人教版新課標(biāo)） 考綱要求 ：理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。 呈像原理：映入眼球內(nèi)的是倒立放大的虛像。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，選取較大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。將切片或裝片放在載物臺(tái)上，標(biāo)本正對(duì)通光孔中心。側(cè)面觀察降鏡筒→左眼觀察找物像→細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)清晰 4．高倍鏡的轉(zhuǎn)換。 故裝片不能反放。使用完畢后，取下裝片，轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，逆時(shí)針旋出物鏡，旋進(jìn)鏡頭盒；取出目鏡，插進(jìn)鏡頭盒，蓋上。 2．鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色休中的 DNA 和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA 與染色劑結(jié)合。 2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。） 三．實(shí)驗(yàn)材料 1．做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。 3．做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。 因蘋果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。 斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時(shí)，生成的 Cu ( OH ) 2 在 70~900C 下分解成黑色 CuO 和水； 甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無Cu ( OH ) 2 生成。 因?yàn)榻輹r(shí)間短，不易切片，浸泡時(shí)間過長，組織較軟，切下的薄片不易成形。 用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。 三、蛋白質(zhì)的鑒定 操 作 方 法 注 意 問 題 解 釋 制備組織樣液。加樣液約 2ml 于試管中，加入 雙縮脲試劑 A，搖勻；再加入雙縮脲試劑 B 液 3~4滴，搖勻，溶液變紫色。 先加 NaOH 溶液，為 Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。 蛋清要先稀釋。 三．方法步驟： 第一步：轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡使視野明亮 第二步：在低倍鏡下觀察清楚后，把 要放大觀察的物像移至視野中央 第三步：用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍物鏡 問（ 1）是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？ 提示：低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數(shù)??；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數(shù)高。用高倍鏡觀察，只需微調(diào)即可。 （ 2）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，用高倍鏡觀察，并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直到看清楚材料為止。 實(shí)驗(yàn)四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體 （必修一 P47） 一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形 態(tài)分布。 三．實(shí)驗(yàn)材料： 觀察葉綠體時(shí)選用：蘚類的葉、黑藻的葉。 四．方法步驟： 步 驟 注 意 問 題 分 析 6 1．制片。 討論： 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體，是不是靜止不動(dòng)的？為什么？ 答：不是。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多，這可以接受更多的光照。 三．方法步驟： 1．取兩個(gè)長頸漏斗，分別在漏斗口處封上一層玻璃紙。 2．如果用一層紗布代替玻璃紙，漏斗管內(nèi)的液面還會(huì)升高嗎？ 答：用紗布替代玻璃紙時(shí)，因紗布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不會(huì)升高。 二．實(shí)驗(yàn)原理： 1．質(zhì)壁分離的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞就會(huì)通過滲透作用而失水，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中，使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。因?yàn)橐号莩首仙?，易于觀察。 三、實(shí)驗(yàn)步驟： 步 驟 注 意 問 題 分 析 1．制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片。 防止裝片產(chǎn)生氣泡。 先觀察正常細(xì)胞與后面的“質(zhì)壁分離”起對(duì)照作用。觀察到：液泡由大變小，顏色由淺變深，原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離。 否則，細(xì)胞嚴(yán)重失水死亡，看不到質(zhì)壁分離的復(fù)原。觀察到：液泡由小變大，顏色由深變淺，原生質(zhì)層恢復(fù)原狀。 因?yàn)榧?xì)胞失水過久，也會(huì)死亡。因?yàn)榧t細(xì)胞不具細(xì)胞壁。 實(shí)例 1：比較過氧化氫酶和 Fe3+的催化效率 一）．實(shí)驗(yàn)原理： 鮮肝提取液中含有過氧化氫酶，過氧化氫酶和 Fe3+都能催化 H2O2分解放出 O2。 二）實(shí)驗(yàn)原理： 1．淀粉遇碘后，形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。 分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中，搖勻后，維持各自的溫度 5min 保持各自溫度時(shí)間不能太短 淀粉酶催化淀粉水解需要一定時(shí)間 在 3 支試管中各滴入 12 滴碘液，搖勻后觀察這 3 支試管中溶液顏色變化并記錄 碘液不能滴加太多 防止影響實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察 用表格的形式顯示實(shí)驗(yàn)步驟 序號(hào) 加入試劑或處理方法 試管 A B C a b c 1 可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / / 新鮮淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL 2 保溫 5min 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C 3 將 a 液加入到 A 試管， b 液加入到 B試管， c 液加入到 C 試管中，搖勻 4 保溫 5min 600C 1000C 00C 5 滴入碘液，搖勻 2 滴 2 滴 2 滴 6 觀察現(xiàn)象并記錄 實(shí)例 3： PH 值對(duì)酶活性的影響 操作步驟：用表格開式顯示實(shí)驗(yàn)步驟：（注意操作順序不能錯(cuò)） 序號(hào) 加入試劑或處理方法 試管 1 2 3 1 注入新鮮的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸餾水 1mL / / 3 注入氫氧化鈉溶液 / 1mL / 4 注入鹽酸 / / 1mL 5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 6 600C 水浴保溫 5min 7 加入斐林試劑，邊加邊振蕩 2mL 2mL 2mL 8 水浴加熱煮沸 1min 9 觀察 3 支試管中溶液顏色變化變記錄 實(shí)驗(yàn)八 葉綠體色素的提取和分離 （必修一 P97） 一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 10 1．嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。 加 CaCO3 防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。 尼龍布起過濾作用。 層析時(shí)，色素分離效果好。 重復(fù)三次。 層析液不能沒及濾紙條。 四種色素之所以能被分離，是因?yàn)樗姆N色素隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度不同。 實(shí)驗(yàn)九 探究酵母菌的呼吸方式 （必修一 P91） 一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 1．了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況 2．學(xué)會(huì)運(yùn)用對(duì)比實(shí)驗(yàn)的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn) 二．實(shí)驗(yàn)原理： 1．酵母菌是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。 三．方法步驟： 提出問題→作出假設(shè)→設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)→（包括選擇實(shí)驗(yàn)材料、選擇實(shí)驗(yàn)器具、確定實(shí)驗(yàn)步驟、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)記錄表格）→實(shí)施實(shí)驗(yàn)→分析與結(jié)論→表達(dá)與交流。向試管中分別滴加 溶有 重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（體積分?jǐn)?shù)為 95%97%）并輕輕振蕩，使它們混合均勻，觀察試管中溶液的顏色變化。由于各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立進(jìn)行的，因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞。 四．實(shí)驗(yàn)步驟： 步 驟 注 意 問 題 分 析 一、根尖的培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)前 3~4 天，讓洋蔥放在廣口瓶上，底部接觸清水。 二、裝片的制作 （解離→漂洗→染色→制片） 1．解離：上午 10 時(shí)至下午 2時(shí)，剪取洋蔥根尖 2~3mm，立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精溶液的混合液（ 1： 1）的玻璃皿中，室溫下解離 3~5min。此時(shí)，細(xì)胞已被鹽酸殺死。 目的：洗去解離液，便于染色。 醋酸洋紅溶液也能使染色體著色 4．制片：用鑷子將這段洋蔥根尖取出來 ，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。 三、觀察 1．低倍鏡觀察：把裝片放在低倍鏡下，慢慢移動(dòng)裝片，找到分生區(qū)細(xì)胞。如果是這樣，可以慢慢地移動(dòng)裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。 二．實(shí)驗(yàn)原理：用瓊脂塊模擬細(xì)胞。 不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動(dòng)其表面 避免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 戴上手套，用塑料勺將瓊脂塊從 NaOH 溶液中取出。如潑灑出來，應(yīng)立即用水沖洗潑灑處。