sod和pod酶活性的變化-全文預(yù)覽
【正文】 創(chuàng)木酚氧化成茶褐色產(chǎn)物。（一個(gè)酶單位相當(dāng)于引起反應(yīng)液達(dá)到半抑制時(shí)酶的用量，即以能抑制反應(yīng) 50％的酶量為一個(gè) SOD酶活性單位。 （ 3）將試管置于光照培養(yǎng)箱中在 4000 lux光照 25℃ 下反應(yīng)20min； （ 4）反應(yīng)結(jié)束后以不照光的對(duì)照管調(diào)零，分別測(cè)定各管在560nm下的吸光度（ OD560） 3. 計(jì)算結(jié)果 已知 SOD活性單位以抑制 NBT光化還原的 50％為一個(gè)酶活單位（ U），按下式計(jì)算活性 SOD總活性＝ [( AckAE ) V]/（ 1/2Ack W Vt） SOD比活力＝ SOD總活性 /蛋白質(zhì)含量 SOD總活性以鮮重酶單位每克表示（ u/g FW）；比活力單位以酶單位每毫克蛋白表示； Ack為照光對(duì)照管的吸光度；AE為樣品管的吸光度； V為樣品液總體積（ ml）； Vt為測(cè)定時(shí)的酶液用量（ ml）； W為樣品鮮重（ g）；蛋白質(zhì)含量單位為 mg/g。 5. 氮藍(lán)四唑 (NBT)溶液：稱取 NBT用 PBS定容至 3ml（直接用 5 ml槍加，不用定容），避光保存。反應(yīng)液藍(lán)色愈深，說(shuō)明酶活性愈低。并利用各種呈色反應(yīng)來(lái)測(cè)定 SOD的活力?；钚匝趺复偾宄到y(tǒng)主要有超氧化物歧化酶（ SOD）、過(guò)氧化物酶（ POD）、過(guò)氧化氫酶（ CAT）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（ AsAPOD）等，這些酶活性的高低可在不同程度上反應(yīng)植物抗性的強(qiáng)弱。當(dāng)植物受到脅迫時(shí)，這種平衡將可能被破壞，隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)和脅迫程度的加重，活性氧清除系統(tǒng)的功能逐漸降低，活性氧積累得越來(lái)越多，最終使細(xì)胞膜發(fā)生膜質(zhì)過(guò)氧化并發(fā)生自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，形成丙二醛（ MDA），使細(xì)胞膜流動(dòng)性下降，膜功能受到傷害。高等植物含有兩種類型的 SOD： Mn－ SOD和－ SOD，它們都催化下列反應(yīng)： 由于超氧自由基（ O2.－ ）為不穩(wěn)定自由基，壽命極短，測(cè)定 SOD活性一般為間接方法。通過(guò)在反應(yīng)液中加入不同量的 SOD酶液，光照一定時(shí)間后測(cè)定 560nm波長(zhǎng)下各液光密度值，抑制 NBT光還原相對(duì)百分率與酶活性在一定范圍內(nèi)呈正比。 4. 60μM核黃素溶液：稱取 核黃素用磷酸緩沖液定容至 100ml， 避光保存。 （ 2
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