《生物制品的制備》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 析 H2O,4℃ 透析液 凍 干 成品 二、尿激酶（ urokinase）的制備 一噸可制成 90克粗品，治療各種新血栓形成或血栓梗塞疾病。 ?白蛋白對(duì)治療因失血、創(chuàng)傷、燒傷等引起的休克，腦水腫和大腦損傷性所致的腦壓增高，防止低蛋白血癥，肝硬化或者由腎病引起的水腫與腹水等嚴(yán)重疾病具有良好療效。 第二節(jié) 人體來(lái)源生物制品制備實(shí)例 （ Example of biopreparation application to human） 一、人血漿白蛋白制劑的制備（ preparation of human blood plasma albumin） ?（ 1）結(jié)構(gòu)和性質(zhì) （ structure and character） ?人血是一種紅色混濁的、具有一定腥味與粘滯性的液體。 ? 吸附法 (adsorption)：這是利用吸附劑根據(jù)氨基酸吸附力的差異 進(jìn)行氨基酸分離的方法。 ?化學(xué)合成與酶促合成法 化學(xué)合成法 一般得到的是 DL— 型氨基酸 ， 尚需要對(duì)異構(gòu)體拆分； 酶促合成法 也是酶工程在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用 ， 優(yōu)點(diǎn)是技術(shù)工藝簡(jiǎn)單， 轉(zhuǎn)化率高 ， 副產(chǎn)物少和易提純等 。 ① 用 鹽酸水解 為常用方法，其優(yōu)點(diǎn)是水解迅速、完全，產(chǎn)物全部是 L— 型氨基酸，缺點(diǎn)是色氨酸全部被破壞，絲氨酸等部分被破壞。 ?離 子 交 換 層 析 法 （ Ion exchange chromatography） : 脂質(zhì)分子的存在有非解離 、 兩性離子和酸式解離三種狀態(tài) 。 （ 2）純化方法（ depuration） ?沉淀法 (precipitation) ：由于不同脂質(zhì)在丙酮中溶解度不同，故常用它進(jìn)行沉淀。 六 、 脂類制品的分離純化方法 （ isolation and depuration of lipoid） （ 1） 提取方法 （ extraction ） 脂類自然狀態(tài)下是以結(jié)合形式存在的 。 用季銨化合物也可沉淀粘多糖 。 又如用酶處理法可提取與蛋白質(zhì)結(jié)合的多糖 。 這里只介紹 多糖和粘多糖 的一般分離純化方法 。 四、核酸類制品的分離純化方法 （ Isolation and depuration of nucleic acid ） ?核酸類藥物生產(chǎn)方法主要有 提取法和發(fā)酵法。 8）載體、配基、目的物的連接 （ Conjunction of vector、 ligand and target material） ? 載體（ Vectors or Matrix） + ? 配基（ Ligand） + ? 目的物（ target material） Fig AC relies upon a reversible highly specific binding reaction. Fig Spacer arm principle A spacer is sometimes used to ensure full accessibility of the affinity ligand. Fig Principle of preparing AC media ?9）親和層析的基本操作方法： ? ① 平衡（ Equilibration） 用平衡 Buffer沖洗柱體，至基線平穩(wěn) . ② 樣品上柱和沖洗 （ Sample application and wash） 樣品中的目的物與層析介質(zhì)選擇性的吸附，雜質(zhì)不被吸附。 ?在溫和的條件下 能與配基共價(jià)偶聯(lián)。 ?糖蛋白與植物凝集素。 ?DNA與互補(bǔ) DNA或 RNA（ cDNA、mRNA)。 ?② 當(dāng)含有混合組份的樣品（流動(dòng)相）通過(guò)此固定相時(shí)，只有和固定相分子有特異親和力的物質(zhì)，才能被固定相吸附結(jié)合，其它沒(méi)有親和力的無(wú)關(guān)組份就隨流動(dòng)相流出。 ?基質(zhì)（ matrix）： 亦稱為載體（ vector），是構(gòu)成固定相的骨架 。 （ 4）親和層析法（ affinity chromatography） ?大部分生物活性物質(zhì)都有其作用的靶物質(zhì)，如酶與底物（或抑制劑）、抗原與抗體、激素與受體等，它們之間有特異的親合作用，利用該性質(zhì)設(shè)計(jì)的特異層析分離技術(shù)稱為親和層析。 它們具有 等電點(diǎn) ， 在離開(kāi)等電點(diǎn)的 pH時(shí)便會(huì)帶正或負(fù)電荷 。 凝膠層析又稱分子篩層析，主要根據(jù)混合物中分子的大小和形狀不同 ，在通過(guò)凝膠時(shí)，分子的擴(kuò)散速率各異而達(dá)到分離的目的。常用的有鹽析法（ salting out）、有機(jī)溶劑沉淀法（ anic solvent precipitation）、等電點(diǎn)沉淀法（ isoelectric precipitation）、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（如抗體 — 抗原）（ target banding precipitation）等。 ③ 注意提取的 溫度 、 pH、 變性劑 等因素 。 （ 2） 提取 （ extraction） 生物組織與細(xì)胞破碎后要立即進(jìn)行提取 。常用的破碎方法： ① 磨切法 ， 該法屬于機(jī)械破碎方法 ， 設(shè)備有組織搗碎機(jī) 、 膠體磨 、 勻漿器 、 勻質(zhì)機(jī) 、 球磨機(jī) 、 乳缽等 。 ③ 防腐劑保鮮 。 常用 40℃ 速 凍 。 （ 2）原料的預(yù)處理與保存： ① 動(dòng)物原料 ： 采集后要立即處理，去除結(jié)締組織、脂肪組織等，并迅速冷凍貯存 。 原料的選擇注意事項(xiàng)： ① 植物原料生長(zhǎng)的季節(jié)性；
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