【正文】 具體詳見流程圖） 【篩試驗結(jié)果的報告】 對 HIV 抗體篩查試驗，呈陰性反應(yīng)者可出具 “HIV抗體陰性 ”報告。 （三）試驗結(jié)果 以上且陰性對照值小于 方可認(rèn)為本實驗有效。 5 次（每次應(yīng)保持 30~60 秒浸泡時間），扣干。 （二）試驗操作 50ul待測樣品及陰、陽性對照血清。 【 HIV 篩查試驗操作程序】 （一） 試驗前準(zhǔn)備： 1. 試驗開始前將試劑和樣品放置于室溫（ 18~25℃ ）半小時 ，編號。 陰性：測試卡只在對照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶。 加樣后，陽性標(biāo)本可在 1~30 分鐘內(nèi)檢出。 【 HIV 篩查試驗操作程序】 （一） 試驗前準(zhǔn)備： 試驗開始前將試劑和樣品放置于室溫（ 18~23℃ ）半小時，編號。 （三） 試驗結(jié)果 NC≤ Cut off值＝陽性對照值 10% 標(biāo)本 OD 值小于 Cut off為陰性，大于或等于 Cut off為陽性 （四） 報告：對呈陰性反應(yīng)的樣品，可由實施檢測的實驗室出具 HIV 抗體陰性報告；對呈陽性反應(yīng)的樣品，須進行復(fù)檢，不能出陽性報告。 每孔加入底物緩沖液 50ul， TMB50ul，混勻，不必覆蓋粘膠紙， 37177。 置洗板機上洗滌 5 遍（用洗液將反映孔完全加滿，靜置 30S，共洗滌 5 遍，洗完后孔上方及底部不應(yīng)殘存液體，禁止在濾紙上拍干）。 每孔加入 100ul待檢樣品及對照（對照要后加），可振搖 15S。 3. 緩沖液配制：用蒸餾水 1： 25 倍稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。 （ 三 ） 試驗結(jié)果 15 NC≤ Cut off值＝ +NC＝ 標(biāo)本 OD 值小于 Cut off為陰性，大于或等于 Cut off為陽性 （ 四 ） 報告：對呈陰性反應(yīng)的樣品 ，可由實施檢測的實驗室出具 HIV 抗體陰性報告；對呈陽性反應(yīng)的樣品，須進行復(fù)檢，不能出陽性報告。 每孔加入底物緩沖液 50ul， TMB50ul，混勻，不必覆蓋粘膠紙， 37177。 置洗板機上洗滌 5 遍（用洗液將反映孔完全加滿，靜置 30S，共洗滌 5 遍，洗完后孔上方及底部不應(yīng)殘存液體，禁止在濾紙上拍干）。取陽性對照和陰性對照分別充分混勻各 50ul 加入對照孔中，空白對照孔只加樣品稀釋液。 緩沖液 配制：用蒸餾水 1： 25 倍稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配。 天氣過熱，需采用干冰或冰壺冷藏運輸。 三、 樣本保存 在一周內(nèi)檢測的樣本，可存放于 2~8℃ ；在一周以后檢測的樣本，須存放于20℃ 。 13 第二部分 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第二章 樣品采集與處理 一、 樣本采集 接患者申請單后，填寫血樣采集記錄，記錄包括患者日期、姓名、年齡、門診號、采集人簽名等。 強化用藥程序： 基本用藥程序加一種蛋白酶抑制劑，如佳息患或利托那韋。 12 暴露后預(yù)防性用藥的推薦方案： 基本用藥程序：兩種逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，使用常規(guī)治療劑量，連續(xù)服用 28 天。 在對艾滋病病毒職業(yè)暴露事件的整個處理過程中，必須始終做好保密工作。及時報告天山區(qū)疾控中心，組織專家對暴露的級別和暴露源的病毒載量水平進行評估和確定。 三、艾滋病病毒暴露后的預(yù)防處理 （一）緊急局部處理： 用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。 醫(yī)務(wù)人員在進行侵襲性診療、護理操作過程中，要保證充足的陽光，并特別 11 注意防止被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或劃傷。 二、職業(yè)暴露的預(yù)防 醫(yī)務(wù)人員對所有病人的血液、體液 (包括羊水、心包液、胸腔液、腹腔液、腦脊液、滑液、陰道分泌物等人體物質(zhì)，下同 )及被血液、體液污染的物品均視為具有傳染性的病原物質(zhì)，在接觸這些物質(zhì)時，必須采取防護措施。 10 艾滋病病毒職業(yè)暴露預(yù)防處理方案 為維護醫(yī)務(wù)人員及其他部門 有關(guān)人員的職業(yè)安全，有效預(yù)防在工作中發(fā)生職業(yè)暴露感染艾滋病病毒，一旦發(fā)生職業(yè)暴露后最大限度的避免或減少艾滋病病毒感染，特制定本方案。 1實驗室用品（ 包括工作服）不得用于其他用途，不可將私人和無關(guān)的物品帶入實驗室。 實驗期間盡量避免使用利器，易碎器皿，禁止采用口腔吸液管。 9 艾滋病篩查實驗室安全防護制度 為確保實驗室人員的工作安全，防止交叉感染，請嚴(yán)格遵守安全防護制度 工作人員要完成與工作有關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn)，要了解 HIV 危害，提高全員安全意識，實驗室安全負責(zé)人要對工作和環(huán)境的安全負責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任保護自己和他人的安全。不得使用過期、劣質(zhì)試劑。 2. 每周上報周計劃，各組人員根據(jù)各崗情況，認(rèn)真、詳細填寫計劃表，務(wù)必注明詳細的名稱、規(guī)格、數(shù)量及品牌。問題嚴(yán)重者，應(yīng)及時上報科主任或主管加以解決。 3． 每月應(yīng)向總庫遞交儀器設(shè)備使用狀況表，并存檔。 三、 專業(yè)責(zé)任主管技師對本專業(yè)的所有報告單進行審核，審核的基本內(nèi)容有： 臨床醫(yī)師所申請的檢驗項目是否已全部檢驗，有無漏項； 檢驗結(jié)果的填寫是否清楚、正確； 檢驗報告單上所有內(nèi)容是否全部填寫完整； 有無非常異常的、難以解釋的結(jié)果； 有無書寫錯誤； 是否有需要復(fù)查的結(jié)果 當(dāng)發(fā)現(xiàn)檢驗結(jié)果有凝議時可指令本崗位人員對檢驗項目進行復(fù)查。 6 報告單簽發(fā)審核制度 一、 各崗位的工作由本崗位人員進行操作檢驗，然后填寫檢驗報告單。 (3) 因操作不當(dāng)，導(dǎo)致 設(shè)備故障，影響較大者。 （ 2）工作環(huán)境不能做到 5S 管理、違反生物安全者。 2. 由于責(zé)任 心 不強、不認(rèn)真執(zhí)行規(guī)章制度，不遵守操作規(guī)程或技術(shù)因素而引發(fā)檢驗錯誤，對病人未造成嚴(yán)重后果的，稱為差錯。C，保持 15—20 min； 、化學(xué)消毒方法 、廢棄物缸： 5000 mg/L 次氯酸鈉 、工作臺面及儀器表面： 75%乙醇 、溢出物： 5000 mg/L 次氯酸鈉 、污染的臺面和器具： 2020 mg/L 次氯酸鈉 實驗室中發(fā)生可疑樣品溢出時，應(yīng)及時用 75%乙 醇噴灑，然后用消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋 1015 分鐘，最后再用消毒劑清洗該地方，擦干。如：次氯酸鈉含有效氯 2020—5000mg/L， 75%乙醇和 2%戊二醛。 對初篩疑似陽性感染者不能告訴受檢者本人，更不能到處亂講。 HIV 標(biāo)本采集應(yīng)建立詳細的記錄本，記錄內(nèi)容包括：送檢單位、病人姓名、門診號、數(shù)量、種類（血清）、送樣者、接收者或采集者。 8. 實驗結(jié)束后，應(yīng)及時清理實驗現(xiàn)場和用品，對染菌帶毒的器具廢棄物應(yīng)嚴(yán)格進行消毒無菌處理。 5. 實驗和樓道內(nèi)必須配置足夠的安全防火措施，并定期檢查保養(yǎng)。 HIV 抗體初篩實驗室 SOP 文件 科室 ： 檢驗科 1 目 錄 第一部分 工作制度 ...................................................................................................... 2 實驗室工作制度 .................................................................................................... 2 HIV 標(biāo)本采集與接收登記制度 ............................................................................... 3 艾滋病實驗室保密制度 .......................................................................................... 3 艾滋病篩查實驗室常規(guī)消毒清理工作制度 .............................................................. 4 差錯事故處理制度 ................................................................................................. 5 報告單簽發(fā)審核制度 ............................................................................................. 6 設(shè)備管理制度 ........................................................................................................ 7 試劑管理制度 ........................................................................................................ 8 艾滋病篩查實驗室安全防護制度 ............................................................................ 9 艾滋病病毒職業(yè)暴露預(yù)防處理方案 ...................................................................... 10 第二部分 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 ............................................................................................. 13 第二章 樣品采集與處理 ...................................................................................... 13 第二章 標(biāo)準(zhǔn)操作程序 ......................................................................................... 14 一、北京金豪 ............................................................................................... 14 二、上海科華生物 ........................................................................................ 15 三、英科新創(chuàng) ............................................................................................... 16 第三章 結(jié)果報告與注意事項 ............................................................................... 18 第三部分 設(shè)備 SOP文件 ........................................................................................... 20 一、多功能自動酶標(biāo)儀 DNM9602 ...................................................................... 20 二、 DG3080 洗板機 ............................................................................................ 22 三、電熱恒溫水箱 ............................................................................................... 25 第四部分 流程圖 ....................................................................................................... 26 一、 HIV 抗體篩查流程圖 .................................................................................... 26 二、暴露級別的評估 ...........