【正文】 檢測器分類 濃度型檢測器： 檢測信號值與組分的濃度成正比。 ↓ ：分離度 ↑ ，分析時間 ↑ 。 填充柱、毛細管柱的比較 ? 毛細管柱具有較高的分離效率，表現(xiàn)為峰形尖而窄，柱效高，可以將填充柱分離不開的兩個峰完全分離開。 兩種方式： 靜態(tài)法：恒溫密閉系統(tǒng) ， 平衡時 ， 測定氣相組成； 動態(tài)法：吹掃 捕集法 ， 采用吸附劑吸附 ， 加熱解吸 。 ? 在高分子 、 生物醫(yī)學 、 考古學 、 地球化學 、 炸藥等領(lǐng)域有廣 泛應(yīng)用 。 氣固色譜中常用的吸附劑 特點： 可控制其孔徑大小及表面性質(zhì)；易填充均勻 ， 重現(xiàn)性好 。 六、基本分離方程 初始 k、 N、 a對分離度的影響 增大 k 增大 N t 改變 a 第三節(jié) 填充柱氣相色譜 1. 填充柱氣相色譜用載體 2. 氣液色譜用固定相 3. 氣固色譜 氣 液色譜的特點： ? (1)固定液品種多，可選擇范圍大； ? (2)可以根據(jù)需要選用合適的固定液用量，以改善分離效果； ? (3)氣 液色譜在通常操作條件下有良好的對稱峰； ? ⑷壽命長。 即： C =（ Cg + CL） H – u 曲線結(jié)論 A. 渦流擴散項與流速 u 無關(guān)； B. 此曲線有一最低點，此點流速即 uopt兼顧了分子擴散項和傳質(zhì)阻力項，使兩者之和最??； C. 在 uopt附近曲線平坦，因此可適當提高流速以節(jié)省時間，同時板高 H并沒有增大多少； D. 在低流速區(qū) ,分子擴散項占主導 ,流動相使用重載氣 。第姆特方程式 ） : H = A + B/u + Cu H：理論塔板高度 (cm) ， u：載氣的線速度 (cm/s) 1. 渦流擴散項－ A A = 2λdp dp：載體顆粒的平均直徑 λ：填充不均勻因子（與載體顆粒大小、分布、填充均勻性等有關(guān)） 2. 分子擴散項（縱向擴散項） —B/u B = 2 γ Dg γ： 彎曲因子 （ 填充柱 ， γ=~； 毛細管柱 ， γ=1） Dg：試樣組分分子在氣相中的擴散系數(shù) （ cm222/139。 （ 2） 半峰寬 (Y1/2)： 的寬度 Y1/2 = ? （ 3） 峰底寬 (Wb)： Wb=4 ? Wb= Y1/2 二、分配系數(shù)與容量因子 分配系數(shù) K： 組分在兩相間的濃度比 容量因子 k： 組分在 兩相間的 質(zhì)量比； 容量因子 k與分配系數(shù) K的關(guān)系為： β為相比 ：流動相體積與固定相體積之比 填充柱 的 相比： 5～ 35； 毛細管柱的相比： 50～ 200 MRMMRtttttk 39。 （ 1）用時間表示的保留值 保留時間（ tR）： 從進樣到某個組分的色譜峰頂點之間的時間間隔 死時間（ tM）： 不被固定相滯留的組分 從進樣開始、通過色譜柱、到出現(xiàn)峰最大值所 需要的時間。 2. GC中常用作的載氣的氣體有 N He、 H Ar。 優(yōu)點是薄層強度高、使用方便，缺點是不能用濃硫酸作顯色。沒有黏結(jié)劑的吸附劑以字母“ H‖表示。而 HPLC是在封閉的系統(tǒng)內(nèi)，流動相流量靠泵控制，溶劑選擇受檢測器限制，固定相需再生。 ? 將試樣點在色譜濾紙或?qū)游霭宓囊欢耍⒃摱私谧鳛榱鲃酉嗟娜軇ǔ７Q之為展開劑）中，隨著溶劑向上的移動，經(jīng)過試樣點時，帶動試樣向上運動。 ? 因 TLC法設(shè)備簡單，分析速度快，分離效率高，結(jié)果直觀，很快被用作定性和半定量的方法。 常用的吸附劑 有：硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性碳等 硅 膠 ? 吸附性來源于硅羥基 ? 硅羥基有三種 結(jié)合型 活性型 游離型 ? 三種硅羥基吸附性強弱為： ? 硅膠吸附劑的缺點：對弱酸性敏感的化合物會被破壞 氧化鋁 ? 吸附性來源于鋁原子上未公用電子對 ? 堿性吸附劑，適用于堿性（如生物堿）和中性化合物的分離 ? 缺點：有時會引起 異構(gòu)化、氧化、皂化、脫除氯化氫形成雙鍵 等副作用。 液相色譜：高沸點 、 熱不穩(wěn)定 、 生物試樣的分離分析 。 手性異構(gòu)體 ?！?色譜分析 》 ? 第一章 緒論 ? 第二章 經(jīng)典柱層析 ? 第三章 平面色譜法 ? 第四章 氣相色譜法 ? 第五章 高效液相色譜法 ? 第六章 其他色譜技術(shù) ? 第七章 色譜分析樣品處理 參考書目 (1) 傅若農(nóng) 色譜分析概論 (2) 達世祿 色譜學導論 (3) 鄒漢法 高效液相色譜法 (4) 劉虎威 氣相色譜方法及應(yīng)用 (5) 何麗一 平面色譜方法及應(yīng)用 第一章 緒論 混合物最有效的分離、分析方法 俄國植物學家 茨維特 于 1903年研究 植物色素 時使用的示意 裝置： ? 其中的一相固定不動，稱為 固定相 ； ? 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為 流動相 。 ? 兩相及兩相的相對運動構(gòu)成了色譜法的基礎(chǔ) 色譜法的特點 （ 1） 分離效率高 復(fù)雜混合物 ， 有機同系物 、 異構(gòu)體 。 （ 4） 應(yīng)用范圍廣 氣相色譜：沸點低于 400℃ 的各種有機或無機試樣的分析 。 液相色譜 液固色譜 液液色譜 流動相為液體 （淋洗液）固定相為液體 按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細管柱色譜 第二章 經(jīng)典柱層析 ? 1. 吸附的分類 ? 物理吸附（特點：無選擇性；吸附與解吸可逆） ? 常用的硅膠、氧化鋁為這一類型； 應(yīng)用最廣 ? 化學吸附（特點：具有選擇性；吸附十分牢固，甚至不可逆） ? 如黃酮等酚酸性化合物被氧化鋁吸附、生物堿被硅 ? 膠的吸附； 應(yīng)用較少 ? 半化學吸附（介于上述之間，如聚酰胺對黃酮、酚類、醌類的 ? 氫鍵吸附） 有一定應(yīng)用 ? 2. 極性及其強弱判斷 ? 極性強弱是支配物理吸附過程的主要因素 ? 所謂極性乃是一種抽象概念，用以表示分子中電荷不對稱的程度，大體上與偶極矩、極化度、介電常數(shù)等概念相對應(yīng) 官能團的極性強弱比較 ? 3. 吸附色譜 ? 吸附色譜法 ,是指用吸附劑作固定相 ,利用試樣對吸附劑表面的吸附差異來進行分離分析的方法 ? 吸附色譜三要素 （吸附劑、洗脫劑、 試樣） 吸附劑一般是多孔性物質(zhì)，具有較大的比表面積，在表面有許多吸附中心。 1965年德國化學家 Stahl出版了 “ 薄層色譜法 ” 一書，推動了這一技術(shù)的發(fā)展。 ? 薄層層析流動相的移動是依靠毛細作用。 經(jīng)典柱層析 吸附薄層層析 分離時間 幾小時 幾分鐘～十幾分鐘 分離能力 較差 強 吸附劑粒度 粗，一般 100～200目 細 應(yīng)用范圍 制備性分離 分析，小量制備 兩者關(guān)系 TLC與高效液相色譜的比較 – 固定相和流動相 ? TLC——流動相流動靠毛細作用力，流動相選擇較少受限制，固定相不用再生。 Ls ? 相對比移值 ? 理論塔板數(shù) : n=16(D/W)2 ? 理論塔板高度 : H=L/n 分離度 ? 分離數(shù) : 第二節(jié) TLC的制板、點樣、 展開、顯色 黏合劑： ? 無機黏結(jié)劑 ——石膏（硫酸鈣），添加石膏的吸附劑以字母“ G‖表示。 ? 有機黏結(jié)劑 ——羧甲基纖維素鈉（ CMC鈉）、淀粉、聚乙烯醇、高分子聚合物等。 薄層吸收掃描法 薄層熒光掃描法 第四節(jié) TLC的應(yīng)用 1. 用于柱層析后相同組分的合并 2. 有機合成監(jiān)控反應(yīng)，摸索最佳條件 3. 制備有機化合物 4. 中藥材的鑒定 第四章 氣相色譜法 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 氣相色譜術(shù)語、理論 第三節(jié) 填充柱氣相色譜 第四節(jié) 毛細管柱氣相色譜 第五節(jié) 裂解氣相色譜及頂空氣相色譜 第六節(jié) 氣相色譜儀 第七節(jié) 衍生化氣相色譜法 第八節(jié) 氣相色譜的定性與定量 第九節(jié) 氣相色譜的應(yīng)用 1. GC：以氣體（即載氣）為流動相的柱色譜分離技術(shù)。 第一節(jié) 概述 GC按柱直徑粗細分類 1. 填充柱：將固定相填充在內(nèi)徑 4mm的金屬管或玻璃管內(nèi) 2. 毛細管柱：使用內(nèi)徑 璃管或石英管 GC按分離機理分類 方 法 固 定 相 應(yīng) 用 氣固色譜（ GSC） 吸附劑 （碳、分子篩、高分子多孔小球） 永久性氣體、低沸點的烴類， GDX—水 氣液色譜（ GLC） 載體 +固定液 （涂漬、鍵合） 應(yīng)用很廣 GC的特點 1. 分離效率高（填充柱上千塊塔板；開管柱106塊塔板） 2. 分析速度快 3. 樣品用量少（檢測限低，高靈敏檢測器） 4. 缺點：（約 20%樣品適用） A. 樣品須能氣化（ 350度下有一定的揮發(fā)性） B. 熱穩(wěn)定性要好 C. 定性困難 第二節(jié) 氣相色譜術(shù)語、理論 1. 氣相色譜流出曲線 2. 分配系數(shù)與容量因子 3. 塔板理論 4. 速率理論 5. 分離度 6. 基本分離方程 一、 氣相色譜流出曲線 僅有流動相 （ 無試樣 ）通過檢測器時 ， 檢測到的信號為基線 。 C. 亦稱 分離因子 a 、 分配系數(shù)比 、 選擇性系數(shù) 、 選擇 因子 4. 區(qū)域?qū)挾? （ 1） 標準偏差 (?)： 色譜峰寬度的一半 。 ? 當組分進入柱后，組分在兩相間進行多次分配，最后和固定相作用力較小的組分先從“塔頂”（即柱出口）逸出，從而與另一組分（和固定相作用力較大）分離 色譜塔板理論的五點假設(shè) 1. 組分在氣液兩相間可瞬間完成分配平衡 2. 所有的物質(zhì)在開始時全部進入零號塔板 3. 分配系數(shù)在每塊塔板里都一樣 4. 一個塔板和另一個塔板之間沒有縱向擴散 5. 載氣不是連續(xù)進入色譜柱，而是脈沖式進入色譜柱，即一個塔板體積的載氣進入后，再進入另一個塔板體積的載氣 理論塔板數(shù)的計算 色譜柱長： L， 虛擬的塔板間距離