【正文】 P3 1 4 O H G A G外顯子 1 外顯子 2 O H 外顯子 1 U G O A G外顯子 1 外顯子 2圖 1 3 3 2 核 RN A 的剪接反應(yīng) ( 仿 B. L e w i n :《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 0 . 5 )mRNA前體的 剪接過(guò)程 第一步： 轉(zhuǎn)酯反應(yīng)。 真核 tRNA的加工和原核的區(qū)別 (1)真核 tRNA前體中無(wú)二聚體和多聚體； (2)增加了剪接內(nèi)含子的過(guò)程； (3)都要加 CCA。 d 3d 2 d4 d1 d5 d6 A G O H 活性中心 外顯子 1 外顯子 2 圖 1 3 2 9 Ⅱ 類內(nèi)含子的二級(jí)結(jié)構(gòu)( 仿 B . L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 0 . 1 5 )(二 )剪接機(jī)制 ? 無(wú)需 鳥(niǎo)苷 的輔助 ， 但需鎂離子的存在 。 核酶和傳統(tǒng)酶的區(qū)別： ? (1)一般的酶是純的蛋白質(zhì)；而核酶是 RNA或帶有蛋白的 RNA； ? (2)核酶既是催化劑又是底物 ；而酶僅催化反應(yīng) 。 3 39。 339。 外顯子 1 內(nèi)含子 外顯子 2 轉(zhuǎn)錄 剪接 + 凝膠電泳 凝膠電泳 凝膠電泳 3 5 SRN A 環(huán)狀內(nèi)含子 線型內(nèi)含子圖 1 3 2 2 四膜蟲(chóng) 3 5 S RN A 保溫前后的電泳結(jié)果 ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 1 ) 內(nèi)含子插入 β 半乳糖苷酶基因的第 10 個(gè)密碼子中 轉(zhuǎn)錄 剪接 翻譯 β 半乳糖苷酶 β 半乳糖苷酶 使菌落呈藍(lán)色 圖 1 3 2 7 內(nèi)含子活性的檢測(cè) ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 ， Fi g 3 1 . 5 ) （一） I型內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 1. 其邊界序列為 5′UG 3′； 2. 具有中部核心結(jié)構(gòu) （ Central core strucature） （ internal guide seguence IGS） 外顯子 1 G O H 5 C U C U C U A 339。 ) 位點(diǎn) 右 (3 39。U ? … NNNNC G ? G dA區(qū)域。 在新生 RNA中出現(xiàn) 發(fā)卡式結(jié)構(gòu) 會(huì)導(dǎo)致 RNA聚合酶的暫停，破壞 RNADNA雜合鏈 539。 作用： ρ因子即附著在新生的 RNA鏈上，靠ATP水解產(chǎn)生的能量，沿著 5‘→ 3’方向朝 RNA聚合酶移動(dòng)，到達(dá) RNA的 3‘OH端后取代了暫停在終止位點(diǎn)上的 RNA聚合酶，并從模板和酶上釋放RNA，完成轉(zhuǎn)錄過(guò)程。dA區(qū)域。 在新生 RNA中出現(xiàn) 發(fā)卡式結(jié)構(gòu) 會(huì)導(dǎo)致 RNA聚合酶的暫停，破壞 RNADNA雜合鏈 539。 此 反 應(yīng) 并 不 需 要AAUAAA序列 ， 但需要一個(gè)識(shí)別寡聚 A并指導(dǎo) poly（ A） 聚合酶延伸的刺激因子 。 ?多聚 A是轉(zhuǎn)錄后加上去的。 作用 :是與核糖體 30S小亞基內(nèi)的 16SrRNA的 3/端序列互補(bǔ)，是起始的 tRNA正確的定位于 mRNA的 5/端結(jié)構(gòu)的起始密碼子上 原核 mRNA 的 SD序列 ? 真核生物 mRNA特征 半衰期相對(duì)較長(zhǎng)； 許多 mRNA以 單順?lè)醋?的形式存在； mRNA的 5/端存在 帽子結(jié)構(gòu) ； 絕大多數(shù) mRNA 3/段有多聚 A的 尾巴結(jié)構(gòu) 。 原核與真核生物 mRNA特征比較 原核生物 mRNA特征 半衰期短； 許多 mRNA以 多順?lè)醋?的形式存在； 多順?lè)醋?指一條 mRNA可以編碼多條蛋白質(zhì)肽鏈。 5/端的 AUG上游有 7~12核苷酸的保守區(qū) SD序列 。 帽子的類型 （ 4）加帽生化過(guò)程 Ⅰ 剪切前加帽 如呼腸病毒， 牛豆病毒 Ⅱ 剪切后加帽 如皰疹病毒和口炎病毒 G N1 N2 N3 G N1 N2 N3 磷酸水解酶 P P P P P P P … P P P P P P … ＋ P i G N1 N2 N3 G m R NA 鳥(niǎo)苷脫酰轉(zhuǎn)移酶 P P P P P P … ＋ P P P OH 加帽酶 G G N1 N2 N3 S A M OH P P P P P P P … ＋ P P i ( S 腺苷基甲硫氨酸 ) 7mG m G m N1 N2 N3 OH P P P P P P P … 圖 1 3 真核生物剪切前加帽的生化反應(yīng)過(guò)程 G N1 N2 N3 N1 N2 N3P P P P … P P P P … P P P P … G N1 N2 N3 G