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《氨基酸紙層析》ppt課件-全文預(yù)覽

  

【正文】 作用機(jī)制? 七、 思考題答案 ? 1 、答:質(zhì)量比和 pH都有影響。 2022/5/29 20 2022/5/29 21 2022/5/29 22 展層: 向?qū)游龈字屑尤雽游鋈軇?, 液面不要超過(guò)點(diǎn)樣線 ,( 高約 , 約 50ml溶劑 ) 將濾紙點(diǎn)樣點(diǎn)朝下放入層析溶劑中 , 將層析缸密閉 , 待溶劑到達(dá)標(biāo)志線后取出冷風(fēng)吹干 。 (2)溶劑系統(tǒng): 正丁醇:甲酸:水 =15: 3: 2( 體積比 ) 搖勻; (3)顯色劑: %的茚三酮丙酮溶液 。 2022/5/29 15 ( 6)展開(kāi)方式: 上行法 Rf??; 下行法 (層析缸上部有一盛展開(kāi)劑的液槽,濾紙點(diǎn)樣端向上進(jìn)入槽中,重現(xiàn)性差,斑點(diǎn)易擴(kuò)散) Rf大 ; 環(huán)行法 (最好用無(wú)方向性的特制濾紙)用圓形濾紙層析時(shí),由于內(nèi)圈較外圈小,限制了溶劑的流動(dòng), Rf較小。 再次 , 溶劑系統(tǒng)必須新鮮配制 , 如正丁醇 甲酸 水系統(tǒng)久放易引起酯化 。不同物 質(zhì)分配系數(shù)不同, Rf也就不同。 流動(dòng)相 :有機(jī)溶劑和濾紙親和力弱 , 所以在濾紙毛細(xì)管中自由流動(dòng) , 形成 流動(dòng)相 。 將樣品點(diǎn)在濾紙上,進(jìn)行展層,樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進(jìn)行分配。 柱層析中一般稱為洗脫劑,薄層層析時(shí)稱為展層劑。 2022/5/29 4 二、定義 層析技術(shù) 是根據(jù)被分離的混合物中各組分的 理化性質(zhì) (分子的形狀和大小、分子極性、吸附力、分子親和力、分配系數(shù)等)的不同,使各組分在兩相(一相為固定的,稱為 固定相 ;另一相流過(guò)固定相,稱為 流動(dòng)相 )中進(jìn)行分配。 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 2022/5/29 3 層析技術(shù) (chromatography 色譜技術(shù) ) 一 、 發(fā)展史 :
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