《氨基酸紙層析》ppt課件(文件)
【正文】 不同型號的濾紙，其厚薄程度、纖維松緊度各不相同，因此，濾紙纖維結(jié)合水的量不一樣，兩相的體積比也就不同， Rf也不同； 另外，濾紙的雜質(zhì)也會影響 Rf，必要時進行預處理（可用 ～ HCl處理除去金屬離子） . 2022/5/29 14 （ 5）室驗室的溫度和時間 : 溫度影響物質(zhì)在兩相中的溶解度，即影響 分配系數(shù) ； 也影響濾紙纖維的水合作用從而影響 固定相的體積 ；也影響溶劑系統(tǒng)的含水量，即影響流動相的組分比例 。 2022/5/29 16 實驗材料： 谷氨酸 、 組氨酸 、 脯氨酸 、 亮氨酸標準品 儀器： (1)毛細管 (2)電熱吹風機 (3)層析缸 (4)層析濾紙 (5)小型玻璃噴霧器 (6)鉛筆 、 直尺等 。 濾紙的準備： 取一長方形濾紙，在濾紙橫向?qū)膬蛇叄噙呇?cm處，各畫兩條平行線，一條作前沿標志，一條作點樣線，在點線上每隔 2cm畫一個 “ +”作為點樣位置，共 5個點。 2022/5/29 23 五 、 實驗結(jié)果與計算： 用鉛筆將層析色譜輪廓和中心點描出來； 測量原點至色譜中心和至溶劑前沿的距離 ， 計算 各種已知氨基酸和未知氨基酸的 Rf值 。 2022/5/29 26 七、 思考題答案 ? 2 、答： ①利用不同組分在流動相和固定相之間的分配系數(shù)不同 ,使之分離。脯氨酸等仲胺氨基酸與茚三酮反應生成黃色物質(zhì)。 ②指一定溫度下，處于平衡狀態(tài)時，組分在固定相中的濃度和在流動相中的濃度之比，以 K表示。 2022/5/29 24 2022/5/29 25 六、思考題： 分析影響分配系數(shù)的因素有哪些？ 何謂分配層析法，分配系數(shù)？ 茚三酮丙酮溶液的
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